一种核苷类似物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种核苷类似物及其制备方法和应用，属于抗病毒药物技术领域。本发明专利技术所述核苷类似物为苄基((((2R,3S)‑3‑羟基‑5‑(6‑(甲氨基)‑9H‑嘌呤‑9‑基)四氢呋喃‑2‑基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)‑L‑丙氨酸酯，结构式如式I所示。本发明专利技术所述核苷类似物生物利用度高，具有抗癌、抗病毒作用，还能够提高固有免疫能力。

【技术实现步骤摘要】
一种核苷类似物及其制备方法和应用
本专利技术涉及抗病毒药物
，具体涉及一种核苷类似物及其制备方法和应用。
技术介绍
病毒感染类疾病肆虐全球，因此作为一个全球性公共卫生问题，开发新型抗病毒治疗药物尤为重要。在目前己上市的及临床应用的抗病毒药物中，核苷类化合物占一半数以上，在抗病毒治疗中具有相当重要的地位，如癌症和单纯疱疹病毒(HSV)、腺病毒(AdV)、人巨细胞病毒(HCMV)、人免疫缺损病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)，以及丙型肝炎病毒(HCV)等病毒感染。许多核苷类似物是病毒复制过程中酶的抑制剂，可以抑制病毒DNA聚合酶和逆转录酶的活性并参与核苷酸竞争性掺入病毒的DNA链，从而终止或抑制病毒DNA链的延长和合成，使病毒受到抑制而发挥作用。但由于核苷类药物具有毒性大，体内半衰期短，且应用时易诱发耐药株等缺陷，使临床应用受到很大限制。因而研发高效、低毒且不易产生耐药的新型核苷类似物有非常重要的意义。然而，由于核苷类分子本身大多是极性分子，会阻碍其通过细胞旁途径通过细胞边界，因此它们的肠道通透性较低，因此口服生物利用度也较差。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种核苷类似物及其制备方法和应用。本专利技术所述核苷类似物生物利用度高，具有抗癌、抗病毒作用，还能够提高固有免疫能力。本专利技术提供了一种核苷类似物，所述核苷类似物的结构式如式I所示：本专利技术还提供了上述技术方案所述核苷类似物的制备方法，包括以下步骤：将溶解后的L-丙氨酸苄酯盐酸盐与三乙胺混合，进行中和反应，得到游离的L-丙氨酸苄酯，将游离的L-丙氨酸苄酯与二氯化磷酸苯酯混合进行第一取代反应，得到中间产物A，将所述中间产物A与对硝基苯酚和三乙胺混合，进行第二取代反应，得到式1所示化合物，将N6-甲基脱氧腺苷溶解于无水四氢呋喃和N-甲基吡咯烷酮的混合液中，加入叔丁基氯化镁进行活化反应，得到活化后的N6-甲基脱氧腺苷，将活化后的N6-甲基脱氧腺苷与式1所示化合物混合，进行取代反应，得到如式I所示的核苷类似物。优选的是，所述第一取代反应的条件为：-75～-80℃反应25～35min后20～30℃反应2.5～3.5h。优选的是，所述第二取代反应的条件为：0℃反应25～35min后20～30℃反应4.5～5.5h。优选的是，所述活化反应的温度为20～25℃，时间为20～60min。优选的是，所述第三取代反应的温度为50～60℃，时间为6～8h。本专利技术还提供了上述技术方案所述核苷类似物或上述技术方案所述制备方法制备得到的核苷类似物在制备抗病毒药物中的应用。优选的是，所述病毒包括单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒和人乳头瘤病毒。本专利技术还提供了上述技术方案所述核苷类似物或上述技术方案所述制备方法制备得到的核苷类似物在制备提高固有免疫能力的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述核苷类似物或上述技术方案所述制备方法制备得到的核苷类似物在制备抗癌药物中的应用。本专利技术提供了一种核苷类似物。本专利技术所述核苷类似物生物利用度高，具有抗癌、抗病毒作用，还能够提高固有免疫能力。本专利技术所述核苷类似物作用机制是进入体内合成活性三磷酸盐，通过DNA聚合酶插入病毒基因组。通过cGAS增强对病毒DNA的感知，进而增强DNA免疫刺激能力；本专利技术所述核苷类似物可以应用在制备灭活疫苗，减毒活疫苗和DNA疫苗过程中，通过增强免疫反应能力，作为免疫预防。干扰素是一类在病毒感染早期能唤起免疫响应的蛋白质，因其干扰病毒复制的能力而被作为疾病早期阶段抑制病情进展的一种常用治疗方法，I型干扰素(IFNB)走在身体抗病毒入侵的前线，本专利技术所述核苷类似物自身不能唤起免疫反应，而是当病毒感染时通过病毒复制进入病毒DNA，这样经过修饰的病毒DNA被cGAS感知增强，通过干扰素基因刺激蛋白(STING)，诱导IFNB的产生，故本专利技术核苷类似物能通过改变病毒DNA修饰提高人体固有免疫能力，为对抗病毒治疗提供新的方向。