脐血DNA的制作及保存方法技术

脐血ＤＮＡ的制作及保存方法，它依次包括如下步骤：　　　　（１）采集脐血，将出生婴儿的脐带血和胎盘血采集到含抗凝剂的脐血收集袋中；　　　　（２）取血加入含有抗凝剂的离心管中，离心去除红细胞；　　　　（３）吸去上清，用加样枪将中层淡黄色细胞层，小心转移至新的离心管中；　　　　　（４）加入细胞裂解液，轻轻混匀，置于３７℃水浴；　　　　（５）加入蛋白酶Ｋ，轻轻混匀；　　　　（６）置于５０℃水浴，不时旋转；　　　　（７）将上述混合液冷却至室温，加入等体积水饱和酚，缓慢颠转，温和混匀两相，直至成乳浊液；　　　　（８）离心；　　　　（９）用水饱和酚抽提一次，再用氯仿抽提一次，收集水相；　　　　（１０）加入冷的无水乙醇，沉淀ＤＮＡ；　　　　（１１）加入缓冲溶液溶解ＤＮＡ；　　　　（１２）进行ＤＮＡ电泳及酶消化试验，检测ＤＮＡ的浓度和纯度，及其完整性和消化能力、基因特征、血型，得出分析结果；　　　　（１３）将ＤＮＡ置于滤膜上，抽真空密封于锡箔袋中，将该锡箔袋放入ＤＮＡ珍藏盒内；该盒内还放置有微型光盘，其上刻录有脐血ＤＮＡ的上述分析结果，包括ＤＮＡ的浓度、纯度、及其完整性和消化能力、基因特征、血型；　　　　（１４）余下的ＤＮＡ入库保存。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
本专利技术涉及一种脐血DNA的制作及保存方法。现有技术脐血作为一种资源，其重要性及应用越来越受到人们的重视。目前脐血干细胞的制作与保存已开始进行，但脐血DNA作为一种最原始、最纯粹的DNA，其制作与保存意义重大，目前尚无人进行该方面的工作。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种脐血DNA的制作、保存方法。该方法利用分子生物学手段将婴儿脐血总DNA提取并保存，为今后身份鉴别、基因诊断、基因治疗、器官移植等提供最原始的DNA记录。为实现上述目的，本专利技术提供一种脐血DNA的制作及保存方法，它依次包括如下步骤(1)采集脐血，将出生婴儿的脐带血和胎盘血采集到含抗凝剂的脐血收集袋中；(2)取血加入含有抗凝剂的离心管中，离心去除红细胞；(3)吸去上清，用加样枪将中层淡黄色细胞层，小心转移至新的离心管中；(4)加入细胞裂解液，轻轻混匀，置于37℃水浴；(5)加入蛋白酶K，轻轻混匀；(6)置于50℃水浴，不时旋转；(7)将上述混合液冷却至室温，加入等体积水饱和酚，缓慢颠转，温和混匀两相，直至成乳浊液； (8)离心；(9)用水饱和酚抽提一次，再用氯仿抽提一次，收集水相；(10)加入冷的无本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.脐血DNA的制作及保存方法，它依次包括如下步骤(1)采集脐血，将出生婴儿的脐带血和胎盘血采集到含抗凝剂的脐血收集袋中；(2)取血加入含有抗凝剂的离心管中，离心去除红细胞；(3)吸去上清，用加样枪将中层淡黄色细胞层，小心转移至新的离心管中；(4)加入细胞裂解液，轻轻混匀，置于37℃水浴；(5)加入蛋白酶K，轻轻混匀；(6)置于50℃水浴，不时旋转；(7)将上述混合液冷却至室温，加入等体积水饱和酚，缓慢颠转，温和混匀两相，直至成乳浊液；(8)离心；(9)用水饱和酚抽提一次，再用氯仿抽提一次，收集水相；(10)加入冷的无水乙醇，沉淀DNA；(11)加入缓冲溶液溶解DNA；(12)进行DNA电泳及酶消化试验，检测DNA的浓度和纯度，及其完整性和消化能力、基因特征、血型，得出分析结果；(13)将DNA置于滤膜上，抽真空密封于锡箔袋中，将该锡箔袋放入DNA珍藏盒内；该盒内还放置有微型光盘，其上刻录有脐血DNA的上述分析结果，包括DNA的浓度、纯度、及其完整性和消化能力、基因特征、血型；(14)余下的DNA入库保存。2.根据权利要求书1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的抗凝剂为乙二胺四乙酸。3.根据权利要求书1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李少波，李宏实，毛金武，周见远，唐贵卿，
申请(专利权)人：李少波，李宏实，毛金武，周见远，唐贵卿，
类型：发明
国别省市：