一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法技术

本发明专利技术属于提取物及提取技术领域，具体涉及一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，本发明专利技术先通过水提取方法得到青果水提物，然后以乙酸乙酯为溶剂进行萃取得到青果提取物，该方法够富集青果抗幽门螺杆菌的主要活性物质，从而提高青果提取物的抗菌活性，与传统的青果水提物相比，本发明专利技术提取得到的青果提取物抗幽门螺杆菌的MIC大幅度变小，体外抗菌活性明显增强。

【技术实现步骤摘要】
一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法
本专利技术属于提取物及提取
，具体涉及一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法。
技术介绍
全球约有一半的人感染幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)，在发展中国家感染率甚至更高。幽门螺杆菌感染可导致慢性胃炎、消化性胃溃疡、胃癌等疾病，因此，幽门螺杆菌被世卫组织列为一类致癌原。流行病学、分子研究、动物研究和临床荟萃分析等的众多证据都证实了根除Hp能降低患者的胃癌发病率。目前，针对Hp感染的常规治疗是抗生素三联或四联疗法，但随着抗生素耐药率的不断升高，这些疗法的根除率逐步下降，因此，开发新的抗Hp感染药物具有重要的意义。青果即橄榄的成熟果实，因其呈青绿色而得名，主产于福建、四川、广东、广西、云南等地，具有清热解毒、利咽生津等功效，用于治疗咽喉肿痛，咳嗽，烦渴，鱼蟹中毒等。青果富含蛋白质、多糖、多酚类、黄酮类、萜类等成分，具有解酒护肝、抗癌抑癌、抗炎抑菌等多种药理活性。有研究发现，青果对猪源Hp的最小抑菌浓度(MIC)为3.12mg/mL，在25味清热解毒药中属于强度抑菌药(荣茜,代鹏飞,邓林,等.25味常用清热解毒药提取物对猪源幽门螺杆菌的体外抑菌活性[J].浙江农业学报,2016,28(01):38-43)。与药品类产品相比，青果被列入卫计委发布的既是食品又是中药材的传统物质目录，具有更加安全便捷的优势，正常食用几无不良反应，应用前景更加广阔。传统用法通常采用水煎煮法得到青果水提物，但水提物的Hp抗菌活性不强，往往需要采用较大剂量才能有一定的抑菌效果。因此，开发抗菌活性更强、用量更少的青果提取物具有重要的价值。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的不足，本专利技术提出了一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，该方法够富集青果抗Hp的主要活性物质，从而提高青果提取物的抗菌活性。为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：本专利技术提供了一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，包括以下步骤：S1、药材的处理：对青果进行清洗、干燥，并粉粹成药材粗粉；S2、水提取：采用水提取方法对步骤S1的药材粗粉进行提取，得到青果水提物；S3、乙酸乙酯萃取：以乙酸乙酯为溶剂，对步骤S2的青果水提物进行萃取即可得到青果提取物。本专利技术通过研究发现，采用本专利技术方法提取得到的青果提取物，其抗Hp的MIC大幅度降低，体外抗菌活性明显增强(与传统用的青果水提取相比)，说明本专利技术方法够富集青果抗Hp的主要活性物质，从而提高青果提取物的抗菌活性。同时发现，本专利技术的青果提取物对Hp的抑制效果呈浓度依赖性，青果提取物浓度越大，抑制效果越明显，当青果提取物的浓度为156μg/mL时，基本抑制了Hp的增长。此外还发现，本专利技术的青果提取物与临床治疗Hp感染常用的抗生素联用时，具有减少临床应用抗生素用量的效果，对于改善抗生素的耐药现状具有潜在的应用价值。优选地，步骤S3所述的乙酸乙酯萃取方法为：步骤S3所述的乙酸乙酯萃取方法为：往青果水提物中加入乙酸乙酯，萃取至水层与有机层无明显颜色变化为止，合并萃取液，即得青果提取物。进一步地，所述乙酸乙酯与青果水提物的体积比(v:v＝mL:mL)为(2～4):1。具体地，乙酸乙酯与青果水提物的体积比为3:1。优选地，S3还包括浓缩和冷冻干燥步骤，即所制备得到的青果提取物为青果提取物冻干粉。优选地，步骤S2的水提取方法为：按1:(10～14)的料液比往药材粗粉中加水，然后置于(80～100)℃下热回流提取(1～3)h，收集滤液经浓缩后得到青果水提物。进一步地，热回流提取后的滤渣再进行二次提取，合并两次滤液后再进行下一步的浓缩工作。进一步地，步骤S2的水提取方法为：按1:12的料液比往药材粗粉中加水，然后置于90℃下热回流提取2h，收集滤液经浓缩后得到青果水提物。