用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条技术

本公开描述了用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条，其中检测方法包括准备包括样品垫、标记垫、反应垫和吸收垫的测试条；将含有不同待测物的液态样品添加至样品垫；使液态样品经过标记垫并与标记垫中的标记物结合，分别形成带有第一标记的第一结合物和带有第二标记的第二结合物；接着使第一结合物中的一部分与中和带中的中和物结合，使第一结合物中的剩余部分和第二结合物与检测带中的检测物结合以进行检测；使液态样品被吸收垫吸收；并且通过检测检测带中的产物的含量以得到第一待测物和第二待测物的含量。根据本公开，提供一种能够对不同的含量或检测需求的待测物进行联合检测的用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条。

【技术实现步骤摘要】
用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条
本公开大体涉及化学检测
，具体涉及一种用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条。
技术介绍
在临床或科研等实践中，往往需要对多种物质进行浓度检测，例如，C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）和降钙素原（Procalcitonin，PCT）是常见的抗原，通过对CRP和PCT的检测，能够为炎症感染提供良好的指标。具体而言，C反应蛋白是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相蛋白。PCT是降钙素的前肽，为一种无激素活性的糖蛋白，作为一个新的炎症指标，广泛应用于感染性疾病的诊断和鉴别诊断，PCT是细菌感染所致重症全身性炎症反应的良好指标，在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。然而，由于不同物质自身的含量或检测需求存在巨大差距，在很多情况下往往无法使用一种测试条进行联合检测。例如，正常检测要求下CRP的线性范围是0.5-100mg/L，但CRP表面具有较多相同的抗原决定簇，因此检测时需要进行百倍稀释才能解决检测范围窄的局限，若样品不进行稀释，使用常规方式制作的测试条时会发现检测范围较窄，并且在超过一定范围时会产生HOOK效应（钩状效应），钩状效应是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象。而PCT线性范围是0.1-100ng/ml，对试条的检测灵敏度（0.1ng/ml）要求比较高，所需样本量越多，灵敏度才能越高。因此，由于两种待检物的指标的检测点具有矛盾性，因此联合检测方式在设计和开发上难以操作。
技术实现思路
本公开是有鉴于上述现有技术的状况而提出的，其目的在于提供一种能够针对具有不同的含量或检测需求的待测物进行联合检测的用于检测液态样品的浓度的检测方法和测试条。为此，本公开的第一方面提供了一种用于检测液态样品的浓度的检测方法，所述液态样品包括具有第一浓度的第一待测物和具有比所述第一浓度低的第二浓度的第二待测物，所述第一待测物和所述第二待测物不同，所述检测方法包括：准备测试条，所述测试条包括被配置为接收液态样品的样品垫、具有标记物的标记垫、包括沿着层析方向依次设置的具有中和物的中和带和具有检测物的检测带的反应垫、以及被配置为吸收液体的吸收垫，所述层析方向为从所述样品垫朝向所述吸收垫的方向，并且沿着所述层析方向，所述样品垫部分覆盖所述标记垫，所述标记垫部分覆盖所述反应垫，所述反应垫被所述吸收垫部分覆盖，所述中和物固定于所述中和带，所述检测物固定于所述检测带；将液态样品添加至所述样品垫；使液态样品经过所述标记垫，使所述标记物与液态样品中的所述第一待测物结合并形成带有第一标记的第一结合物，使所述标记物与液态样品中的所述第二待测物结合并形成带有第二标记的第二结合物；使液态样品经过所述反应垫，使所述中和物与液态样品中的所述第一结合物中的一部分结合以降低所述第一结合物的浓度，所述中和物不与所述第二结合物结合，并且使液态样品中的所述第一结合物中的剩余部分与所述检测物结合形成第一产物，使液态样品中的所述第二结合物与所述检测物结合形成第二产物；使剩余的液态样品被所述吸收垫吸收；并且通过检测所述检测带中的所述第一产物的含量以得到所述第一待测物的含量，通过检测所述检测带中的所述第二产物的含量以得到所述第二待测物的含量。