一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的试剂盒及检测方法技术

本申请属于生物检测技术领域，具体为一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的试剂盒及检测方法，所述引物探针组包括检测ALDH2*2的引物、野生型探针和突变型探针；所述试剂盒，包括含有扩增反应试剂的检测管、缓冲液、醋酸镁、阳性对照、阴性对照；所述扩增反应试剂包括ALDH2*2上下游引物、ALDH2*2野生型和突变型探针、大肠杆菌RecA蛋白、UvsY蛋白、单链结合蛋白GP32、Bst聚合酶、核酸外切酶III、聚环氧乙烷、海藻糖、甘露醇、ATP、dNTPs、肌酸激酶和磷酸肌酸。

【技术实现步骤摘要】
一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的试剂盒及检测方法
本申请属于生物检测
，具体为一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的试剂盒及检测方法。
技术介绍
人乙醛脱氢酶2(acetaldehydedehydrogenase2,ALDH2)是乙醛脱氢酶的1个亚类，可催化乙醛氧化为乙酸。ALDH2与亚洲人群最为密切的是ALDH2*2突变(rs671，1510G>A)，突变率高达30％～50％。携带ALDH2*2突变基因的个体ALDH2酶活性下降，其中ALDH2*1/*2个体的酶活性仅为ALDH2*1/*1个体的10％，而ALDH2*2/*2个体的酶活性完全缺失。ALDH2基因与酒精在人体内的分解代谢有关，还参与硝酸甘油的代谢。研究显示ALDH2基因型可影响饮酒者对乙醇的敏感性和耐受性，突变型基因ALDH2*2能导致ALDH2活力的严重缺失，并与过度饮酒导致的酒精依赖、酒精性中毒、酒精性肝病、消化道癌症等疾病之间存在深刻的联系。还有研究发现，ALDH2是催化硝酸甘油代谢成有扩血管作用的一氧化氮(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，包括检测ALDH2*2的引物、野生型探针和突变型探针，其中，/n上游引物：5’-ATTACAGGGTCAACTGCTATGATGTGTTTGGA-3’；/n下游引物：5’-GTCTTTACCCTCTCTTGTCACTTCTCAGGCTTA-3’；/n野生型探针：/n5’-AGTTGGGCGAGTACGGGCTGCAGGCATACAC(FAM-dT)

【技术特征摘要】
1.一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，包括检测ALDH2*2的引物、野生型探针和突变型探针，其中，
上游引物：5’-ATTACAGGGTCAACTGCTATGATGTGTTTGGA-3’；
下游引物：5’-GTCTTTACCCTCTCTTGTCACTTCTCAGGCTTA-3’；
野生型探针：
5’-AGTTGGGCGAGTACGGGCTGCAGGCATACAC(FAM-dT)GAAG(THF)GAAAAC(BHQ-dT)GTGAGT(C3spacer)-3’；
突变型探针：
5’-AGTTGGGCGAGTACGGGCTGCAGGCATACAC(ROX-dT)AAAG(THF)GAAAAC(BHQ-dT)GTGAGT(C3spacer)-3’。


2.如权利要求1所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述探针的修饰基团有荧光基团和淬灭基团，所述淬灭基团修饰在THF3’端的T碱基上，荧光基团修饰在SNP位点的5’端T碱基上或SNP位点互补碱基的5’端T碱基上。


3.如权利要求2所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述荧光基团用FAM或ROX修饰，所述淬灭基团用BHQ修饰。


4.如权利要求2所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述探针3’末端标记阻抑聚合酶延伸或扩增的修饰基团。


5.如权利要求2所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述探针覆盖SNP位点，在探针的SNP位点上做锁核酸(LNA)修饰。


6.如权利要求1所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测ALDH2基因多态性的试剂盒，其特征在于，包括含有扩增反应试剂的检测管、缓冲液、醋酸镁、阳性对照、阴性对照，所述扩增反应试剂包括ALDH2*2上下游引物、ALDH2*2野生型和突变型探针、大肠杆菌RecA蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈大为，陈龙，张瑶，
申请(专利权)人：济南国益生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37