一种强骨生血口服液的质量检测方法技术

本申请公开了一种强骨生血口服液的质量检测方法，与现有技术相比，包括以下步骤：制备第一对照品溶液；制备第一供试品溶液；制定强骨生血口服液第一指纹图谱；制定强骨生血口服液标准指纹图谱；制备第二对照品溶液；制备第二供试品溶液；制定强骨生血口服液第二指纹图谱；将所述强骨生血口服液第二指纹图谱与所述标准指纹图谱进行比较处理，保留时间±5％以内的为检测合格所述第二供试品溶液。本申请提供的强骨生血口服液的质量检测方法，能对强骨生血口服液的有效组分进行全面检测，利于对强骨生血口服液成品质量的有效控制，从而确保强骨生血口服液的临床疗效。

【技术实现步骤摘要】
一种强骨生血口服液的质量检测方法
本申请涉及质量检测方法领域，更具体地说，尤其涉及一种强骨生血口服液的质量检测方法。
技术介绍
强骨生血口服液由骨液、党参、黄芪、灵芝、大枣、黑木耳等药材组成，强骨生血口服液具有益髓壮骨、补气生血之功用，强骨生血口服液重用骨液为君，大有补肾益髓之功，使髓足则骨坚精盛、精盛则能转化为血，且骨液富含钙质等营养成分，因而对老人、小儿及妇女孕、乳期缺钙、贫血者，既可补其不足，又可防其亏损，并能治疗因之所致之腰酸、膝软、脚弱无力、齿摇发落以及发育迟缓等症，臣以党参、黄芪补脾胃之气，裕生化之源，使后天有本，则气血可自生，既可治疗精神短少，疲乏无力，亦可促进贫血之症的恢复。而参、芪与骨液相配，脾肾两补，使骨髓与气血之间相互转补营血，其与参、芪合，则有气血双补之妙。气无形，血有形，有形之血当以气生，故臣以灵芝、大枣加强补气作用以生血。黑木耳甘平无毒，润而不腻，协调诸药乃为使。故全放各药相协，性味平和，补而不燥，共奏益髓壮骨、补气生血之功，实为一首治疗缺钙、贫血而髓亏骨弱、气血不足之症的良方。强骨生血口服液临床适应症为：主治老人、小儿、以及妇女胎前产后之贫血、缺钙，症见精神不振、体弱乏力、面色无华、腰膝酸软、肌肉痉挛、体型消瘦、发摇齿落，以及小儿囟门久不闭合、齿迟、立迟、行迟等。目前强骨生血口服液现有的质量标准仅测定单一指标成份的含量，未对其他有效组分进行监测，存在一定局限性，不能全面反映强骨生血口服液的质量水平。针对强骨生血口服液的质量检测方法公开很少，如中国专利201210012628.4(公开号CN201210012628.4)、202030219270.8(公开号CN202030219270.8)、202030219275.0(公开号CN202030219275.0)均未涉及其质量检测方法；《中国计划生育学杂志》2019年第27卷第8期《强骨生血口服液联合利塞磷酸钠片治疗绝经后妇女骨质疏松症的临床效果观察》、《中草药》2017年第48卷第23期《强骨生血口服液对去卵巢致骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制》、《中国新药杂志》2017年第26卷第22期《强骨生血口服液对小鼠化疗后骨髓抑制的保护作用及机制研究》、《广东药学》2004年第14卷第1期《强骨生血口服液》也均未涉及到强骨生血口服液的质量检测技术。现有技术中，尚无较全面的质量控制方法反映现有中药材、中间体及成品的质量状况，也无法对生产过程及产品质量有效控制，不能较好地保证其临床疗效。因此，怎样提供一种强骨生血口服液的质量检测方法，能对强骨生血口服液的有效组分进行全面检测，已成为本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本申请提供了一种强骨生血口服液的质量检测方法，能对强骨生血口服液的有效组分进行全面检测。本申请提供的技术方案如下：本申请提供一种强骨生血口服液的质量检测方法，包括以下步骤：制备第一对照品溶液：用体积百分比浓度为50％～100％甲醇将毛蕊异黄酮葡萄糖苷配制成每1mL含0.001～0.004mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷的第一对照品溶液；制备第一供试品溶液：量取强骨生血口服液5mL，置50mL容量瓶中，加0％～50％甲醇或0％～50％乙醇至50mL刻度处，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，制得第一供试品溶液；制定强骨生血口服液第一指纹图谱：分别精密吸取等量的所述第一对照品溶液和所述第一供试品溶液，注入液相色谱仪进行高效液相色谱分析，经测定，得强骨生血口服液第一指纹图谱，所述高效液相色谱分析的具体条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；流动相为有机相A与水相B组成的梯度洗脱液，有机相A为甲醇或乙腈，水相B为体积百分比浓度为0.1～0.4％的甲酸溶液；检测波长为254nm、270nm、285nm三个波长，检测波长的切换时间为0min、8min、25min；柱温为20～40℃；流速0.8mL/min～1.2mL/min；分析时间为50～65min；采用梯度洗脱：制定强骨生血口服液标准指纹图谱：根据所述强骨生血口服液第一指纹图谱制定强骨生血口服液标准指纹图谱；制备第二对照品溶液；制备第二供试品溶液；制定强骨生血口服液第二指纹图谱：分别精密吸取等量的所述第二对照品溶液和所述第二供试品溶液，注入液相色谱仪进行高效液相色谱分析，经测定，得强骨生血口服液第二指纹图谱；将强骨生血口服液第二指纹图谱与标准指纹图谱进行比较处理，保留时间±5％以内的为检测合格的所述第二供试品溶液。