在本公开中，利用中和带将第一待测物的一部分进行中和，降低第一待测物进入检测带时的浓度，使得有较大浓度差距的第一待测物和第二待测物到达检测带时的浓度差距减小，同时，中和物是固定在反应垫上的，中和产生的复合物会留在中和带，不会到达检测带，不干扰检测带的检测功能，从而能够使用一个测试条对两种含量差距大的物质进行联合检测。另外，在本公开所涉及的用于检测液态样品的浓度的检测方法，可选地，所述反应垫还包括沿着所述层析方向设置于所述检测带之后的质控带，并且所述标记垫还包括带有第三标记的质控物，所述质控带包括能够与所述质控物结合的质控结合物，所述质控结合物固定于所述质控带；在液态样品经过所述标记垫和所述反应垫时，所述标记垫的质控物跟随液态样品进入所述反应垫，并且使液态样品经过所述质控带以使液态样品中的质控物与所述质控结合物结合，其中，所述质控物不与所述第一待测物、所述第二待测物、所述第一结合物、所述第二结合物、所述中和物或所述检测物结合。由此，能够通过质控带对测试条进行质控，避免检测结果的假阴性。另外，在本公开所涉及的用于检测液态样品的浓度的检测方法，可选地，所述第一待测物为人体血液中的C反应蛋白，所述第二待测物为人体血液中的降钙素原；所述第一结合物为荧光标记C反应蛋白抗原-抗体复合物，所述第二结合物为荧光标记降钙素原抗原-抗体复合物；所述中和物为能够与荧光标记C反应蛋白抗原-抗体复合物结合的C反应蛋白抗体。在这种情况下，C反应蛋白和降钙素原作为临床常用的检测对象，通过使用荧光标记对CRP抗体和PCT抗体进行标记，从而能够使用一个测试条对C反应蛋白和降钙素原这两种含量差距大的物质进行联合检测。另外，在本公开所涉及的用于检测液态样品的浓度的检测方法，可选地，在所述测试条中，所述C反应蛋白抗体的含量为2.4~7.2μg。由此，使中和物的浓度保持在合适范围，既不会中和过少C反应蛋白导致钩状效应，也不会中和过多C反应蛋白导致无法检测，从而能够实现对CRP和PCT的联合检测。本公开第二方面提供了一种用于检测液态样品的浓度的测试条，所述液态样品包括具有第一浓度的第一待测物和具有比所述第一浓度低的第二浓度的第二待测物，且所述第一待测物和所述第二待测物不同，所述测试条包括依次设置在衬垫上的样品垫、标记垫、反应垫和吸收垫；所述样品垫被配置为接收液态样品；所述标记垫具有标记物，所述标记物能够与所述第一待测物结合并形成带有第一标记的第一结合物，所述标记物能够与所述第二待测物结合并形成带有第二标记的第二结合物；从所述样品垫至所述吸收垫的方向为层析方向，沿着所述层析方向，所述样品垫部分覆盖所述标记垫，所述标记垫部分覆盖所述反应垫，所述反应垫被所述吸收垫部分覆盖；所述反应垫包括沿着所述层析方向依次设置的中和带和检测带，所述中和带具有用于与所述第一结合物中的一部分结合以降低所述第一结合物的浓度的中和物，所述中和物不与所述第二结合物结合，并且所述中和物固定于所述中和带，所述检测带具有能够与所述第一结合物中的剩余部分以及所述第二结合物结合以进行检测的检测物，并且所述检测物固定于所述检测带；所述吸收垫由吸液材料制成，所述吸收垫被配置为吸收进入所述吸收垫的液体。在本公开中，利用中和带将第一待测物的一部分进行中和，降低第一待测物进入检测带时的浓度，使得有较大浓度差距的第一待测物和第二待测物到达检测带时的浓度差距减小，同时，中和物是固定在反应垫上的，中和产生的复合物会留在中和带，不会到达检测带，不干扰检测带的检测功能，从而能够使用一个测试条对两种含量差距大的物质进行联合检测。