一种复方马缨丹片的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种复方马缨丹片的检测方法，检测方法是以山栀苷甲酯为指标成分进行质量检测方法，包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)HPLC检测。本发明专利技术方法的操作简便，专属性强，精密度和准确度较好，适用于复方马缨丹片中山栀苷甲酯含量测定项，有利于保证复方马缨丹片的质量稳定和临床疗效。

【技术实现步骤摘要】
一种复方马缨丹片的检测方法
本专利技术属于药物检测
，特别涉及一种复方马缨丹片的检测方法。
技术介绍
复方马缨丹片现收载于《国家食品药品监督管理局国家药品标准》，标准编号为WS-11177(ZD-1177)-2002-2012Z。复方马缨丹片由马缨丹、山芝麻、东风桔、地胆草、蜂窝草五味药材制备而成，具有清热解毒，疏风解表等功效，可用于风热感冒，发热，咽痛，咳嗽等症状，成分复杂，其药效是多种活性成分共同作用的结果。复方马缨丹片是唯一种以马缨丹为君药的中成药，马缨丹的主要成分有三萜类、环烯醚萜类、黄酮类、苯丙素类等化学成分，以山栀苷甲酯为代表的环烯醚萜类化合物具有镇痛、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多方面的药理活性作用。《ActaChromatographica》2003年1月收载的S.C.VERMA《RapidExtraction,Isolation,andQuantificationofOleanolicAcidfromLantanacamaraL.RootsUsingMicrowaveandHPLC–PDATechniques》中，只检测了齐墩果酸的含量，而当在复方马缨丹片中，齐墩果酸专属性不强，无法在质量控制中作为指标性成分。目前复方马缨丹片的检测方法主要为薄层色谱法鉴别，未有含量测定，未有合适的含量测定指标成分和检测方法，也没有将山栀子甲苷作为复方马缨丹片含量测定的指标成分的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对复方马缨丹片的检测现状，为有效地控制该复方制剂的内在质量，提供一种复方马缨丹片的检测方法，有利于对复方马缨丹片质量的有效控制及保证其临床疗效。为实现该目的采用的技术方案如下：一种复方马缨丹片的检测方法，是以山栀苷甲酯为指标成分进行质量检测；包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备：称取山栀苷甲酯对照品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：取复方马缨丹片，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。(3)HPLC检测：分别吸取步骤(1)和(2)所得的山栀苷甲酯对照品溶液和复方马缨丹片供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；其中，色谱条件与系统适用性试验为色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(7:93)为流动相；流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为35℃～40℃；检测波长为235～240nm，检测时间25min。所述步骤(1)对照品溶液的制备按照下述方法进行：取山栀苷甲酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含80μg的对照品溶液。所述步骤(2)供试品溶液的制备按照下述方法进行：取复方马缨丹片20片，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。所述步骤(3)中检测波长为235nm。所述步骤(3)中流速为1.0ml/min。所述步骤(3)中柱温为35℃。为更好的表明本专利技术的实质，将本专利技术的研究过程及结果简述如下：复方马缨丹片是由马缨丹、山芝麻、东风桔、地胆草、蜂窝草五味药材按规定处方制备而成，参考各药味物质基础有关文献([1]吴春,肖嘉棠,吴霞,王国才,周光雄,李药兰.地胆草指纹图谱研究和3种活性成分的含量测定[J].时珍国医国药,2013,24(07):1643-1645.[2]黄必奎.山芝麻化学成分与药理作用研究概况[J].广西中医药大学学报,2013,16(02):129-131.[3]尹永芹,黄峰,沈志滨,黄永昌,吴洁莹,赵沁园.东风桔化学成分研究[J].中草药,2013,44(05):537-540.[4]黄峰,吴洁莹,赵沁元,沈志滨.东风桔的化学成分和药理活性研究进展[J].现代药物与临床,2012,27(01):49-51.[5]苟亚峰,谬应林,孙世伟,桑利伟.马缨丹化学成分及生物活性研究进展[J].热带农业工程,2009,33(05):37-40.[6]朱小薇,李红珠.马缨丹化学成分与生物活性[J].国外医药(植物药分册),2002(03):93-96.[7]叶惠煊,邓芸,宋潇,等.马缨丹属植物马缨丹化学成分与药理活性研究进展[J].