一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的检测方法，采用高分辨气相色谱‑高分辨质谱结合同位素稀释法进行定量分析。包括以下步骤：(1)待测物制备；(2)粗脂肪去除与含量测定；(3)多层硅胶柱净化；(4)碱性氧化铝柱净化；(5)上机检测。该方法不仅能检测12种有毒的二噁英类多氯联苯和6种指示性多氯联苯而且能获得其他多氯联苯同系物，共计209种多氯联苯同系物的含量及分布模式信息。与传统的低分辩质谱和电子捕获检测器(ECD)等方法相比减少了基质干扰和假阳性结果，大大降低了方法检出限，提高了定量结果的准确性。该方法净化过程简单，适用面广，适合各类动物源性食品中多氯联苯的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法
本专利技术属于食品相关产品检测
，具体涉及一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法。
技术介绍
多氯联苯(Polychlorinatedbiphenyls，简称PCBs)是一类卤代芳香族化合物，根据氯原子在苯环上取代的位置和数目，共有209种同系物，以编号命名为PCB1-PCB209。PCBs的化学性质极稳定，曾在工业上被大量生产。据估计，全世界已生产和应用中的PCBs超过100万吨。PCBs在使用过程中通过泄漏、流失、废弃、蒸发、燃烧、堆放、掩埋及废水处理等过程进入环境中，从而对水源、大气和土壤造成污染并通过食物链的生物富集作用污染生物。PCBs能对人体和动物中枢及周围神经系统、生殖系统及免疫系统等造成致命损伤。作为一种具有致癌、致畸、致突变效应的全球性污染物，PCBs是最早被列入《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》的一类持久性有机污染物(PersistentOrganicPollutants，简称POPs)。我国现行的检测食品中多氯联苯的标准有美国环保署《Method1668,2010，RevisionCChlorinatedBiphenylCongenersinWater,Soil,Sediment,Biosolids,andTissuebyHRGC-HRMS》、《GB5009.205-2013食品安全国家标准食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定》以及《GB5009.190-2014食品安全国家标准食品中指示性多氯联苯含量的测定》，然而上述标准的前处理净化方法繁琐，耗时长，且难以获得复杂样品中PCBs同系物的详细信息。因此急需一种高效全面的针对动物源性食品的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法，采用高分辨气相色谱-高分辨质谱结合同位素稀释法进行定量分析。该方法前处理快速、安全，基质干扰少，采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪HRGC/HRMS检测，能准确的获得动物源性食品中209种多氯联苯同系物的含量及分布模式信息。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法，包括以下步骤：所述动物源性食品包括非油脂类样品和油脂类样品，所述非油脂类样品源于肉类及其加工产品，或奶粉、奶酪或液体奶，或鱼、虾、蟹或软体类动物及其加工产品、或蛋类及其加工产品；所述油脂类样品源于黄油、植物油或可食用动物油；所述肉类包括猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、兔、狗、猫、驴；所述蛋类包括鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋或蛇蛋。