另外，在本公开所涉及的用于检测液态样品的浓度的测试条，可选地，所述反应垫还包括沿着所述层析方向设置于所述检测带之后的质控带，并且所述标记垫还包括带本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测液态样品的浓度的检测方法，所述液态样品包括具有第一浓度的第一待测物和具有比所述第一浓度低的第二浓度的第二待测物，所述第一待测物和所述第二待测物不同，其特征在于，所述检测方法包括：/n准备测试条，所述测试条包括被配置为接收液态样品的样品垫、具有标记物的标记垫、包括沿着层析方向依次设置的具有中和物的中和带和具有检测物的检测带的反应垫、以及被配置为吸收液体的吸收垫，所述层析方向为从所述样品垫朝向所述吸收垫的方向，并且沿着所述层析方向，所述样品垫部分覆盖所述标记垫，所述标记垫部分覆盖所述反应垫，所述反应垫被所述吸收垫部分覆盖，所述中和物固定于所述中和带，所述检测物固定于所述检测带；/n将液态样品添加至所述样品垫；/n使液态样品经过所述标记垫，使所述标记物与液态样品中的所述第一待测物结合并形成带有第一标记的第一结合物，使所述标记物与液态样品中的所述第二待测物结合并形成带有第二标记的第二结合物；/n使液态样品经过所述反应垫，使所述中和物与液态样品中的所述第一结合物中的一部分结合以降低所述第一结合物的浓度，所述中和物不与所述第二结合物结合，并且使液态样品中的所述第一结合物中的剩余部分与所述检测物结合形成第一产物，使液态样品中的所述第二结合物与所述检测物结合形成第二产物；/n使剩余的液态样品被所述吸收垫吸收；并且/n通过检测所述检测带中的所述第一产物的含量以得到所述第一待测物的含量，通过检测所述检测带中的所述第二产物的含量以得到所述第二待测物的含量。/n...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测液态样品的浓度的检测方法，所述液态样品包括具有第一浓度的第一待测物和具有比所述第一浓度低的第二浓度的第二待测物，所述第一待测物和所述第二待测物不同，其特征在于，所述检测方法包括：
准备测试条，所述测试条包括被配置为接收液态样品的样品垫、具有标记物的标记垫、包括沿着层析方向依次设置的具有中和物的中和带和具有检测物的检测带的反应垫、以及被配置为吸收液体的吸收垫，所述层析方向为从所述样品垫朝向所述吸收垫的方向，并且沿着所述层析方向，所述样品垫部分覆盖所述标记垫，所述标记垫部分覆盖所述反应垫，所述反应垫被所述吸收垫部分覆盖，所述中和物固定于所述中和带，所述检测物固定于所述检测带；
将液态样品添加至所述样品垫；
使液态样品经过所述标记垫，使所述标记物与液态样品中的所述第一待测物结合并形成带有第一标记的第一结合物，使所述标记物与液态样品中的所述第二待测物结合并形成带有第二标记的第二结合物；
使液态样品经过所述反应垫，使所述中和物与液态样品中的所述第一结合物中的一部分结合以降低所述第一结合物的浓度，所述中和物不与所述第二结合物结合，并且使液态样品中的所述第一结合物中的剩余部分与所述检测物结合形成第一产物，使液态样品中的所述第二结合物与所述检测物结合形成第二产物；
使剩余的液态样品被所述吸收垫吸收；并且
通过检测所述检测带中的所述第一产物的含量以得到所述第一待测物的含量，通过检测所述检测带中的所述第二产物的含量以得到所述第二待测物的含量。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，
所述反应垫还包括沿着所述层析方向设置于所述检测带之后的质控带，并且所述标记垫还包括带有第三标记的质控物，所述质控带包括能够与所述质控物结合的质控结合物，所述质控结合物固定于所述质控带；
在液态样品经过所述标记垫和所述反应垫时，所述标记垫的质控物跟随液态样品进入所述反应垫，并且使液态样品经过所述质控带以使液态样品中的质控物与所述质控结合物结合，其中，所述质控物不与所述第一待测物、所述第二待测物、所述第一结合物、所述第二结合物、所述中和物或所述检测物结合。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，
所述第一待测物为人体血液中的C反应蛋白，所述第二待测物为人体血液中的降钙素原；
所述第一结合物为荧光标记C反应蛋白抗原-抗体复合物，所述第二结合物为荧光标记降钙素原抗原-抗体复合物；
所述中和物为能够与荧光标记C反应蛋白抗原-抗体复合物结合的C反应蛋白抗体。

【专利技术属性】
技术研发人员：钟艳艳，陈金辉，
申请(专利权)人：北京华益精点生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11