附图说明图1为本专利技术提供的化合物1的HNMR谱图；图2为本专利技术提供的化合物1的质谱峰图；图3为本专利技术提供的N6-甲基脱氧腺苷的HNMR谱图；图4为本专利技术提供的N6-甲基脱氧腺苷质谱峰图；图5为本专利技术提供的细胞内游离的N6-甲基脱氧腺苷三磷酸；图6为本专利技术提供的定量细胞和病毒基因组内N6-甲基脱氧腺苷和脱氧腺苷比值；图7为本专利技术提供的QRT-PCR方法检测MEF细胞感染HSV-1和插入N6mdATP修饰的HSV-1对IFNB在mRNA水平引起的变化图；图8为本专利技术提供的QRT-PCR方法检测MLF细胞感染HSV-1和插入N6mdATP修饰的HSV-1对IFNB在mRNA水平引起的变化图；图9为本专利技术提供的QRT-PCR方法检测MEF细胞感染AdV和插入N6mdATP修饰的AdV对IFNB在mRNA水平引起的变化图；图10为本专利技术提供的QRT-PCR方法检测MLF细胞感染AdV和插入N6mdATP修饰的AdV对IFNB在mRNA水平引起的变化图。具体实施方式本专利技术提供了一种核苷类似物，所述核苷类似物的结构式如式I所示：本专利技术所述核苷类似物的名称为：苄基((((2R,3S)-3-羟基-5-(6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯，英文名：benzyl((((2R,3S)-3-hydroxy-5-(6-(methylamino)-9H-purin-9-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(phenoxy)phosphoryl)-L-alaninate(通用名：QKY-613)。化学式为C27H31N6O7P，分子量为582.55。本专利技术核苷类似物在结构上与天然核苷不同，本专利技术通过用芳香基团和氨基酸酯掩饰住带磷酸的核苷类似物的磷酸基团的氧原子，使得本专利技术所述核苷类似物能够提高生物体利用度，同时能够使本专利技术核苷类似物进入人体后合成活性三磷酸代谢物效率显著高于核苷。本专利技术所述核苷类似物进入人体后，合成活性三磷酸代谢物，在病毒感染初期能够通过病毒复制进入病毒DNA进而引起很强的免疫反应达到抗病毒的效果。具体的，体内感染病原微生物的DNA刺激先天免疫反应，环状GMP-AMP合酶(cGAS)通过识别细胞质DNA和信号，激活STING，进而诱导具有抗病毒和免疫调节活性的I型干扰素(IFNB)。哺乳动物的dm6A水平极低(dm6A/dA<1×10-6)，而大多数微生物(如细菌)的dm6A水平要高出10000倍以上。哺乳动物DNA聚合酶保真性极高，而病原微生物的DNA聚合酶保真性很低，本专利技术所述核苷类似物进入体内后合成活性三磷酸代谢物，通过DNA聚合酶插入病毒基因组，而不进入人基因组。经过核苷类似物修饰的病毒基因组，增强了cGAS对其感知能力，进而提高人体固有免疫能力。本专利技术所述核苷类似物可以应用于制备活体疫苗和DNA疫苗，作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核苷类似物，其特征在于，所述核苷类似物的结构式如式I所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种核苷类似物，其特征在于，所述核苷类似物的结构式如式I所示：





2.权利要求1所述核苷类似物的制备方法，包括以下步骤：
将溶解后的L-丙氨酸苄酯盐酸盐与三乙胺混合，进行中和反应，得到游离的L-丙氨酸苄酯，将游离的L-丙氨酸苄酯与二氯化磷酸苯酯混合进行第一取代反应，得到中间产物A，将所述中间产物A与对硝基苯酚和三乙胺混合，进行第二取代反应，得到式1所示化合物，



将N6-甲基脱氧腺苷溶解于无水四氢呋喃和N-甲基吡咯烷酮的混合液中，加入叔丁基氯化镁进行活化反应，得到活化后的N6-甲基脱氧腺苷，将活化后的N6-甲基脱氧腺苷与式1所示化合物混合，进行第三取代反应，得到如式I所示的核苷类似物。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一取代反应的条件为：-75～-80℃反应25～35min后20～30℃反应2.5～3.5h。


4.根据权利要求2所...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨庆凯，王丽娜，王凯，孙震，宋成丽，
申请(专利权)人：大连医科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21