连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法，该制备方法包括以下步骤：活化羧基磁性微粒的羧基，制备活化后的羧基磁性微粒；在25℃～60℃的条件下，将dsDNA预热处理0.5h～3h，制备预热后的dsDNA；及在25℃～60℃的条件下，将4‑二甲氨基吡啶、活化后的羧基磁性微粒和预热后的dsDNA和混合反应，制备连接有dsDNA的磁性微粒。上述制备方法效率高、成本低且制得的连接有dsDNA的磁性微粒的特异性好。

【技术实现步骤摘要】
连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法。
技术介绍
双链DNA(dsDNA)抗体是一种能够与人DNA结合的自身抗体。90％以上的系统性红斑狼疮(SLE)病人的血清中均存在dsDNA抗体。dsDNA抗体的测定对于SLE的诊断和鉴别诊断、监视治疗和病情跟踪以及判断预后等有重要意义。dsDNA抗体检测的主要方法有酶联免疫吸附检测、化学发光免疫法、免疫荧光分析法等，其中，化学发光免疫检测由于具有灵敏度高，线性范围广、检测快速简便、结果稳定等优势，发展越来越快。然而，化学发光免疫检测需要连接有dsDNA的磁性微粒。目前连接有dsDNA的磁性微粒主要是利用亲和素标记的磁珠与生物素标记的dsDNA结合而成。其中，生物素标记的dsDNA的制备方法主要是PCR扩增法和光敏生物素标记法。PCR扩增法需要酶、dNTP和生物素标记的dUTP，使得生产成本高，难以工业推广；而光敏生物素标记法中光敏生物素随机插到DNA的碱基上，容易导致DNA和其抗体结合的特异性降低。因此，目前的方法制备本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n活化羧基磁性微粒的羧基，制备活化后的羧基磁性微粒；/n在25℃～60℃的条件下，将含有dsDNA的溶液预热处理0.5h～3h，制备预热后的dsDNA；及/n在25℃～60℃的条件下，将4-二甲氨基吡啶、所述活化后的羧基磁性微粒和所述预热后的dsDNA混合反应，制备连接有dsDNA的磁性微粒。/n

【技术特征摘要】
1.一种连接有dsDNA的磁性微粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
活化羧基磁性微粒的羧基，制备活化后的羧基磁性微粒；
在25℃～60℃的条件下，将含有dsDNA的溶液预热处理0.5h～3h，制备预热后的dsDNA；及
在25℃～60℃的条件下，将4-二甲氨基吡啶、所述活化后的羧基磁性微粒和所述预热后的dsDNA混合反应，制备连接有dsDNA的磁性微粒。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，对所述含有dsDNA的溶液进行预热处理的温度为35℃～50℃。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，对所述含有dsDNA的溶液进行加热处理的时间为1h～2h。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述将4-二甲氨基吡啶、所述活化后的羧基磁性微粒和预热后的dsDNA混合反应的步骤中，所述混合反应的温度为35℃～50℃。


5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，4-二甲氨基吡啶与所述活化后的羧基磁性微粒中羧基的摩尔比为(0.05～0.3)：1。


6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝亮，谭松暖，何凡，钱纯亘，
申请(专利权)人：深圳市卓润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44