优选的，步骤“制定强骨生血口服液第一指纹图谱”中，吸取的所述第一对照品溶液和所述第一供试品溶液各为10μl。优选的，所述C18反相色谱柱的柱长为250mm。优选的，所述甲酸溶液体积百分比浓度为0.2％。优选的，所述柱温为30～40℃。优选的，所述流速为1.0mL/min。优选的，所述分析时间为55min。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，所述的强骨生血口服液包括如下重量份的组分：骨液600～700、党参40～50、黄芪70～80、灵芝10～20、大枣30～40、黑木耳10～20。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，步骤“制定强骨生血口服液标准指纹图谱”具体为：根据15批次所述强骨生血口服液第一指纹图谱制定所述强骨生血口服液标准指纹图谱。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，所述的标准指纹图谱在254nm、270nm、285nm下切换波长，进行检测，具有12个共有峰，共有峰峰面积之和占总峰面积90％以上，归属于骨液的指纹图谱具有3个共有峰，归属于党参的指纹图谱具有2个共有峰，归属于黄芪的指纹图谱具有2个共有峰，归属于灵芝的指纹图谱具有2个共有峰，归属于大枣的指纹图谱具有2个共有峰，归属于黑木耳的指纹图谱具有1个共有峰。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，所述的标准指纹图谱在254nm、270nm、285nm下切换波长，检测到的12个共有峰的保留时间分别为：(1)5.373～5.406、(2)5.721～5.741、(3)6.826～6.855、(4)8.011～8.045、(5)9.140～9.174、(6)10.372～10.397、(7)11.220～11.259、(8)14.127～14.159、(9)16.213～16.244、(10)18.475～18.519、(11)19.767～19.812、(12)44.546～44.617。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，所述强骨生血口服液第一指纹图谱与所述强骨生血口服液标准指纹图谱的相似度为0.944～0.998。进一步地，在本专利技术一种优选的方式中，所述第一指纹图谱的共有峰具有11个特征峰，各特征峰的保留时间和相对标准偏差为：1号峰：保留时间5.721±0.020，相对标准偏差为0.35％；2号峰：保留时间6.826±0.029，相对标准偏差为0.42％；3号峰：保留时间8.011±0.034，相对标准偏差为0.43％；4号峰：保留时间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种强骨生血口服液的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n制备第一对照品溶液：用体积百分比浓度为50％～100％甲醇将毛蕊异黄酮葡萄糖苷配制成每1mL含0.001～0.004mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷的第一对照品溶液；/n制备第一供试品溶液：量取强骨生血口服液5mL，置50mL容量瓶中，加0％～50％甲醇或0％～50％乙醇至50mL刻度处，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，制得第一供试品溶液；/n制定强骨生血口服液第一指纹图谱：分别精密吸取等量的所述第一对照品溶液和所述第一供试品溶液，注入液相色谱仪进行高效液相色谱分析，经测定，得强骨生血口服液第一指纹图谱，所述高效液相色谱分析的具体条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；流动相为有机相A与水相B组成的梯度洗脱液，有机相A为甲醇或乙腈，水相B为体积百分比浓度为0.1～0.4％的甲酸溶液；检测波长为254nm、270nm、285nm三个波长，检测波长的切换时间为0min、8min、25min；柱温为20～40℃；流速0.8mL/min～1.2mL/min；分析时间为50～65min；采用梯度洗脱：/n

