一种碱性蛋白酶突变体及其制备制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其制备。本发明专利技术通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型带有酶原区的碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了十六个高活力碱性蛋白酶基因。将这十六个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。优化获得新型碱性蛋白酶。优化获得新型碱性蛋白酶。

【技术实现步骤摘要】
一种碱性蛋白酶突变体及其制备

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[0001]本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其制备。
技术背景：
[0002]碱性蛋白酶是指用于水解蛋白质或多肽并且在碱性环境下活力较高、稳定性较好的一类酶，其最适pH一般为9～11，与酸性和中性蛋白酶相比具有作用范围广、水解能力强等优点，是目前工业中用量较多的酶之一。碱性蛋白酶在现代工业中具有极其广泛的用途，是洗涤剂生产、食品工业、医药、饲料、化学工业、废物处理及皮革制造等行业中的重要酶制剂。在洗涤剂中对日常生活中常见的血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢具有广泛的洗涤效果，并且能够大幅度提高洗涤剂的去污能力；在食品行业可有效应用于动植物蛋白的加工，以改善蛋白食品的品质和风味，增强食品的营养和功能，制备生物活性肽等；在生物
，用于核酸纯化过程中蛋白质的去除，如海洋弧菌X4B
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7分离的碱性蛋白酶可解聚组蛋白，降解DNA酶；在制革工业中，利用酶法脱毛比传统灰碱法脱毛的污染更小，且反应条件温和、水解效率高，可以有效提高制革工业的生产效率和经济效益。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述碱性蛋白酶的成熟肽是：(1)在SEQ ID NO.6所示的碱性蛋白酶的基础上，发生包含以下突变组合中的任意一种获得的：V11I/G95V/V145I/N212S、V11L/G95V/V145I/N212S、V11I/G95P/V145L/N212S、V11I/G95V/V145L/N212S、V11L/G95P/V145I/N212S、V11L/G95P/V145L/N212S、V11L/G95V/V145L/N212S、V11I/G95P/V145I/N212S、V11I/G95P/V145I/N212T、V11L/G95P/V145I/N212T、V11I/G95V/V145I/N212T、V11I/G95P/V145L/N212T、V11L/G95V/V145I/N212T、V11L/G95P/V145L/N212T、V11I/G95V/V145L/N212T或V11L/G...

【专利技术属性】
技术研发人员：路福平，刘逸寒，王兴吉，李玉，王克芬，刘文龙，张元夫，刘夫锋，张会图，
申请(专利权)人：山东隆科特酶制剂有限公司，
类型：发明
国别省市：