一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法技术

本发明专利技术属于药物检测技术领域，具体提供一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，步骤为：取焦谷氨酸对照品适量，加水溶解并稀释，即得到对照品溶液；精密量取复方氨基酸注射液，加水稀释并定容，即得到供试品溶液；将对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，根据对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图分别得到对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；利用对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积计算得到供试品溶液中焦谷氨酸的浓度。本发明专利技术的检测方法操作简便、快捷、准确度高、重复性好。重复性好。重复性好。

【技术实现步骤摘要】
一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物质量检测
，尤其涉及一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法。

技术介绍

[0002]复方氨基酸注射液(18AA
‑
V)属于氨基酸类药，用于蛋白质摄入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需要的患者，亦用于改善手术后病人的营养状况。复方氨基酸注射液的组分中，每1000mL含L
‑
谷氨酸(C5H9NO4)0.75g，焦谷氨酸(PGA)是谷氨酸在高温下脱水缩合而成的降解产物，具有一定的对谷氨酸等受体的阻断作用，也可能引起神经毒性和代谢异常，促进复发性癫痫发作，对患者的中枢神经系统产生不利影响，焦谷氨酸的存在对复方氨基酸注射液的临床用药安全构成了潜在的威胁。
[0003]现有技术中检测焦谷氨酸含量的方法有：柱前衍生法、柱后衍生法、以离子对制剂作为流动相过柱、梯度洗脱法，这些方法存在操作繁琐、操作要求高、实验时间长、对色谱柱损伤大的缺点。
[0004]因此，有必要提供一种科学、简便的方法检测复方氨基酸注射液中的焦谷氨酸含量。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，该检测方法无需衍生化前处理，操作简便、灵敏度高、准确度高、重复性好，解决了处方中其他氨基酸成分的干扰，能够实现对样品的直接检测，大大减少了分析时间，适用于工业快速分析，能够保证产品质量。
[0006]本专利技术提供一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，包括以下步骤：
[0007]步骤S1，制备对照品溶液：
[0008]取焦谷氨酸对照品适量，使用电子天平精密称定，加水溶解并稀释，即得到对照品溶液；
[0009]步骤S2，制备供试品溶液：
[0010]精密量取复方氨基酸注射液加入到容量瓶中，加水稀释并定容，即得到供试品溶液；
[0011]步骤S3，检测：
[0012]将步骤S1的对照品溶液和步骤S2的供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，根据所述对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图分别得到对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；
[0013]步骤S4，计算：
[0014]利用所述对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积计
算得到供试品溶液中焦谷氨酸的浓度。
[0015]进一步地，供试品溶液中焦谷氨酸的浓度的计算公式为：
[0016][0017]式中，A
供试品
为供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；A
对照品
为对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积；C
对照品
为对照品溶液的浓度，μg/mL；P
对照品
为焦谷氨酸对照品的纯度，％；C
焦谷氨酸
为供试品溶液中焦谷氨酸的浓度，μg/mL。
[0018]进一步地，对照品溶液的浓度为12μg/mL。
[0019]进一步地，制备供试品溶液的过程为：精密量取复方氨基酸注射液1mL加入到10mL容量瓶中，加水稀释并定容至10mL，制备得到供试品溶液。
[0020]进一步地，步骤S3中，高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱选用氢型强离子交换色谱柱(品牌为月旭或Phenomenex)；流动相选用浓度为0.0125mol/L的硫酸溶液；洗脱方式为等度洗脱；流动相的流速为0.3～0.6mL/min；检测波长为205nm；柱温为45～55℃；进样量为5～100μL。
[0021]进一步地，色谱柱的规格为7.8mm
×
300mm，色谱柱内填料的粒径为5μm或交联度为8％。
[0022]进一步地，流动相的流速为0.5mL/min。
[0023]进一步地，柱温为50℃。
[0024]进一步地，进样量为20μL。
[0025]本专利技术提供的技术方案带来的有益效果是：本专利技术提供的检测方法采用高效液相色谱法检测焦谷氨酸的含量，无需衍生化前处理，利用水作为溶剂配制供试品溶液和对照品溶液，以硫酸溶液为流动相进行等度洗脱，操作简便、灵敏度高、准确度高、重复性好，可以快速检测复方氨基酸注射液中焦谷氨酸的含量，从而确保复方氨基酸注射液的质量可控，并最终确定产品的安全有效。
附图说明
[0026]图1为焦谷氨酸对照品溶液、供试品溶液和空白溶液的色谱图。
[0027]图2为焦谷氨酸的线性图谱。
具体实施方式
[0028]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地描述。
[0029]以下实施例中使用的试剂、药品、仪器设备信息为：
[0030]试剂与药品：
[0031]焦谷氨酸对照品购自Sigma，批号：BCBG0145V；
[0032]复方氨基酸注射液(18AA
‑
V)来源于武汉久安药业有限公司，批号：19041011；
[0033]硫酸购自国药集团，批号：20180524；
[0034]仪器设备：
[0035]高效液相色谱仪为Agilent1260Ⅱ高效液相色谱仪；
[0036]电子天平为十万分之一精密电子天平，型号：XPR205DR。
[0037]实施例1：
[0038]本专利技术的实施例1提供了一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，包括以下步骤：
[0039]步骤S1，制备对照品溶液：
[0040]取焦谷氨酸对照品适量，使用电子天平精密称定，加水溶解并稀释制备成焦谷氨酸浓度为12μg/mL的对照品溶液；
[0041]步骤S2，制备供试品溶液：
[0042]精密量取复方氨基酸注射液(18AA
‑
V)1mL加入到10mL容量瓶中，加水稀释并定容至10mL，制备得到供试品溶液；
[0043]步骤S3，检测：
[0044]将步骤S1的对照品溶液和步骤S2的供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，根据对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图分别得到对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；其中，高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱：Sugar
‑
H(7.8mm
×
300mm，5μm)；流动相：0.0125mol/L硫酸溶液，等度洗脱；流速：0.5mL/min；检测波长：205nm；柱温：50℃；进样量：20μL；
[0045]步骤S4，计算：
[0046]利用对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积计算得到供试品溶液中焦谷氨酸的浓度，计算公式为：
[0047][0048]式中，A
供试品
为供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；A
对照品
为对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，制备对照品溶液：称取焦谷氨酸对照品，加水溶解并稀释，即得到对照品溶液；S2，制备供试品溶液：精密量取复方氨基酸注射液，加水稀释并定容，即得到供试品溶液；S3，检测：将步骤S1的对照品溶液和步骤S2的供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，根据所述对照品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图分别得到对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；S4，计算：利用所述对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积和供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积计算得到供试品溶液中焦谷氨酸的浓度。2.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中焦谷氨酸含量的检测方法，其特征在于，供试品溶液中焦谷氨酸的浓度的计算公式为：式中，A
供试品
为供试品溶液中焦谷氨酸的峰面积；A
对照品
为对照品溶液中焦谷氨酸的峰面积；C
对照品
为对照品溶液的浓度，μg/mL；P

【专利技术属性】
技术研发人员：山广志，何凯峰，左利民，祝丽敏，徐士婕，陈凤，仇小丹，黄茜，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：