【技术特征摘要】
1.一种强骨生血口服液的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
制备第一对照品溶液：用体积百分比浓度为50％～100％甲醇将毛蕊异黄酮葡萄糖苷配制成每1mL含0.001～0.004mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷的第一对照品溶液；
制备第一供试品溶液：量取强骨生血口服液5mL，置50mL容量瓶中，加0％～50％甲醇或0％～50％乙醇至50mL刻度处，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，制得第一供试品溶液；
制定强骨生血口服液第一指纹图谱：分别精密吸取等量的所述第一对照品溶液和所述第一供试品溶液，注入液相色谱仪进行高效液相色谱分析，经测定，得强骨生血口服液第一指纹图谱，所述高效液相色谱分析的具体条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；流动相为有机相A与水相B组成的梯度洗脱液，有机相A为甲醇或乙腈，水相B为体积百分比浓度为0.1～0.4％的甲酸溶液；检测波长为254nm、270nm、285nm三个波长，检测波长的切换时间为0min、8min、25min；柱温为20～40℃；流速0.8mL/min～1.2mL/min；分析时间为50～65min；采用梯度洗脱：



制定强骨生血口服液标准指纹图谱：根据所述强骨生血口服液第一指纹图谱制定强骨生血口服液标准指纹图谱；
制备第二对照品溶液；
制备第二供试品溶液；
制定强骨生血口服液第二指纹图谱：分别精密吸取等量的所述第二对照品溶液和所述第二供试品溶液，注入液相色谱仪进行高效液相色谱分析，经测定，得强骨生血口服液第二指纹图谱；
将强骨生血口服液第二指纹图谱与标准指纹图谱进行比较处理，保留时间±5％以内的为检测合格的所述第二供试品溶液。


2.根据权利要求1所述的强骨生血口服液的质量检测方法，其特征在于，所述的强骨生血口服液包括如下重量份的组分：骨液600～700、党参40～50、黄芪70～80、灵芝10～20、大枣30～40、黑木耳10～20。


3.根据权利要求2所述的强骨生血口服液的质量检测方法，其特征在于，步骤“制定强骨生血口服液标准指纹图谱”具体为：根据15批次所述强骨生血口服液第一指纹图谱制定所述强骨生血口服液标准指纹图谱。


4.根据权利要求3所述的强骨生血口服液的质量检测方法，其特征在于，所述的标准指纹图谱在254nm、270nm、285nm下切换波长，进行检测，具有12个共有峰，共有峰峰面积之和占总峰面积90％以上，归属于骨液的指纹图谱具有3个共有峰，归属于党参的指纹图谱具有2个共有峰，归属于黄芪的指纹图谱具有2个共有峰，归属于灵芝的指纹图谱具有2个共有峰，归属于大枣的指纹图谱具有2个共有峰，归属于黑木耳的指纹图谱具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：许志，刘雪辉，许必祥，贺静，王筱宇，黄昆，邹香君，卞宇，
申请(专利权)人：湖南天劲制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43