一种核酸质谱离子净化方法技术

技术编号:28052196 阅读:53 留言:0更新日期:2021-04-14 13:15
本发明专利技术为一种核酸质谱离子净化方法,通过净化树脂及净化容器将核酸扩增产物中的阳离子净化,所述净化步骤如下:S1:树脂转型,将其他类型的阳离子树脂转型为铵型树脂;S3:离子净化,将净化树脂添加到核酸样本中进行金属阳离子净化,形成净化液;S4:净化检测,将净化液上清进行核酸质谱检测,通过加合物分子量确认净化效果。通过以上步骤得到纯净的无金属盐离子的样本,降低核酸质谱样本中的金属加合物,减少质谱图中加合峰对于样本离子峰的影响。减少质谱图中加合峰对于样本离子峰的影响。减少质谱图中加合峰对于样本离子峰的影响。

【技术实现步骤摘要】
一种核酸质谱离子净化方法


[0001]本专利技术涉及飞行时间质谱仪的应用领域,具体涉及一种核酸质谱离子净化方法。

技术介绍

[0002]飞行时间质谱仪:飞行时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer(TOF)是一种很常用的质谱仪,可以检测1000

50000Da的分子质量,常用于蛋白检测分子量为2000

2000Da或/和核酸检测分子量为1000

10000或4000

10000。这种质谱仪的质量分析器是一个离子漂移管。由离子源产生的离子加速后进入无场漂移管,并以恒定速度飞向离子接收器。离子质量越大,到达接收器所用时间越长,离子质量越小,到达接收器所用时间越短,根据这一原理,可以把不同质量的离子按m/z值大小进行分离。
[0003]进行核酸检测时因为样本处理过程中含有金属阳离子,在进行样本与基质结晶的时候,样本中的金属阳离子与样本被检测形成加合物,原有的样本分子量加上金属阳离子分子量会在样本的质谱峰附近形成一种加合物干扰峰,影本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸质谱离子净化方法,其特征在于,通过净化树脂及净化容器将核酸扩增产物中的阳离子净化,所述净化步骤如下:S1:树脂转型,将其他类型的阳离子树脂转型为铵型树脂;S3:离子净化,将净化树脂添加到核酸样本中进行金属阳离子净化,形成净化液;S4:净化检测,将净化液上清进行核酸质谱检测,通过加合物分子量确认净化效果。2.根据权利要求1所述的一种核酸离子净化方法,其特征在于,所述净化步骤还包括介于步骤S1和S3之间的S2步骤:增加荧光,将转型树脂中添加荧光素形成净化树脂。3.根据权利要求1所述的一种核酸质谱离子净化方法,其特征在于,所述净化树脂选用含有R

SO3

官能团的苯乙烯

二乙烯苯共聚物的阳离子交联树脂进行转型成铵型树脂,优选低交联树脂,交联量为2%~20%,直径为20~1000μm圆形或近似圆形强酸性阳离子树脂。4.根据权利要求1所述的一种核酸质谱离子净化方法,其特征在于,所述铵型树脂转型完成后pH值8

9,优选pH值为9。5.根据权利要求1所述的一种核酸质谱离子净化方法,其特征在于,所述S1树脂转型由其他类型阳离子树脂经过以下步骤预加工制作成H+型树脂或直接选用H+型树脂转型为NH4
+
型树脂:S11:H
+
型树脂制备,取阳离子交联树脂及及该树脂相对选择性2

5倍的1M的HCL将树脂进行混合/和层虑或者洗涤将离子型转化为H
+
离子型树脂或/和取含有H
+
离子型的生物级阳离子交联树脂进行反复层虑或和洗涤至中性;S12:NH4
+
型树脂制备,上述H
+
离子型树脂用体积2~5倍的的3mol/L的氨水浸泡24

48小时或用2

5倍1M的NH4CL浸泡24

48小时,用纯化水洗至中性,即得NH4
+
离子型树脂。6.根据权利要求2所述的一种核酸质谱离子净化方法,其特征在于:所述S2步骤树脂转型的树脂优选添加1pg~1mg/ml荧光素作为荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员:相双红张郁朱成顺
申请(专利权)人:浙江迪谱诊断技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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