一种碱性蛋白酶突变体及其用途制造技术

本发明专利技术主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。生型有显著提高。生型有显著提高。

【技术实现步骤摘要】
一种碱性蛋白酶突变体及其用途


[0001]本专利技术属于微生物与基因工程
，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其用途。

技术介绍

[0002]蛋白酶是一种具有复杂结构与功能的水解酶，能够裂解肽键产生短肽或氨基酸。按照最适pH值的不同，蛋白酶可分为三种类型：酸性蛋白酶，最适pH为2.0～5.0，主要来源于真菌；中性蛋白酶，最适pH为7.0，主要来源于植物；碱性蛋白酶，最适pH为8.0及以上，主要来源于微生物。蛋白酶作为最重要的工业酶制剂之一，销售额占所有酶制剂销售量的60％以上，在洗涤剂、医药、食品、皮革、丝绸、摄影等领域有着广泛的应用。
[0003]合成洗涤剂被用作清洁剂已有100多年的历史。目前，合成洗涤剂已经成为世界各地人们日常生活中不可或缺的一部分。然而，合成洗涤剂中的磷酸盐等成分对生态系统的负面影响逐渐得到了人们的重视。因此，作为洗涤剂中有害化学物质的环保型替代品，洗涤剂酶已迅速发展成为一个包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶在内的广阔领域。洗涤剂工业中通常使用的酶是碱性酶，因为洗涤剂的pH值通常在9.0到12.0之间。在洗涤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述碱性蛋白酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。2.编码权利要求1所述碱性蛋白酶突变体的基因。3.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求2所述基因。4.一种宿主细胞，其特征在于，包含权利要求2所述基因或权利要求3所述重组载体。5.如权利要求3所述重组载体，其特征在于，所述载体是pWB980。6.如权利要求4所述宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是枯草芽孢杆菌WB600。7.权利要求1所述碱性蛋白酶突变体的用...

【专利技术属性】
技术研发人员：路福平，李玉，刘逸寒，杨子璇，宋广超，王兴吉，李庆刚，刘文龙，
申请(专利权)人：山东隆科特酶制剂有限公司，
类型：发明
国别省市：