【技术实现步骤摘要】
一种糖基受体、酶法合成寡糖链的快速分离的方法及应用
[0001]本专利技术属于糖类物质的分离
，具体涉及一种糖基受体、酶法合成寡糖链的快速分离的方法及应用。
技术介绍
[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]糖，作为三大生物分子之一，不仅是生物体不可或缺的重要成分，同时还介导了很多基本的生命过程，并与诸多疾病的产生及发展息息相关。为了进一步理解和研究糖的生物学功能，高纯度的寡糖及糖缀合物的有效获取是糖领域的一个关键问题。化学合成，作为解决稀缺性单糖、复杂寡糖及糖缀合物的强有力工具之一，为糖化学以及糖生物学研究的深入提供了可靠的物质基础。但是糖类化合物多官能团、多手性中心的特点及其合成过程中繁冗的纯化导致糖类化合物的合成具有很大的挑战性。因此科研工作者一直在努力发展一种有效可行的方法来合成糖链化合物及其缀合物。化学酶法利用化学合成的灵活多样性和酶的专一性制备了大量的寡糖但是分...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种糖基受体，其特征在于：结构式如式Ⅰ所示，G
‑
R
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(Ⅰ)；其中，G代表单糖或低聚糖；R代表巯基和式II2.如权利要求1所述的糖基受体，其特征在于：糖基受体为下列结构式中一种：糖基受体为下列结构式中的一种：式Ⅲ所示的二糖化合物、式Ⅳ所示三糖化合物、式
Ⅴ
所示的四糖化合物、式
Ⅵ
所示的五糖化合物、式
Ⅶ
所示的六糖化合物、式
Ⅷ
所示的三糖化合物、式
Ⅸ
所示的四糖化合物、式
Ⅹ
所示的五糖化合物、式
Ⅺ
所示的三糖化合物、式
Ⅻ
所示的四糖化合物、式
ⅩⅢ
所示的五糖化合物；
3.如权利要求1或2所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：所述方法为：将糖基体与醋酐反应后，将其全部裸露的羟基用乙酰基保护；然后用醋酸铵将全乙酰化乳糖的异头位的乙酰基进行脱除，在制备成三氯乙酰亚胺酯的糖基供体与2
‑
氯乙氧基乙醇进行β
‑
构型糖苷化反应，然后依次叠氮化，叠氮基的还原，脱保护和γ
‑
硫代丁内酯反应，即可获得。4.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：具体步骤为：1)糖基体、醋酐、醋酸钠进行回流反应得到固体化合物13；2)固体化合物13与醋酸铵、甲醇/四氢呋喃，进行反应，产物浓缩后得到的化合物溶解在二氯甲烷中加入三氯乙腈和DBU反应得到前步化合物，前步化合物与受体2
‑
氯乙氧基乙醇、活化的分子筛混合反应后，加入三氟甲磺酸三甲基硅酯继续反应，得到产物化合物
14；3)化合物14与N,N
‑
二甲基甲酰胺、叠氮钠和四丁基碘化铵回流反应得到化合物15；4)化合物15与硼氢化钠、硫酸铜、甲醇反应，将所得化合物与甲醇钠反应，再将所得产物与γ
‑
硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT反应，得到化合物1即糖基受体；优选的，步骤1)中糖基体、醋酐、醋酸钠的比例为5
‑
7mmol:5
‑
6mL:22
‑
24mmol；步骤1)中反应的温度为150
‑
170℃，反应的时间为5
‑
7h；优选的，步骤2)中化合物13与醋酸铵、三氯乙腈、DBU、2
‑
氯乙氧基乙醇、活化的分子筛的摩尔比例为1.0:2
‑
4:1.5
‑
3:0.01
‑
0.05:1.2
‑
2.0；优选的，步骤2)中化合物13与醋酸铵的反应温度为室温，反应时间为7
‑
9h，然后加入三氯乙腈和DBU后在室温下，反应的时间为0.6
‑
1.2h；加入受体2
‑
氯乙氧基乙醇、分子筛后，先在室温下反应15
‑
25min，然后在
‑
25～
‑
35℃下反应5
‑
15min；加入三氟甲磺酸三甲基硅酯后，在
‑
25～
‑
35℃下反应0.8
‑
1.2h。5.如权利要求4所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤3)中化合物14与N,N
‑
二甲基甲酰胺、叠氮钠和四丁基碘化铵的比例为1.0:1.0:0.3
‑
0.5；步骤3)中反应的温度为70
‑
90℃，反应的时间为10
‑
13h；或，步骤4)中，化合物15、硼氢化钠、硫酸铜、甲醇钠、γ
‑
硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT的比例为1.0mmol:1.1
‑
1.5mmol:0.2
‑
0.5mmol:0.5
‑
1.0mL 1.1
‑
1.5mmol:0.2
‑
0.5mmol；步骤4)中化合物15与硼氢化钠、硫酸铜、甲醇反应的温度为室温，反应的时间为1
‑
3h；所得化合物与甲醇钠室温下反应25
‑
35min，然后所得产物与γ
‑
硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT反应的温度为80
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