(1)待测物制备：对于非油脂类样品，称取干燥后的非油脂类样品，加入13C标记的提取内标，使用有机溶剂提取，得提取液，将提取液浓缩，得浓缩液a；提取完的样品去除有机溶剂后，干燥至恒重；对于为油脂类样品，加入13C标记的提取内标后直接用有机溶剂溶解后进行浓缩，得浓缩液a；其中，所述干燥后的非油脂类样品或油脂类样品与有机溶剂的比例关系为1～10g：100～300mL；(2)粗脂肪去除与含量测定：向步骤(1)得到的浓缩液a中加入浓硫酸，震荡酸化去除大部分脂肪，得酸化后的浓缩液a；所述非油脂类样品的干重与浓硫酸的质量比为1:0.4～2；所述油脂类样品的质量与浓硫酸的质量比为1:1～3；震荡的速度为100～200r/min，震荡时间为0.5～4h，优选为1～4h；具体的，所述肉类样品及其加工产品的干重与浓硫酸的质量比为1:0.8～2，奶粉、奶酪或液体奶的干重与浓硫酸的质量比为1:0.4～1.5，所述黄油、植物油或可食用动物油的质量与浓硫酸的质量比为1:1～3，所述鱼、虾、蟹或软体类及其加工产品的干重与浓硫酸的质量比为1:0.4～1.8，所述蛋类及其加工产品的干重与浓硫酸的质量比为1:0.5～1.8；对于非油脂类样品，将步骤(1)中干燥至恒重的样品称重，得提取后的样品重量；样品的粗脂肪质量为样品在提取前后的质量差；对于油脂类样品，样品的粗脂肪质量即为提取前的样品质量；(3)多层硅胶柱净化：向步骤(2)中酸化后的浓缩液a中加入中性硅胶，充分震荡搅拌至不挂壁，将搅拌均匀的硅胶全部转移至多层硅胶柱，用正己烷洗脱，浓缩，得浓缩液b；其中，所述酸化后的提取液a与中性硅胶的比例关系为1～2mL：2～6g。所述多层硅胶柱从下至上依次按照玻璃棉、无水硫酸钠、中性硅胶、碱性硅胶、中性硅胶、酸性硅胶、中性硅胶、硝酸银硅胶、中性硅胶和无水硫酸钠的顺序干法装填；其中，从下至上所述玻璃棉、无水硫酸钠、中性硅胶、碱性硅胶、中性硅胶、酸性硅胶、中性硅胶、硝酸银硅胶、中性硅胶与无水硫酸钠的比例关系为0.5～2cm：0.5～3g：0.5～3g：2～6g：0.5～3g：4～12g：0.5～3g：2～6g：0.5～3g：0.5～2g；(4)碱性氧化铝柱净化；将步骤(3)得到的浓缩液b过碱性氧化铝柱，采用正己烷和二氯甲烷的混合溶液洗脱，将洗脱液浓缩后氮气吹至近干，得多氯联苯浓缩液c；其中，所述碱性氧化铝柱从下至上按照玻璃棉、无水硫化钠、碱性氧化铝和无水硫酸钠的顺序干法装填；从下至上所述玻璃棉、无水硫酸钠、碱性氧化铝与无水硫酸钠的比例关系为0.5～2cm：0.5～3g：5～15g：0.5～3g；(5)上机检测：将步骤(4)得到的浓缩液c加入13C标记的回收率内标复溶，采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪HRGC/HRMS检测，获得动物源性食品中209种多氯联苯同系物的含量及分布模式信息。基于上述技术方案，优选的，步骤(1)中，对于非油脂类样品，干燥后的非油脂类样品的制备方法为：将非油脂类含水样品匀质化后进行冷冻干燥或无水硫酸钠干燥。基于上述技术方案，优选的，步骤(1)中，对于蛋类样品，亦可用烘烤至蛋白蛋黄完全凝固，之后去壳匀质化，使用冷冻干燥或无水硫酸钠干燥；所述蛋类样品烘烤加热的温度为85～110℃，加热时间为45～90min；烘烤可采用烘箱、红外干燥器或烤箱。基于上述技术方案，优选的，步骤(1)中，提取采用的有机溶剂为正己烷、环己烷、二氯甲烷、甲苯、丙酮、石油醚中的一种或多种的组合；提取时采用索氏提取器提取或加速溶剂萃取仪提取。基于上述技术方案，优选的，步骤(1)中，所述有机溶剂与浓缩液a的体积比为100～300：1～2；所述有机溶剂为正己烷和二氯甲烷的混合溶液，所述正己烷与二氯甲烷的体积比为98:2～1:1。基于上述技术方案，优选的，步骤(3)中，所述酸性硅胶是酸的质量百分含量为20～50％酸性硅胶，所述碱性硅胶是碱的质量百分含量为1～30％碱性硅胶，所述硝酸银硅胶是硝酸银的质量百分含量为5～20％硝酸银硅胶，所述中性硅胶使用前先在400～650℃加热活化2～6h；所述多层硅胶柱在装填完成后采用正己烷预冲洗；过多层硅胶柱时，所述淋洗用的正己烷体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)待测物制备：对于非油脂类样品，称取干燥后的非油脂类样品，加入