具体地，步骤S2所述的浓缩为浓缩至药材粗粉与滤液的料液比为1:5。优选地，所述青果选择无虫口、不褐变的青果。优选地，步骤S1中，粉粹后的青果过1～3号筛得到药材粗粉。具体地，粉粹后的青果过2号筛得到药材粗粉。本专利技术还提供了采用上述的制备方法制备得到的抗幽门螺杆菌青果提取物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提出了一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，即先通过水提取方法提取得到青果水提物，然后以乙酸乙酯为溶剂，对青果水提物进行萃取即可得到青果提取物，采用本专利技术方法够富集青果抗Hp的主要活性物质，从而提高青果提取物的抗菌活性，与常用的青果水提取相比，本专利技术提取得到的青果提取物，抗Hp的MIC大幅度降低，体外抗菌活性明显增强。附图说明图1为本专利技术的青果提取物抗Hp的时间-抑菌曲线。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本专利技术，但并不构成对本专利技术的限定。此外，下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到的。实施例1一种青果提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)药材的处理：选择无虫口、不褐变的青果，清水洗净后置于60℃烘箱中烘至干燥，烘干时长为24h，捶碎后放入粉碎机中进行粉碎，过2号筛成药材粗粉；(2)水提取：称取10g药材粗粉于250mL圆底烧瓶内，加入12倍量(料液比w:v＝g:mL)二级水，置于90℃水浴中热回流提取2h，过滤，收集滤液；残渣继续加入12倍量二级水进行提取，合并两次滤液；滤液用旋转蒸发仪浓缩至50mL，得到青果水提物；(3)乙酸乙酯萃取：上述青果提取物转移至500mL分液漏斗中，加入3倍量(体积比v:v＝mL:mL)乙酸乙酯，然后进行萃取，萃取至水层与有机层无明显颜色变化为止(通常萃取4-5次)，合并萃取液，在50℃水浴下用旋转蒸发仪挥干溶剂，残渣加15mL水复溶，溶液转移至玻璃平皿，用保鲜膜封口并扎孔，置于-80℃预冻过夜后，于冷冻干燥机中干燥24h，即得青果乙酸乙酯萃取物冻干粉，即青果提取物冻干粉。实施例2一种青果提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)药材的处理：选择无虫口、不褐变的青果，清水洗净后置于60℃烘箱中烘至干燥，烘干时长为24h，捶碎后放入粉碎机中进行粉碎，过1号筛成药材粗粉；(2)水提取：称取10g药材粗粉于250mL圆底烧瓶内，加入10倍量(料液比w:v＝g:mL)二级水，置于80℃水浴中热回流提取3h，过滤，收集滤液；残渣继续加入10倍量二级水进行提取，合并两次滤液；滤液用旋转蒸发仪浓缩至50mL，得到青果水提物；(3)乙酸乙酯萃取：上述青果水提物转移至500mL分液漏斗中，加入2倍量(体积比v:v＝mL:mL)乙酸乙酯，然后进行萃取，萃取至水层与有机层无明显颜色变化为止(通常萃取4-5次)，合并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、药材的处理：对青果进行清洗、干燥，并粉粹成药材粗粉；/nS2、水提取：采用水提取方法对步骤S1的药材粗粉进行提取，得到青果水提物；/nS3、乙酸乙酯萃取：以乙酸乙酯为溶剂，对步骤S2的青果水提物进行萃取即可得到青果提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、药材的处理：对青果进行清洗、干燥，并粉粹成药材粗粉；
S2、水提取：采用水提取方法对步骤S1的药材粗粉进行提取，得到青果水提物；
S3、乙酸乙酯萃取：以乙酸乙酯为溶剂，对步骤S2的青果水提物进行萃取即可得到青果提取物。


2.根据权利要求1所述的一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，其特征在于，步骤S3所述的乙酸乙酯萃取方法为：往青果水提物中加入乙酸乙酯，萃取至水层与有机层无明显颜色变化为止，合并萃取液，即得青果提取物。


3.根据权利要求2所述的一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，其特征在于，所述乙酸乙酯与青果水提物的体积比为(2～4):1。


4.根据权利要求1所述的一种抗幽门螺杆菌青果提取物的制备方法，其特征在于，步骤S2的水提取方法为：按1:(10～14)的料液比往药材...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚美村，严家慧，陈鹏婷，彭昶，申雪，张唯佳，徐子皓，袁月梅，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44