一种血清淀粉样蛋白A胶体金免疫比浊法检测试剂盒制造技术

一种血清淀粉样蛋白A胶体金免疫比浊法检测试剂盒，其中的抗体‑胶体金复合物为偶联有抗体的胶体金，所述抗体选自可特异性结合至血清淀粉样蛋白A的抗体。将抗体偶联至胶体金微球，不再使用胶乳作为偶联载体，用于检测血清淀粉样蛋白A时，有效避免沉淀物附着至反应杯壁上。

【技术实现步骤摘要】
一种血清淀粉样蛋白A胶体金免疫比浊法检测试剂盒
本专利技术涉及医学检测
，具体涉及一种血清淀粉样蛋白A胶体金免疫比浊法检测试剂盒。
技术介绍
血清淀粉样蛋白A(serumamyloidAprotein，SAA)是一类多基因编码的多形态蛋白家族，是组织淀粉样蛋白A的前体物质，属于急性时相反应蛋白，其相对分子量约12000。在急性时相反应中，如炎症或感染急性期，经IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，在48～72小时内浓度迅速升高，可升高到最初浓度的100～1000倍，但其半衰期短，只有50分钟左右，并在疾病恢复期迅速下降。某些疾病，如病毒感染、移植排斥反应、冠心病等，SAA的敏感性高，可为临床提供更好的参考价值，作为一个新的检测指标，SAA受到人们越来越多的关注。现有的血清淀粉样蛋白A免疫比浊检测试剂盒，直接使用胶乳微球偶联抗体，用得到胶乳抗体复合物试剂进行检测，一方面，测试中产生的沉淀附着于杯壁上，不利于仪器的清洗，另一方面，得到的胶乳试剂测试的线性范围较窄。
技术实现思路
根据第一方面，一种实施例中提供一种抗体-胶体金复合物，所述抗体-胶体金复合物为偶联有抗体的胶体金，所述抗体选自可特异性结合至血清淀粉样蛋白A的抗体。根据第二方面，一种实施例中提供一种组合物，含有保存液以及第一方面所述抗体-胶体金复合物。根据第三方面，一种实施例中提供一种试剂组合，包括第一方面所述抗体-胶体金复合物或第二方面所述组合物，第二方面所述组合物即为R2试剂。根据第四方面，一种实施例中提供一种试剂盒，包括第一方面所述抗体-胶体金复合物，或第二方面所述组合物，或第三方面所述试剂组合。根据第五方面，一种实施例中提供第一方面所述抗体-胶体金复合物，或第二方面所述组合物，或第三方面所述试剂组合，或第四方面所述试剂盒在检测血清淀粉样蛋白A中的应用。根据第六方面，一种实施例中提供第一方面所述抗体-胶体金复合物的制备方法，包括：将抗体与胶体金混合，反应得到所述抗体-胶体金复合物。依据上述实施例的抗体-胶体金复合物及其检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒，将抗体偶联至胶体金微球，不再使用胶乳作为偶联载体，用于检测血清淀粉样蛋白A时，能够提高线性范围，并且有效避免沉淀物附着反应杯壁上。附图说明图1显示为实施例1与普通免疫比浊法检测所得的血清样淀粉蛋白A浓度结果对比图；图2显示为实施例1与普通免疫比浊法检测后，清洗对应的反应槽，所测得的本底电压结果图；图3显示为实施例2与普通免疫比浊法检测所得的血清样淀粉蛋白A浓度结果对比图；图4显示为实施例2与普通免疫比浊法检测后，清洗对应的反应槽，所测得的本底电压结果图。具体实施方式下面通过具体实施方式结合附图对本专利技术作进一步详细说明。其中不同实施方式中类似元件采用了相关联的类似的元件标号。在以下的实施方式中，很多细节描述是为了使得本申请能被更好的理解。然而，本领域技术人员可以毫不费力的认识到，其中部分特征在不同情况下是可以省略的，或者可以由其他元件、材料、方法所替代。在某些情况下，本申请相关的一些操作并没有在说明书中显示或者描述，这是为了避免本申请的核心部分被过多的描述所淹没，而对于本领域技术人员而言，详细描述这些相关操作并不是必要的，他们根据说明书中的描述以及本领域的一般技术知识即可完整了解相关操作。另外，说明书中所描述的特点、操作或者特征可以以任意适当的方式结合形成各种实施方式。同时，方法描述中的各步骤或者动作也可以按照本领域技术人员所能显而易见的方式进行顺序调换或调整。因此，说明书和附图中的各种顺序只是为了清楚描述某一个实施例，并不意味着是必须的顺序，除非另有说明其中某个顺序是必须遵循的。本文中为部件所编序号本身，例如“第一”、“第二”等，仅用于区分所描述的对象，不具有任何顺序或技术含义。而本申请所说“连接”、“联接”，如无特别说明，均包括直接和间接连接(联接)。根据第一方面，在一些实施例中，提供一种抗体-胶体金复合物，所述抗体-胶体金复合物为偶联有抗体的胶体金，所述抗体选自可特异性结合至血清淀粉样蛋白A的抗体。在一些实施例中，通过胶体金来增强浊度，达到提高线性范围的作用。在一些实施例中，通过胶体金来改变反应后清洗能力，解决免疫比浊反应后产生的沉淀物附着在反应杯的杯壁上，造成杯壁不利于清洗的问题，并且同样达到定量检测目的。在一些实施例中，本专利技术旨在建立一种新的血清淀粉样蛋白A检测方法，线性范围、特异性以及清洗效果都能满足要求，可以用于生化仪器、特定蛋白仪器的检测。在一些实施例中，所述抗体-胶体金复合物是由抗体与胶体金按照(1-6)：3的质量比混合反应得到。在一些实施例中，血清淀粉样蛋白A包括但不限于人源血清淀粉样蛋白A。人源血清淀粉样蛋白A通常存在于人血液样本中，具体可以是血清样本、血浆样本、全血样本等等。在一些实施例中，所述抗体包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体中的至少一种。在一些实施例中，所述抗体包括但不限于羊抗人血清淀粉样蛋白A多克隆抗体、鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体、兔抗人血清淀粉样蛋白A多克隆抗体等等中的至少一种。抗体可从市场上购买得到，也可以自己制备。在一些实施例中，所述胶体金是由氯金酸在还原剂作用下反应得到。本领域技术人员可通过常规方法制备得到胶体金。在一些实施例中，所述还原剂包括但不限于白磷、维生素C(L-抗坏血酸)、柠檬酸钠、鞣酸中的至少一种。根据第二方面，在一些实施例中，提供一种组合物，含有保存液以及第一方面所述抗体-胶体金复合物。抗体-胶体金复合物是离心后的少量固体，所以，将抗体-胶体金复合物加入保存液后，几乎不改变保存液成分的浓度，同时，抗体-胶体金复合物与保存液混合后，混合液中抗体-胶体金复合物的浓度即为离心前的胶体金的浓度。在一些实施例中，所述保存液含有第二缓冲剂、第二表面活性剂、第二防腐剂、稳定剂中的至少一种。在一些实施例中，所述保存液含有如下终浓度的组分中的至少一种：5-50mmol/L第二缓冲剂、0.5-10g/L第二表面活性剂、0.5-5g/L第二防腐剂、0.5-10g/L稳定剂。抗体-胶体金复合物与保存液混合后，保存液中各组分浓度几乎不变，因此，前述第二缓冲剂、第二表面活性剂、第二防腐剂、稳定剂的浓度也是对应组分在保存液与胶乳抗体复合物混合后形成的混合液中的终浓度。在一些实施例中，所述保存液中第二缓冲剂的浓度具体可以包括但不限于5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L、30mmol/L、35mmol/L、40mmol/L、45mmol/L、50mmol/L等等。在一些实施例中，所述保存液中所述第二表面活性剂的浓度具体可以包括但不限于0.5g/L、0.6g/L、0.7g/L、0.8g/L、0.9g/L、1g/L、2g/L、3g/L、4g/L、5g本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体-胶体金复合物，所述抗体-胶体金复合物为偶联有抗体的胶体金，所述抗体选自可特异性结合至血清淀粉样蛋白A的抗体。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗体-胶体金复合物，所述抗体-胶体金复合物为偶联有抗体的胶体金，所述抗体选自可特异性结合至血清淀粉样蛋白A的抗体。