【技术特征摘要】
1.一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)待测物制备：对于非油脂类样品，称取干燥后的非油脂类样品，加入13C标记的提取内标，使用有机溶剂提取，得提取液，将提取液浓缩，得浓缩液a；提取完的样品去除有机溶剂后，干燥至恒重；
对于为油脂类样品，加入13C标记的提取内标后直接用有机溶剂溶解后进行浓缩，得浓缩液a；
其中，所述干燥后的非油脂类样品或油脂类样品与有机溶剂的比例关系为1～10g：100～300mL；
(2)粗脂肪去除与含量测定：向步骤(1)得到的浓缩液a中加入浓硫酸，震荡酸化，得酸化后的浓缩液a；
所述非油脂类样品的干重与浓硫酸的质量比为1:0.4～2；所述油脂类样品的质量与浓硫酸的质量比为1:1～3；
所述震荡的速度为100～200r/min，震荡时间为0.5～4h；
对于非油脂类样品，将步骤(1)中干燥至恒重的样品称重，得提取后的样品重量；样品的粗脂肪质量为样品在提取前后的质量差；
对于油脂类样品，样品的粗脂肪质量为提取前的样品质量；
(3)多层硅胶柱净化：向步骤(2)中酸化后的浓缩液a中加入中性硅胶，搅拌均匀，转移至多层硅胶柱，用正己烷洗脱，浓缩，得浓缩液b；
其中，所述酸化后的提取液a与中性硅胶的比例关系为1～2mL：2～6g。
所述多层硅胶柱从下至上依次按照玻璃棉、无水硫酸钠、中性硅胶、碱性硅胶、中性硅胶、酸性硅胶、中性硅胶、硝酸银硅胶、中性硅胶和无水硫酸钠的顺序干法装填；其中，从下至上所述玻璃棉、无水硫酸钠、中性硅胶、碱性硅胶、中性硅胶、酸性硅胶、中性硅胶、硝酸银硅胶、中性硅胶与无水硫酸钠的比例关系为0.5～2cm：0.5～3g：0.5～3g：2～6g：0.5～3g：4～12g：0.5～3g：2～6g：0.5～3g：0.5～2g；
(4)碱性氧化铝柱净化；将步骤(3)得到的浓缩液b过碱性氧化铝柱，采用正己烷和二氯甲烷的混合溶液洗脱，将洗脱液浓缩后氮气吹至近干，得多氯联苯浓缩液c；
所述碱性氧化铝柱从下至上按照玻璃棉、无水硫化钠、碱性氧化铝和无水硫酸钠的顺序干法装填；其中，从下至上所述玻璃棉、无水硫酸钠、碱性氧化铝与无水硫酸钠的比例关系为0.5～2cm：0.5～3g：5～15g：0.5～3g；
(3)上机检测：将步骤(4)得到的浓缩液c加入13C标记的回收率内标复溶，采用高分辨气相色谱/双聚焦磁式质谱联用仪检测，获得动物源性食品中209种多氯联苯同系物的含量及分布模式。


2.根据权利要求1所述的一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法，其特征在于：步骤(5)中，对于WHO规定的12种有毒多氯联苯和环境中的6种指示性多氯联苯，所述的定量内标为目标化合物的13C同位素标记化合物；对于除上述18种多氯联苯之外其他的多氯联苯同系物，所述的定量内标为上述18种多氯联苯中特征离子质量数最接近的多氯联苯的定量内标；当最接近的多氯联苯的定量内标的质量数相同时，所述的定量内标为保留时间最相近的多氯联苯的定量内标。


3.根据权利要求1所述的一种用于动物源性食品中209种多氯联苯同系物的HRGC-HRMS检测方法，其特征在于：步骤(5)中，对于WHO规定的12种有毒多氯联苯和环境中的6种指示性多氯联苯，计算动物源性食品中209种多氯联苯同系物的含量及分布模式过程中的响应因子RF按公式(1)计算：



式中：
S1n——校正标准溶液中目标物的第一个特征离子M1的峰面积；
S2n——校正标准溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙帅，张亦弛，张海军，陈吉平，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21