一种SM03单抗的活性检测方法及其在SM03单抗质量监控中的应用技术

本发明专利技术公开了一种SM03单抗的活性检测方法及其在SM03单抗质量监控中的应用。所述方法包括如下步骤：包括如下步骤：将SM03单抗固定在酶标板上，孵育；然后加入含抗IgM抗体的B淋巴瘤细胞悬液，孵育；再通过检测孵育后B淋巴瘤细胞的存活率评价SM03单抗活性。通过实验证明：本发明专利技术的SM03单抗活性检测方法稳定且灵敏度高，适用于对SM03单抗的质量控制，可用于评估SM03单抗产品在体内疗效是否达到预期。估SM03单抗产品在体内疗效是否达到预期。

【技术实现步骤摘要】
一种SM03单抗的活性检测方法及其在SM03单抗质量监控中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种SM03单抗的活性检测方法及其在SM03 单抗质量监控中的应用。

技术介绍

[0002]人CD22是在成熟IgD+IgM+B细胞上表达的一种糖蛋白，是一种防止免疫系统过 激反应或自身免疫疾病的调节分子。它的胞外结构由七个免疫球蛋白样的结构域组成， 细胞内结构由三个免疫受体酪氨酸抑制结构域组成。CD22分子可以压抑B细胞受体 (B cell receptor，BCR)信号，避免B细胞被抗原过度激活导致免疫调控失衡。已有 实验证据表明，CD22基因敲除小鼠体内的B细胞处于过度激活状态，在I型胶原诱 导下，关节炎症状的表现也比野生型小鼠更严重。CD22基因敲除所导致的BCR信号 过强还会导致边缘区B细胞(Marginal Zone B cells)发育异常，而该B细胞群体的发 育严重依赖于弱BCR信号强度。
[0003]目前，CD22如何从分子生物学层面来抑制BCR活性还未被清楚揭示。 Epratuzumab是目前机制研究较为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种SM03单抗活性的检测方法，包括如下步骤：通过测量SM03单抗在体外培养环境下对B淋巴瘤细胞的杀伤效果实现SM03单抗活性的检测。2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括如下步骤：将SM03单抗固定在酶标板上，孵育；然后加入含抗IgM抗体的B淋巴瘤细胞悬液，孵育；再通过检测孵育后B淋巴瘤细胞的存活率实现SM03单抗活性的检测。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述B淋巴瘤细胞为Ramos细胞或Daudi细胞。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述抗IgM抗体为羊抗人IgM抗体。5.根据权利要求2
‑
4任一所述的方法，其特征在于：所述检测孵育后B淋巴瘤细胞的存活率的试剂为Celltiter Glo试剂。6.根据权利要求1
‑
5任一所述的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：1)将可吸附抗体的材料包被至酶标板上，洗涤；2)将不同浓度梯度的SM03单抗溶液分别加入至步骤1)得到的酶标板中，孵育，洗涤；3)将含抗IgM抗体的Ramos细胞悬液加入至步骤2)得到的酶标板中，孵育；4)将Celltiter Glo试剂加入至步骤3)得到的酶标板中，震荡均匀后读取各孔的荧光值，并计算出各孔的相对荧光强度值；以SM03单抗浓度的对数值为横坐标，以相对荧光强度值为纵坐标，拟合四参数曲线，获得IC
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值，并根据IC
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值评价SM03单抗活性。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述1)中，所述可吸附抗体的材料为Protein A或Protein G或Protein L；和/或，所述1)中，所述洗涤为用PBST进行洗涤；和/或，所述1)中，所述洗涤的次数为3次；和/或，所述2)中，所述不同浓度梯度的SM03单抗溶液的浓度分别为15000ng/mL、10000ng/mL、6667ng/mL、4444ng/mL、2963ng/mL、1975ng/mL、1317ng/mL、8...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋南，黄健乐，张嘉华，
申请(专利权)人：杏联药业苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：