2.如权利要求1所述的抗体-胶体金复合物，其特征在于，所述抗体-胶体金复合物是由抗体与胶体金按照(1-6)：3的质量比混合反应得到；
和/或，所述血清淀粉样蛋白A选自人源血清淀粉样蛋白A；
和/或，所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体中的至少一种；
和/或，所述抗体选自羊抗人血清淀粉样蛋白A多克隆抗体、鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体、兔抗人血清淀粉样蛋白A多克隆抗体中的至少一种；
和/或，所述胶体金是由氯金酸在还原剂作用下反应得到；
和/或，所述还原剂选自白磷、维生素C、柠檬酸钠、鞣酸中的至少一种。


3.一种组合物，其特征在于，含有保存液以及权利要求1-2任意一项所述抗体-胶体金复合物。


4.如权利要求3所述组合物，其特征在于，所述保存液含有第二缓冲剂、第二表面活性剂、第二防腐剂、稳定剂中的至少一种；
和/或，所述保存液含有如下终浓度的组分中的至少一种：5-50mmol/L第二缓冲剂、0.5-10g/L第二表面活性剂、0.5-5g/L第二防腐剂、0.5-10g/L稳定剂；
和/或，所述保存液中第二缓冲剂选自磷酸缓冲盐溶液(PBS)、氨基丁三醇(Tris)、甘氨酸、硼酸盐、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸(MOPSO)、吗啉乙磺酸(MES)中的至少一种；
和/或，所述保存液中所述第二表面活性剂选自聚乙烯吡络烷酮、丙三醇、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、聚乙二醇10000、聚乙二醇20000、吐温20、吐温40、吐温80中的至少一种；
和/或，所述保存液中第二防腐剂选自叠氮化钠、ProClin-950、ProClin-300、KroVin100、KroVin300、KroVin500、KroVin750、硫柳汞中的至少一种；
和/或，所述保存液中稳定剂选自蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白、酪蛋白、甘露醇、明胶中至少一种；
和/或，抗体-胶体金复合物与保存液混合后，所得的混合液中胶体金的浓度为0.05-0.2wt％。


5.一种试剂组合，其特征在于，包括权利要求1-2任意一项所述抗体-胶体金复合物或权利要求3-4任意一项所述组合物，权利要求3-4任意一项所述组合物即为R2试剂。


6.如权利要求5所述试剂组合，其特征在于，还包括R1试剂，所述R1试剂含有第一缓冲剂、第一表面活性剂、第一溶血剂、第一防腐剂中的至少一种；
和/或，所述R1试剂含有如下终浓度的组分中的至少一种：25-50mmol/L第一缓冲剂、0.5-10g/L第一表面活性剂、0.2-5g/L第一溶血剂、0.5-5g/L第一防腐剂；
和/或，所述R1试剂中的第一缓冲剂选自磷酸缓冲盐溶液(PBS)、氨基丁三醇(Tris)、甘氨酸、硼...

【专利技术属性】
技术研发人员：王兴红，邹海涛，
申请(专利权)人：深圳市科曼医疗设备有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44