流动供给缓冲液的蛋白转印方法技术

本发明专利技术涉及蛋白转印方法领域，尤其是流动供给缓冲液的蛋白转印方法。该方法的步骤为：A、凝胶上设有穿孔，穿孔内设有蛋白，将阳极板、聚合物膜、海绵块一、电泳后的凝胶、海绵块二、阴极板依次堆叠固定在一起；B、然后将阳极液从海绵块一顶部灌入，从海绵块一底部流出，将阴极液从海绵块二顶部灌入，从海绵块二底部流出；阳极液与阴极液的体积比为1:1；阳极液与阴极液通过泵体持续供液。本发明专利技术的有益效果是，该发明专利技术通过连续供液的方式使得阳极液和阴极液进行持续流动，从而获得散热的效果。并且通过将阳极液与阴极液分离可带来高电流效果，通过阴极液与阳极液分开的方式进行转膜。过阴极液与阳极液分开的方式进行转膜。

【技术实现步骤摘要】
流动供给缓冲液的蛋白转印方法


[0001]本专利技术涉及蛋白转印方法领域，尤其是流动供给缓冲液的蛋白转印方法。

技术介绍

[0002]Western Bolt技术被称为蛋白免疫印迹技术，其全部过程包括，首先进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳后的凝胶进行蛋白转印（转膜），蛋白条带会转移到一张聚合物膜上，再由膜进行抗体孵育，孵育完毕进行显影。其中蛋白转印（转膜）技术为其中重要的一步。
[0003]现有的转印技术分为湿式，半干式，干式。
[0004]半干式转印及是将海绵
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滤纸
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膜
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丙烯酰胺凝胶
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滤纸
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海绵的复合物，夹入板式电极之间，在没有缓冲液补充的情况下进行转膜。
[0005]相对于普通的半干转系统而言，缓冲液是在一个封闭的体系中完成转膜的，它通过将凝胶和膜的夹层放置在浸泡过转移缓冲液的吸水介质之间进行转移，转膜液的体系采用阴极液与阳极液分开的方式进行转膜，以此带来在低电压下的高电流效果。
[0006]但随之产生的问题是，在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种流动供给缓冲液的蛋白转印方法，其特征是，该方法的步骤为：A、凝胶上设有穿孔，穿孔内设有蛋白，将阳极板、聚合物膜、海绵块一、电泳后的凝胶、海绵块二、阴极板依次堆叠固定在一起；B、然后将阳极液从海绵块一顶部灌入，从海绵块一底部流出，将阴极液从海绵块二顶部灌入，从海绵块二底部流出；阳极液与阴极液的体积比为1:1；阳极液与阴极液通过泵体持续供液；C、阳极板与阴极板通电之后，使得阳极板与阴极板之间实现均匀电场，在凝胶和聚合物膜横截面上通过电流，让带负电荷的蛋白由阴极板方向向阳极板转移，受到聚合物膜的有效截留而由凝胶转印到聚合物膜上。2.根据权利要求1所述的流动供给缓冲液的蛋白转印方法，其特征是，所述阳极液的各组分重量配比为：三羟基甲氨基甲烷1
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2.5%、甲醇10
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20%、水79
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87.5%。3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：方利，张硕，曹飞婷，
申请(专利权)人：江苏江南烯元石墨烯科技有限公司，
类型：发明
国别省市：