动物饲料组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种改善单胃动物的褥草质量和/或减少单胃动物的足垫皮炎的方法，所述方法包括向所述动物施用包含一种或多种微生物胞壁质酶的组合物、动物饲料或动物饲料添加剂。剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】动物饲料组合物及其用途
[0001]对序列表的引用
[0002]本申请包含计算机可读形式的序列表，该序列表以引用方式并入本文。
[0003]专利技术背景


[0004]本专利技术涉及使用一种或多种微生物胞壁质酶改善动物的褥草质量和/或减少动物的足垫皮炎的方法。

技术介绍

[0005]胞壁质酶(muramidase)，又称溶菌酶(lysozyme)，是作为许多生物体针对细菌的防御机制产生的O
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糖基水解酶。该酶通过切割细菌中的一种重要结构分子肽聚糖的糖苷键来引起细菌细胞壁的水解。当细菌细胞的细胞壁被胞壁质酶削弱后，细菌细胞就会因为不平衡的渗透压而溶解。
[0006]胞壁质酶天然存在于许多生物体，例如病毒、植物、昆虫、鸟类、爬行动物和哺乳动物中。胞壁质酶已被分类为五种不同的糖苷水解酶(GH)家族(CAZy，www.cazy.org)：母鸡卵清胞壁质酶(GH22)、鹅卵清胞壁质酶(GH23)、噬菌体T4胞壁质酶(GH24)、鞘脂单胞菌属(Sphingomonas)鞭毛蛋白(GH73)和拟鞘孢属(Chalaropsis)胞壁质酶(GH25)。来自GH23和GH24家族的胞壁质酶主要是从噬菌体已知的，并且直到最近才在真菌中鉴定出。已经发现胞壁质酶家族GH25在结构上与其他胞壁质酶家族无关。
[0007]胞壁质酶由于其天然丰度而传统上从母鸡卵清中提取，并且直到最近，母鸡卵清胞壁质酶还是唯一被研究用于动物饲料中的胞壁质酶。从母鸡卵清中提取的胞壁质酶是商业市场上可得的主要产品，但不能切割例如金黄色酿脓葡萄球菌(Staphylococcus aureus)细胞壁中的N,6
‑
O
‑
二乙酰基胞壁酸，因此尤其不能溶解这种重要的人类病原体(Masschalck B、Deckers D、Michiels CW(2002),“Lytic and nonlytic mechanism of inactivation of gram
‑
positive bacteria by muramidase under atmospheric and high hydrostatic pressure”,J Food Prot.65(12):1916
‑
23)。
[0008]WO2000/21381公开了一种组合物，该组合物包含至少两种抗微生物酶以及多不饱和脂肪酸，其中所述抗微生物酶中的一种抗微生物酶是来自雏鸡卵清的GH22胞壁质酶。GB2379166公开了一种组合物，该组合物包含破坏细菌的肽聚糖层的化合物和破坏细菌的磷脂层的化合物，其中破坏肽聚糖的化合物是来自雏鸡卵清的GH22胞壁质酶。
[0009]WO2004/026334公开了一种用于抑制牲畜肠道中肠道病原体生长的抗微生物组合物，该抗微生物组合物包含：(a)细胞壁溶解物质或其盐、(b)抗微生物物质、(c)多价螯合剂和(d)羊毛硫细菌素，其中细胞壁溶解物质或其盐是来自母鸡卵清的GH22胞壁质酶。
[0010]令人惊讶的是，本专利技术的专利技术人发现，胞壁质酶可在饲料中使用以改善单胃动物的褥草质量和/或减少单胃动物的足垫皮炎。随着人们对动物蛋白需求的不断增加，这种改善动物福利的解决方案一直是农户所感兴趣的。

