AP-1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了AP

【技术实现步骤摘要】
AP
‑
1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用


[0001]本专利技术涉及医学检测领域，特别是涉及AP
‑
1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用。

技术介绍

[0002]我国是肝病大国，各种病因引起的慢性肝病患者高达2亿之多。其中，每年约有4～5％的患者因重症化演变成失代偿肝硬化、肝衰竭、肝癌等终末期肝病。因此，如何在慢性肝病重症化过程中早期精准预测评估、及时诊断和有效干预、优化临床诊治方案是减少重症化、降低病死率的关键。自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,ALD)是因体内免疫功能紊乱引起的一组特殊类型的慢性肝病，包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)、原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis，PBC)、原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)以及相互重叠的所谓重叠综合征(overlap syndrome)。目前，自身免疫性肝病的检测手段主要有影像学，血清标志物，包括ALT，AST及肝纤四项，但以上这些检测都有低灵敏度和特异性的缺陷，造成诊断中出现很高的假阳性和假阴性现象。因此，提供一种能够用于检测自身免疫性肝病的生物标志物是本领域亟待解决的重要技术问题。
[0003]激活蛋白
‑
1(Activator protein,AP
‑
1)是一种核转录因子,它与人金属硫蛋白IIa基因的顺式调控元件结合。典型的AP
‑
1复合物由c
‑
Jun和c
‑
Fos两个亚单位组成，通过亮氨酸拉链与DNA结合。c
‑
Jun蛋白是通过亮氨酸拉链的疏水相互作用形成的二聚体，是AP
‑
1的最主要形式。活化AP
‑
1可通过表达AP
‑
1二聚体元素之一的JunD激活HSC中的其他转录因子，并与AP
‑
1共同作用，诱导基质金属蛋白酶抑制物(Tissue inhibitor of metalloproteinases
‑
1，TIMP
‑
1)的表达，TIMP
‑
1表达增强可以抑制ECM降解，促进ECM沉积。现有技术中尚未有AP
‑
1作为检测自身免疫性肝病的生物标志物的报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供AP
‑
1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，以方便快捷准确的检测自身免疫性肝病。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供AP
‑
1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用。
[0007]本专利技术还提供一种检测自身免疫性肝病的试剂盒，所述试剂盒中包括检测自身免疫性肝病标志物AP
‑
1的制剂。
[0008]优选的，所述的试剂盒中还包括荧光标记的探针。
[0009]优选的，所述检测自身免疫性肝病标志物AP
‑
1的制剂包括检测AP
‑
1的引物组。
[0010]优选的，所述检测AP
‑
1的引物组的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
[0011]优选的，所述的试剂盒是荧光定量检测试剂盒。
[0012]优选的，所述的检测自身免疫性肝病的试剂盒中还包括检测内参基因的引物组。
[0013]优选的，所述的检测内参基因的引物组为检测GAPDH的引物组。
[0014]优选的，所述检测GAPDH的引物组的序列如SEQ ID NO.3和SEQ DI NO.4所示。
[0015]本专利技术还提供检测AP
‑
1基因、其表达产物或任一亚基的表达量的试剂在制备自身免疫性肝病诊断产品中的应用。
[0016]本专利技术公开了以下技术效果：
[0017]本专利技术公开了AP
‑
1作为自身免疫性肝病诊断的标志物的应用，并提供了检测自身免疫性肝病的试剂盒。本专利技术所提供的标志物及试剂盒能够高灵敏性、高特异性的检测自身免疫性肝病，避免传统检测方法中易产生假阴性、假阳性的问题，为临床检测自身免疫性肝病提供了新的工具。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1为正常组与模型组小鼠IgG表达差异图；
[0020]图2为正常组与模型组小鼠ALT、AST表达差异图；
[0021]图3为正常组与模型组中Th17和Treg细胞比例的变化图；图中A组为Th17细胞的流式细胞结果，左侧为对照组流式细胞结果，中间为模型组流式细胞结果，右侧为比例对比柱状图；A组为Treg细胞的流式细胞结果，左侧为对照组流式细胞结果，中间为模型组流式细胞结果，右侧为比例对比柱状图；
[0022]图4为正常组与模型组小鼠肝脏AP
‑
1的Western blot条带图和AP1/GAPDH的分析柱状图；
[0023]图5为正常组与模型组小鼠肝脏AP
‑
1的C
‑
FOS亚基的Western blot条带图；
[0024]图6为健康人和自身免疫性肝病患者外周血单核细胞中AP
‑
1的C
‑
FOS亚基的表达量分析柱状图。
具体实施方式
[0025]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0026]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0027]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的
文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0028]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.AP
‑
1在制备自身免疫性肝病标志物中的应用。2.一种检测自身免疫性肝病的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括检测自身免疫性肝病标志物AP
‑
1的制剂。3.根据权利要求2所述的检测自身免疫性肝病的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括荧光标记的探针。4.根据权利要求2所述的检测自身免疫性肝病的试剂盒，其特征在于，所述检测自身免疫性肝病标志物AP
‑
1的制剂包括检测AP
‑
1的引物组。5.根据权利要求4所述的检测自身免疫性肝病的试剂盒，其特征在于，所述检测AP
‑
1的引物组的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈永平，陈正康，蔡超，徐洁，金兰灵，陈达之，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：