一种低温酶解性能提高的角蛋白酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种低温酶解性能提高的角蛋白酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明专利技术对角蛋白酶基因的前肽与主酶进行易错PCR突变，构建筛选得到低温酶解活性突变重组菌，得到角蛋白酶突变体T3I/V45D/S100D。研究结果显示角蛋白酶突变体T3I/V45D/S100D在20℃的剩余酶活提升至野生亲本角蛋白酶的2.28倍，在30℃的剩余酶活提升至野生亲本角蛋白酶的1.95倍。角蛋白酶的1.95倍。角蛋白酶的1.95倍。

【技术实现步骤摘要】
一种低温酶解性能提高的角蛋白酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及一种低温酶解性能提高的角蛋白酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程


技术介绍

[0002]角蛋白酶是一种能够降解角蛋白类底物(例如角质，皮屑，羽毛等)的特异性角蛋白酶，由真菌、放线菌和细菌等多种微生物以角蛋白为单一碳源生长时产生。角蛋白酶作为一种底物专一性较宽泛，水解催化能力强的蛋白酶，广泛地运用于日化行业、畜牧行业、饲料行业、制革行业、医药行业中，具有巨大的研究与应用价值。
[0003]但是，目前研究发现的野生角蛋白酶多属于高温碱性蛋白酶，它们的最适反应温度一般为60℃左右，在20℃～40℃条件下的酶活一般不高。而且，在目前的研究当中，大多数都是针对其在较高的最适条件温度下进行酶活和热稳定性的研究，少有从角蛋白酶的实际应用环境出发，针对其低温性能进行改造的研究。
[0004]然而，在工业化与实际应用中，对角蛋白酶在较低温度下的性能有比较苛刻的要求，如制革工业中的浸水工艺要求角蛋白酶在室温条件(20℃～30℃)下有良好的酶解性能；在日化行业中，角蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种角蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体为，将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的角蛋白酶的第3位、第45位和第100位同时变得到的。2.如权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体为，将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的角蛋白酶的第3位的苏氨酸突变为异亮氨酸，第45位的缬氨酸突变为天冬氨酸及第100位的丝氨酸突变为天冬氨酸得到的。3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。4.携带权利要求3所述基因的载体。5.携带权利要求3所述基因，或权利要求4所述载体的重组细胞。6.如权利要求5所述的重组细胞，其特征在于，以细菌或真菌为宿主细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：张娟，李江华，周冠宇，陈坚，堵国成，冒鑫哲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：