诊断C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎的方法技术

样品中诊断C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎(MPGN)的方法，包括：a)在板的至少两个孔中固定C3b；b)在所述孔中形成C3bBb复合物，并且任选地，在任选地添加因子H(FH)的情况下，使所述复合物变性，其中，在因子B(FB)、因子D(FD)、牛血清白蛋白(BSA)、镁离子存在下通过添加从所述样品和/或对照品中纯化的IgG来介导复合物的所述形成；d)使所形成的复合物脱离；e)在变性条件下对所述复合物进行电泳并转移到膜上；检测感兴趣的蛋白质Bb，其是C3转化酶的两种组分之一；其中测量的在由所述孔的每个收集的样品中对于Bb带强度之比表示所述样品中的C3NeF活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诊断C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎的方法本专利技术涉及诊断受试者中C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎的方法。该方法包括：a)在板的至少两个孔中固定C3b；b)在所述孔中形成表示替代途径的C3转化酶的C3bBb复合物，其中所述复合物的所述形成是通过在因子B(FB)、因子D(FD)、牛血清白蛋白(BSA)、镁离子的存在下，添加从患者和/或健康受试者分离的生物样品中纯化的IgG介导的；c)使所形成的复合物脱离；d)在变性条件下对所述复合物进行电泳并转移到膜上；e)检测感兴趣的蛋白质Bb，其是C3转化酶的两种组分C3b和Bb之一；其中，测量的在所述孔中的每个收集的样品中的Bb带的强度之比表示所述受试者中C3NeF活性。
技术介绍
膜增生性肾小球肾炎(MPGN)是一种慢性进行性肾病，在肾病综合征的范畴中并以肾小球滤过膜病变和肾小球细胞高度增殖为特点。肾病的原因是补体替代途径的过度激活，由补体基因的遗传改变(遗传形式)或由由于称为C3肾炎因子(C3NeF)的自身抗体的存在而导致的获得性改变(获得性或自身免疫形式)而引起本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诊断受试者中C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎(MPGN)的方法，包括：/na)在至少两个孔中固定C3b；/nb)在所述孔中形成C3bBb复合物，其中所述复合物的形成是通过在因子B(FB)、因子D(FD)、镁离子的存在下添加从所述受试者和/或对照的生物样品中纯化的IgG来介导的；/nc)使所形成的复合物脱离；/nd)在变性条件下对所述复合物进行电泳并转移到膜上；/ne)检测感兴趣的蛋白质Bb；/n其中，测量的由所述孔中的每个收集的样品中Bb带的强度的比表示所述受试者中C3NeF活性。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180330 IT 1020180000041411.一种诊断受试者中C3NeF介导的膜增生性肾小球肾炎(MPGN)的方法，包括：
a)在至少两个孔中固定C3b；
b)在所述孔中形成C3bBb复合物，其中所述复合物的形成是通过在因子B(FB)、因子D(FD)、镁离子的存在下添加从所述受试者和/或对照的生物样品中纯化的IgG来介导的；
c)使所形成的复合物脱离；
d)在变性条件下对所述复合物进行电泳并转移到膜上；
e)检测感兴趣的蛋白质Bb；
其中，测量的由所述孔中的每个收集的样品中Bb带的强度的比表示所述受试者中C3NeF活性。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤b)中所述孔进一步包括牛血清白蛋白(BSA)。


3.根据权利要求1或2所述的方法，包括：
a)在至少两个孔中固定C3b；
b)在所述孔中形成所述C3bBb复合物，其是由在FB、FD、BSA和镁离子的存在下通过添加从所述受试者和/或对照的生物样品中纯化的IgG来介导的；
c)使所形成的复合物脱离；
d)在变性条件下对所述复合物进行电泳并转移到膜上；
e)检测感兴趣的蛋白质Bb，以获得作为基线的值；
其特征在于，在添加纯化的IgG的所述步骤b)之后，在一个或多个孔中，优选在洗涤步骤之后，在存在或没有FH的情况下进一步孵育，其中测量的经受所述进一步孵育的样品中的Bb带的强度与所述基线Bb带的比表示所述样品中C3NeF活性。


4.根据权利要求3所述的方法，其中，在所述步骤b)期间进一步添加备解素。


5.根据权利要求1或2所述的方法，包括：
a)在至少两个孔中固定C3b；
b)在所述至少两个孔中添加FB、FD、BSA和镁离子；
c)在所述孔的至少第一个中，复合物形成和衰变步骤包括洗涤和在没有和/或存在FH的情况下与从所述样品中纯化的IgG孵育，以及在所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯塔·多纳代利，玛丽娜·诺里斯，艾瑞拉·贝尼尼，朱塞佩·雷穆齐，
申请(专利权)人：红公里科学技术园股份公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT