一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术的一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒及其制备方法，其技术方案要点是：包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含缓冲液、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶或过氧化氢酶、血清白蛋白、非离子表面活性剂、防腐剂、Trinder

【技术实现步骤摘要】
一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒及其制备方法
[0001]本案为分案申请，具体为申请号：2020108215100，名称为： 一种可消除羟苯磺酸钙，酚磺乙胺的肌酐试剂盒及其制备方法，申请 日为：2020.08.15的分案申请。


[0002]本专利技术属于医学检验
，本专利技术涉及一种可消除羟苯磺酸 钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒及其制备方法。

技术介绍

[0003]肌酐为临床检验上肾功能的主要指标及检测项目，测定血清肌 酐的方法主要有两种：一种是碱性苦味酸速率法(Jaffe法)，一种是 肌氨酸氧化酶法；Jaffe法由于线性范围窄，特异性差，易受样本中 其他物质(如酮体、抗坏血酸、胆红素、头孢、多巴胺等)干扰，出现 检测偏差，已逐渐退出市场。目前市场使用较多的为肌氨酸氧化酶法， 此法已被各医院逐渐淘汰弃用改由肌氨酸氧化酶法检测，其检测原理 如下：
[0004][0005][0006][0007][0008]现行市售检测试剂盒均为双试剂，试剂R1内含肌酸酶，肌氨酸 氧化酶先将血清中之肌酸分解产生H2O2，再以过氧化物酶及 Trinder
’
s试剂与形成的H2O2反应生产无色化合物，或以过氧化氢酶 用来消除血清肌酸产生的H2O2，将生成的H2O2分解成水和氧，然后加 入R2试剂，R2试剂里含肌酐酶及另一种Trinder
’
s试剂，及叠氮 钠，肌酐酶将肌酐水解成肌酸再由R1里的肌酸酶，肌氨酸氧化酶， 过氧化物酶及Trinder
’<br/>s试剂之4
‑
AAP及另一种Trinder
’
s试剂苯 酚类化合物共同存在下呈色进行测定，试剂R1里如含过氧化氢酶则 被试剂R2内之叠氮钠反应掉，此反应过程均利用了酶的专一性，但 生成的H2O2为强氧化剂，极易被血清中的还原性药物消耗而产生负干 扰。
[0009]肌酐作为肾功能最重要的指标，在肾病造成的微血管病变治疗及 保护上常用的
羟苯磺酸钙常用药具极强的还原性可与H2O2直接反应， 消耗掉H2O2；另在常用于预防及治疗外科手术出血过多的常用药酚磺 乙胺，亦具有强的还原性，此两种药物均会消耗现今医院常用的肌酐 酶法测定时产生的H2O2，造成肌酐值会有严重的负偏差，造成医师诊 断治疗时的误判。
[0010]羟苯磺酸钙和酚磺乙胺对肌氨酸氧化酶法检测肌酐的负干扰 对被施用这两种药物的患者造成很大的不便。例如，对于糖尿病患者 而言，常伴发肾功能不全，而所施用的羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法 检测肌酐的负干扰可能造成糖尿病患者肾功能不正确评估，掩盖并延 误病情。而对于手术患者，所施用的酚磺乙胺对肌氨酸氧化酶法检测 肌酐的负干扰可能使得不能正确评估其肾功能，造成术后并发症，影 响患者的术后恢复。