天然产物研究与开发,2017,29:401-410.)；以及我公司原先针对复方马缨丹片的含量测定项进行了一系列的研究工作，研究了槲皮素、柚皮苷、橙皮苷、齐墩果酸、芦丁在处方各味药材中的分布情况，但并未筛选出合适的指标成分和检测方法；现继续研究，分别考察了绿原酸、栀子苷、柠檬苦素、吴茱萸碱、山栀苷甲酯在单味药材水煎干浸膏粉的分布情况。1、复方马缨丹片五种药材干浸膏粉中绿原酸的检查：注：绿原酸对照品保留时间为9.432min。结果见图1，如图所示，绿原酸在马缨丹和东风桔干浸膏粉中未检测出来，在山芝麻、地胆草、蜂窝草干浸膏粉中均有分布。2、复方马缨丹片五种药材干浸膏粉中栀子苷的检查：注：栀子苷对照品保留时间为12.126min。结果见图2，如图所示，栀子苷在马缨丹、山芝麻、东风桔、地胆草、蜂窝草五种药材干浸膏粉中均有分布。3、复方马缨丹片五种药材干浸膏粉中柠檬苦素、吴茱萸碱的检查：注：柠檬苦素对照品保留时间为10.929min，吴茱萸碱对照品保留时间为18.191min。结果见图3，如图所示，东风桔、山芝麻干浸膏粉中均有检测出柠檬苦素；而吴茱萸碱在东风桔、蜂窝草干浸膏粉中均被检测出来且色谱峰响应值较低。4、复方马缨丹片五种药材干浸膏粉中山栀苷甲酯的检查：注：山栀苷甲酯对照品保留时间为8.062min。结果见图4，如图所示，除了马缨丹，其余药材干浸膏粉中均未检测出来，且峰响应值较高。“《中国药典》中药质量标准研究制定技术要求”中指出一般应根据中药的功能主治或活性试验结果来选择相应的专属性成分、活性成分作为含量测定的指标。综上所述，通过对绿原酸、栀子苷、柠檬苦素、吴茱萸碱、山栀苷甲酯五种成分在复方马缨丹片处方中单味药材干浸膏粉里分布情况的考察，结果表明，只有山栀苷甲酯专属性强，色谱峰响应值较高，同时又是君药马缨丹所含成分，具有良好的抗炎镇痛活性，与复方马缨丹片的功能与主治相适应，故选作复方马缨丹片含量测定的指标成分。为更好的表明本专利技术的实质，将本专利技术的方法学考察详述如下：1、仪器与试药仪器：Waters2695高效液相色谱仪；KQ-700DV型数控超声波清洗器(昆山市仪器有限公司)；TU-1901紫外-可见分光光度仪(北京普析通用仪器有限责任公司)；Milli-Q纯水系统(美国Millipore公司)；AgilentEcli本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种复方马缨丹片的检测方法，其特征在于：是以山栀苷甲酯为指标成分进行质量检测；包括如下步骤：/n(1)对照品溶液的制备：/n称取山栀苷甲酯对照品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液；/n(2)供试品溶液的制备：/n取复方马缨丹片，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；/n(3)HPLC检测：/n分别吸取步骤(1)和(2)所得的山栀苷甲酯对照品溶液和复方马缨丹片供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；/n其中，色谱条件与系统适用性试验为色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(7:93)为流动相；流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为35℃～40℃；检测波长为235～240nm，检测时间25min。/n

【技术特征摘要】
1.一种复方马缨丹片的检测方法，其特征在于：是以山栀苷甲酯为指标成分进行质量检测；包括如下步骤：
(1)对照品溶液的制备：
称取山栀苷甲酯对照品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液；
(2)供试品溶液的制备：
取复方马缨丹片，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)HPLC检测：
分别吸取步骤(1)和(2)所得的山栀苷甲酯对照品溶液和复方马缨丹片供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；
其中，色谱条件与系统适用性试验为色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(7:93)为流动相；流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为35℃～40℃；检测波长为235～240nm，检测时间25min。


2.根据权利要求1所述一种复方马缨丹片的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)对...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗菲菲，梁湘艳，李伟，黄胜，叶惠煊，颜冬兰，袁利群，
申请(专利权)人：海南九芝堂药业有限公司，九芝堂股份有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;46