一种基于三维立体网络材料的高通量蛋白质样品预处理方法技术

本发明专利技术涉及一种基于三维立体网络材料的高通量蛋白质样品预处理方法，可应用于细菌、细胞、组织等样品。样品经裂解、变性还原后与特异性修饰的三维网络材料反应，进行烷基化捕获蛋白质，后续经清洗以及酶解处理后产生的肽段可以进行质谱检测。该方法可以和96孔板或384孔板结合，形成一种高通量的蛋白质样品预处理方法。该预处理方法制备的肽段样品与分离鉴定平台具有很好的兼容性，在蛋白组研究中具有较好的实用性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白质组学样品预处理领域。

技术介绍

1、临床医学研究产生大量的生物学样本，对临床样品进行蛋白质组学分析是研究疾病发生机制、发现生物标志物的重要手段。目前没有合适的蛋白质组学样品预处理方法满足实际应用中大队列样本检测的需求。同时在合成生物学及代谢工程领域蛋白质工程化菌株的筛选研究中，通常需要对产生的海量样本进行蛋白质组学分析筛选。目前在该领域中对目标蛋白质的检测主要依赖于western blot方法。western blot方法通过抗体识别目标蛋白进行特异性检测，但处理过程繁琐，时间成本高，无法满足高通量需求。

2、基于生物质谱的蛋白质组学技术，因其具有较高的灵敏度与准确度成为蛋白质定性定量检测的有力工具，但常规的蛋白质组学样品预处理操作步骤繁多且耗时较久，难以满足如临床医学或合成生物学大量样本高通量检测的需求。因此发展高通量的蛋白质样品预处理方法具有重要研究意义和实用价值。

3、针对传统蛋白质组学样品预处理方法存在的操作步骤繁多、处理过程耗时久等问题，我们发展了一种基于三维立体网络材料的高通量蛋白质样品预处理方法。样本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于三维立体网络材料的高通量蛋白质样品预处理方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述三维立体网络材料为商品化尼龙丝网，目数为100-500目，优选300-500目。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：在网络材料及孔板表面进行环氧基团修饰的过程，将网络材料放置于孔板内，依次加入聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、环己醇、偶氮二异丁腈(AIBN)反应物进行聚合反应，其中，PEGDA、GMA、环己醇、AIBN的质量比为(0.4-0.5g)：(0.3-0.4g)：(0.2-0.3g)：(...

【技术特征摘要】

1.一种基于三维立体网络材料的高通量蛋白质样品预处理方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述三维立体网络材料为商品化尼龙丝网，目数为100-500目，优选300-500目。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：在网络材料及孔板表面进行环氧基团修饰的过程，将网络材料放置于孔板内，依次加入聚乙二醇二丙烯酸酯(pegda)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(gma)、环己醇、偶氮二异丁腈(aibn)反应物进行聚合反应，其中，pegda、gma、环己醇、aibn的质量比为(0.4-0.5g)：(0.3-0.4g)：(0.2-0.3g)：(0.005-0.01g)；

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽华，吴玉洁，随志刚，江波，刘欣欣，杨开广，张玉奎，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：