技术实现思路

[0011]本专利技术公开一种可消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物引起肌 酐测定负偏差干扰的肌酐试剂盒，克服现在各医院临床检验测定肌酐 时，由于血清标本中含羟苯磺酸钙、酚磺乙胺造成的负偏差，使肌酐 测定时不准确，导致医师治疗过程中的误判的缺陷，试剂盒稳定性好， 操作简单迅速，使测定准确，适用于全自动生化分析仪血清肌酐的检 测。
[0012]本专利技术还公开一种可消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物引起 肌酐测定负偏差干扰的肌酐试剂盒的制备方法。
[0013]本专利技术的可消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物引起肌酐测定 负偏差干扰的肌酐试剂盒，包括独立的试剂R1和试剂R2，所述试剂 R1中包含缓冲液、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧 化物酶或过氧化氢酶、血清白蛋白、非离子表面活性剂、防腐剂、 Trinder
’
s反应剂A、漆酶或金属酸盐；所述试剂R2包含缓冲液、 血清白蛋白、肌酐酶、防腐剂、可含亦可不含非离子表面活性剂，及 Trinder
’
s反应剂B。漆酶可利用氧(O2)将羟苯磺酸钙及酚磺乙胺 氧化成苯醌类化合物；上述金属酸盐或五氧化二钒或三氯氧钒作为氧 化剂可将羟苯磺酸钙，酚磺乙胺氧化，避免消耗掉在肌酐测定时产生 的H2O2。上述R1试剂中，漆酶或氧化态金属酸盐或五氧化二钒或三 氯氧钒组分亦可由试剂R1中剥离出来，单独一并使用前再加入成为 试剂R1。
[0014]优选的，试剂R1中有时也会包含抗坏血酸氧化酶，抗坏血酸氧化 酶的量在5
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10KU/L，优选5.5
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10KU/L的范围内，抗坏血酸氧化酶的量 在上述范围内时可以有效地降低抗坏血酸对肌酐测定所造成的干扰， 在一些具体实施方式中，所述抗坏血酸氧化酶的量可以为5.5KU/L、 6.4KU/L、7.5KU/L、8.8KU/L、8.6KU/L、6KU/L、7.2KU/L、9.2KU/L、 9.5KU/L或10KU/L。
[0015]优选的，所述漆酶是Sigma
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Alderich公司产品号SAE0050之漆酶。 所述漆酶是一种含铜的多酚氧化还原酶，可利用水中的氧分子氧化多 种苯酚类化合物生成醌类化合物，氧分子本身被还原成水，为污水处 理中常用于环境友好酶用来消除污水中的酚类化合物。羟苯磺酸钙及 酚磺乙胺均为含苯酚环结构之还原剂，漆酶可以将其氧化消除；但漆 酶一般在PH2～4时活力最高，稳定性较好，而肌酐酶法试剂之PH值 须在7～9，本专利试验不同来源之漆酶后，最终筛选出 Sigma
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Alderich公司产品号SAE0050之漆酶，其在PH7.0～9.0时有 很好之活性及稳定性，可加入肌酐酶R1试剂中用以消除羟苯磺酸钙 及酚磺乙胺之干扰。
[0016]优选的，所述金属酸盐包括氧化态镍酸盐、铁酸盐、钴酸盐、 铬酸盐、锰酸盐、钒酸盐，所述钒酸盐包括多聚钒酸盐、偏钒酸盐、 五氧化二钒或三氯氧钒一种或一种以上混合。本专利技术采用元素周期表 中23、24、25、26、27、28位各金属元素酸盐，具体选择氧化还原 电位高的氧化态镍酸盐、钴酸盐、铬酸盐、锰酸盐、钒酸盐，所述钒 酸盐包括偏钒酸盐、多聚钒酸盐、五氧化二钒或三氯氧钒均可做为氧 化剂来消除肌酐测定时血清中羟苯磺酸钙及酚磺乙胺的干扰造成的 负偏差，同时不影响试剂R1及试剂R2中各组分的稳定性。
[0017]优选的，所述R1中缓冲液浓度为5～200mM，PH7.0～9.0；肌 酸酶含量5～50ku/升，肌氨酸氧化酶含量5～50ku/升，抗坏血酸 氧化酶1～10ku/升，过氧化物酶含量1～10ku/升，或含过氧化 氢酶100～500ku/升，血清蛋白1～2克/升，Trinder
’
s反应剂A 0.5～5mM/升[所述的Trinder
’
s反应剂A为4－氨基安替比林 (4
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Aminoantipyrine,简称4－AAP)]；防腐剂重量比含量 0.005％
‑
0.2％，如采用漆酶消除羟苯磺酸钙及酚磺乙胺之负干扰时， 漆酶含量0.1～10ku/升；如采用上述金属本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒，其特征在于：包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含缓冲液、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、血清白蛋白、非离子表面活性剂、防腐剂、Trinder
’
s反应剂A、漆酶或铬酸盐或铁酸盐或五氧化二钒；所述试剂R2包含缓冲液、血清白蛋白、肌酐酶、防腐剂、Trinder
’
s反应剂B；所述的Trinder
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s反应剂A为4－氨基安替比林，所述Trinder
’
s反应剂B为TOOS、DHBS、DAOS、HDAOS、TBHBA、TOPS、TODB、4－氯酚的一种或两种以上混合；所述漆酶是Sigma
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Alderich公司产品号SAE0050之漆酶。2.根据权利要求1所述的一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒，其特征在于：所述R1中，缓冲液浓度为5～200mM，PH7.0～9.0；肌酸酶含量5～50ku/升；肌氨酸氧化酶含量5～50ku/升；过氧化物酶含量1～10ku/升；抗坏血酸氧化酶1～10ku/升；血清蛋白1～2克/升；Trinder
’
s反应剂A 0.5～5mM/升；防腐剂重量比为0.005％
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0.2％时，漆酶含量0.1～10ku/升，或采用含量在0.01～10mM的铬酸盐或铁酸盐或五氧化二钒。3.根据权利要求1所述的一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒，其特征在于：所述R1的缓冲液为BES、BICINE、DIPSO、EPPS、PIPES、HEPES、MOPS、TAPS、TAPSO、TES、Tricine、Tris、双甘肽、磷酸盐中的一种或一种以上混合；试剂R2所述的缓冲液为BES、BICINE、DIPSO、EPPS、PIPES、HEPES、MOPS、TAPS、TAPSO、TES、TRICINE、TRTS、双甘肽、磷酸盐中的一种或一种以上混合。4.根据权利要求1所述的一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒，其特征在于：所述试剂R1及试剂R2中还含有表面活性剂，其重量比含量为0.01％～0.3％，所述表面活性剂为非...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞永标，
申请(专利权)人：中山标佳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：