技术实现思路

[0011]因此，本专利技术提供了一种改善单胃动物的褥草质量和/或减少单胃动物的足垫皮炎的方法，该方法包括向该动物施用含有一种或多种微生物胞壁质酶的组合物、动物饲料或动物饲料添加剂。
[0012]序列表概述
[0013]SEQ ID NO:1是如在WO 2013/076253中所述的来自嗜碱枝顶孢菌(Acremonium alcalophilum)的野生型GH25胞壁质酶的具有N末端SPIRR的成熟氨基酸序列。
[0014]SEQ ID NO:2是从囊状长毛盘菌(Trichophaea saccata)中分离的GH24胞壁质酶的基因序列。
[0015]SEQ ID NO:3是从SEQ ID NO:2推导出的氨基酸序列。
[0016]SEQ ID NO:4是来自囊状长毛盘菌的野生型GH24胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
[0017]SEQ ID NO:5是来自原鸡(Gallus gallus)的野生型GH22胞壁质酶(母鸡卵清胞壁质酶)的成熟氨基酸序列。
[0018]SEQ ID NO:6是引物F
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80470。
[0019]SEQ ID NO:7是引物R
‑
80470。
[0020]SEQ ID NO:8是引物8643。
[0021]SEQ ID NO:9是引物8654。
[0022]SEQ ID NO:10是如在WO 2013/076253中所述的来自嗜碱枝顶孢菌的野生型GH25胞壁质酶的成熟氨基酸序列。
[0023]定义
[0024]微生物胞壁质酶：术语“微生物胞壁质酶”是指从或可从微生物源获得的具有胞壁质酶活性的多肽。微生物源的示例是真菌；即胞壁质酶是从或可从真菌界获得，其中术语界是分类级别。具体地，微生物胞壁质酶是从或可从子囊菌门(phylum Ascomycota)，例如盘菌亚门(sub
‑
phylum Pezizomycotina)获得，其中术语门和亚门是分类级别。
[0025]如果多肽的分类级别是未知的，则本领域技术人员可以通过对该多肽执行BLASTP搜索(使用例如国家生物技术信息中心(NCIB)网站http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)并将该多肽与最接近的同源物进行比较来容易地确定该多肽。为已知多肽的片段的未知多肽被认为是同一分类物种。包含在至多10个位置中的取代、缺失和/或插入的未知天然多肽或人工变体被认为与已知多肽来自同一分类物种。
[0026]胞壁质酶活性：术语“胞壁质酶活性”是指对肽聚糖中的N
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乙酰胞壁酸与N
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乙酰
‑
D
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葡糖胺残基之间或壳糊精中的N
‑
乙酰
‑
D
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葡糖胺残基之间的1,4
‑
β
‑
键进行酶促水解，从而导致由于渗透压引起的溶菌作用。胞壁质酶属于酶类别EC 3.2.1.17。通常通过浊度测定来测量胞壁质酶活性。该方法基于由胞壁质酶的溶解作用诱导的藤黄微球菌ATCC 4698悬浮液的浊度变化。在适当的实验条件下，这些变化与培养基中的胞壁质酶的量成比例(参阅联合国粮农组织食品添加剂标准综合纲要INS 1105(www.fao.org))。出于本专利技术的目的，根据实施例5中所述的浊度测定(“胞壁质酶活性测定”)来测定胞壁质酶活性。在一个方面中，本专利技术的多肽具有SEQ ID NO:1的胞壁质酶活性的至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种改善单胃动物的褥草质量和/或减少单胃动物的足垫皮炎的方法，所述方法包括向所述动物施用包含一种或多种微生物胞壁质酶的组合物、动物饲料或动物饲料添加剂。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述单胃动物选自由以下项组成的组：生猪、仔猪、生长猪、母猪、家禽、火鸡、鸭子、鹌鹑、珍珠鸡、鹅、鸽子、乳鸽、雏鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡、猫、狗、马、甲壳类动物、基围虾、对虾、鱼类、青甘鱼、巨滑舌鱼、鲃鱼、鲈鱼、扁鲹、鲮脂鲤科、鳊鱼、大头鱼、大盖巨脂鲤、鲤鱼、鲶鱼、卡特拉魮、虱目鱼、红点鲑、丽鱼科鱼、军曹鱼、鳕鱼、莓鲈、金头鲷、石首鱼、鳗鱼、虾虎鱼、金鱼、丝足鱼、石斑鱼、花身副丽鱼、大比目鱼、爪哇鱼、野鲮属、濑鱼、泥鳅、鲭鱼、遮目鱼、银鲈、泥鱼、鲻鱼、帕克鱼、绿腹丽鱼、银汉鱼、河鲈鱼、梭子鱼、鲳参鱼、斜齿鳊、长丝异鳃鲶、大眼鰤鲈、海鲈鱼、海鲷、闪光鱼、鲈塘鳢、黑鱼、鲷鱼、锯盖鱼、鳎、蓝子鱼、鲟鱼、翻车鱼、香鱼、丁鲷、皇冠鱼、罗非鱼、鳟鱼、金枪鱼、大菱鲆、白鳟鱼、玻璃梭鲈、和白鲑鱼。3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其中所述微生物胞壁质酶是从或者可从子囊菌门(phylum Ascomycota)或盘菌亚门(subphylum Pezizomycotina)获得。4.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其中所述微生物胞壁质酶包含一个或多个选自由GH24和GH25组成的列表的结构域。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述微生物胞壁质酶选自由以下项组成的组：(a)与SEQ ID NO:1具有至少50％，例如至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的多肽；(b)SEQ ID NO:1的变体，其中所述变体具有胞壁质酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中包含一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任何组合；(c)(a)或(b)的所述多肽的具有胞壁质酶活性的片段，其中所述片段包含至少170个氨基酸，例如至少175个氨基酸、至少177个氨基酸、至少180个氨基酸、至少185个氨基酸、至少190个氨基酸、至少195个氨基酸或至少200个氨基酸；(d)与SEQ ID NO:4具有至少50％，例如至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的多肽；(e)SEQ ID NO:4的变体，其中所述变体具有胞壁质酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中包含一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任何组合；和(f)(d)或(e)的所述多肽的具有胞壁质酶活性的片段，其中所述片段包含至少210个氨基酸，例如至少215个氨基酸、至少220个氨基酸、至少225个氨基酸、至少230个氨基酸、至少
235个氨基酸或至少240个氨基酸。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述微生物胞壁质酶选自由以下项组成的组：SEQ ID NO:1的氨基酸1至213、SEQ ID NO:4的氨基酸1至245和SEQ ID NO:10的氨基酸1至208。7.一种改善单胃动物的褥草质量和/或减少单胃动物的足垫皮炎的方法，所述方法包括向所述动物施用包含一种或多种微生物胞壁质酶的组合物、动物饲料或动物饲料添加剂，其中：(a)所述微生物胞壁质酶是包含一个或多个选自由GH24和GH25组成的列表的结构域的微生物胞壁质酶，以300至500mg酶蛋白/kg动物饲料的水平投配；(b)所述单胃动物选自由以下项组成的组：生猪、仔猪、生长猪、母猪、雏鸡、肉鸡、蛋鸡、小母鸡和小鸡；(c)任选地在所述动物的寿命期间每...

【专利技术属性】
技术研发人员：莱蒂西娅，
申请(专利权)人：诺维信专利公司，
类型：发明
国别省市：