尿酸酶、及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及经突变的尿酸酶，所述尿酸酶的结合位点和催化活性位点中的至少一个Y和/或至少一个M被突变，其中，所述Y被突变为H、F、S和G中的任意一种，所述M被突变为V、L和I中的任意一种。本发明专利技术的经突变的尿酸酶可抵抗因服用对乙酰氨基酚而带来的干扰。此外，本发明专利技术还涉及相关的制备方法、检测方法及用途。

【技术实现步骤摘要】
尿酸酶、及其制备方法和用途
本专利技术涉及尿酸检测领域，尤其涉及一种新的、经突变的尿酸酶。
技术介绍
生物体中，尿酸(UricAcid,UA)是嘌呤的代谢产物，它在血清中的溶解度极低。若缺乏有活性的尿酸酶，人体无法代谢尿酸形成其他溶解度更高的产物(如尿囊素、尿素等)。一般情况下，人体产生的尿酸和肾脏清除的尿酸可以维持平衡。但是，当人体产生的尿酸过多或者肾脏清除尿酸的能力降低，血清中会积累尿酸。目前，最常用的检测血清尿酸水平的方法是基于Trinder反应的尿酸酶-过氧化物酶法。这种方法的基本原理是利用其他生物(如真菌、细菌等)来源的尿酸酶将尿酸、水和氧气催化生成尿囊素、二氧化碳和过氧化氢。生成的过氧化氢可以与4-氨基安替比邻以及色原在过氧化物酶的催化作用下生成醌系色素和水。其中生成的醌系色素在特定波长的可见光有明显的吸收峰。可以通过检测吸光度确定生成的醌系色素的数量，进而可以推算出生成的过氧化氢以及样本中尿素的含量。对乙酰氨基酚(又称扑热息痛，Paracetamol)是一种常见的解热镇痛药。据报道，对于服用对乙酰氨基酚的个体，存在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种经突变的尿酸酶，其特征在于，所述尿酸酶的结合位点和催化活性位点中的至少一个Y和/或至少一个M被突变，其中，所述Y被突变为H、F、S和G中的任意一种，所述M被突变为V、L和I中的任意一种。/n

【技术特征摘要】
1.一种经突变的尿酸酶，其特征在于，所述尿酸酶的结合位点和催化活性位点中的至少一个Y和/或至少一个M被突变，其中，所述Y被突变为H、F、S和G中的任意一种，所述M被突变为V、L和I中的任意一种。


2.权利要求1所述的经突变的尿酸酶，其中，所述Y位于所述尿酸酶的MotifA中，如MotifA的第1位，所述M位于所述尿酸酶的MotifB中，如MotifB的第10位。


3.权利要求1或2所述的经突变的尿酸酶，其中，所述Y被突变为H或G。


4.权利要求1或2所述的经突变的尿酸酶，其中，所述经突变的尿酸酶进一步包括位于非结合位点且位于非催化活性位点处的至少一个额外突变。


5.权利要求4所述的经突变的尿酸酶，其中，所述额外突变是将选自C、M、Y和W的氨基酸残基突变为除C、M、Y和W外的氨基酸残基，和/或使选自C、M、Y和W的氨基酸残基缺失。


6.权利要求4或5所述的经突变的尿酸酶，其中，所述额外突变发生在所述结合位点和/或催化活性位点附近，例如所述结合位点和/或催化活性位点中每一个的上游5个残基和/或下游5个残基以内。


7.权利要求1、2和5任一项中所述的经突变的尿酸酶，其中，所述尿酸酶源自Aspergillusflavus、Bacillussp.TB-90或Candidautilis。


8.权利要求7所述的经突变的尿酸酶，其中，所述尿酸酶源自Aspergillusflavus并存在Y9H突变；可选的，额外突变选自Y17F、Y47F、Y66H、M232L和Y233F所组成的组。


9.权利要求7所述的经突变的尿酸酶，其中，所述尿酸酶源自Bacillussp.TB-90并存在Y11H和M76I突变；可选的，额外突变选自M9Q、Y10R和Y254F所组成的组。


10.权利要求7所述的经突变的尿酸酶，其中，所述尿酸酶源自Candidautilis并存在Y10H突变；可选的，额外突变选自Y49F、Y112V和M238L所组成的组。


11.一种核酸，其编码权利要求1～10中任一项所述的经突...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭庆功，林春娇，张裕平，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44