水稻苹果酸合酶基因在调控粒型中的应用制造技术

本发明专利技术公开了水稻苹果酸合酶基因在调控粒型中的应用。所述的基因OsIPMS1、OsIPMS2核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示，以及编码相应的蛋白氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。本发明专利技术在水稻中首次报道了OsIPMS1、OsIPMS2基因能调控水稻种子籽粒大小，通过试验表明突变该基因提高种子粒长、粒宽和千粒重。证明本发明专利技术OsIPMS1、OsIPMS2基因调控了水稻种子粒型，利用该基因有助于筛选和培育大粒水稻品种。

【技术实现步骤摘要】
水稻苹果酸合酶基因在调控粒型中的应用
本专利技术公开了两种水稻粒型相关蛋白，属于水稻基因工程领域，涉及两个控制水稻粒型α-异丙基苹果酸合酶基因的分离克隆、功能验证和应用。
技术介绍
水稻(OryzasativaL.)是我国最重要的粮食作物之一。水稻产量是由植株穗数、每穗粒数、粒重三大因素决定，其中粒重是影响产量最重要的因素。粒重主要受籽粒大小影响，包括粒长、粒宽、粒厚，以及灌浆程度。改良籽粒大小是提高水稻产量、品质的最有效途径之一，是当前水稻遗传育种改良的重要目标。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供两种水稻粒型相关蛋白基因的分离克隆、功能验证和应用。本专利技术的目的可通过如下技术方案实现：本专利技术的两个来自水稻α-异丙基苹果酸合酶基因OsIPMS1、OsIPMS2，其核苷酸序列如序列表SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示。本专利技术所述的水稻α-异丙基苹果酸合酶基因OsIPMS1、OsIPMS2编码的蛋白，其氨基酸序列SEQIDNO.3、SEQIDNO.4所示。本专利技术所述的水稻本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.两个来自水稻α-异丙基苹果酸合酶基因OsIPMS1和OsIPMS2，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.两个来自水稻α-异丙基苹果酸合酶基因OsIPMS1和OsIPMS2，其核苷酸序列如序列表SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示。


2.权利要求1所述的水稻α-异丙基苹果酸合酶基因OsIPMS1和OsIPMS2编码的蛋白，其氨基酸序列SEQIDNO.3、SEQIDNO.4所示。


3.权利要求1所述的水稻OsIPMS1和OsIPMS2基因或权利要求2中所述的OsIPMS1和OsIPMS2蛋白在筛选或培育大粒水稻品种中的应用。


4.根据权利要求3所述的基因水稻突变体获得和基因功能验证，其特征在于包括如下步骤：
(1)获得水稻OsIPMS1和OsIPMS2基因的核苷酸序列及氨基酸序列；
(2)用PCR获得OsIPMS1和OsIPMS2基因的目标片段，将基因的目标片段构建到CH载体中；
(3)将步骤(2)得到的带有OsIPMS1和OsIPMS2基因的目标片段的CH载体构建到pCAMBIA1300载体上，获得p1300-CH-Target载体；
(4)将步骤(3)得到的带有OsIPMS1和OsIPMS2基因目标片段的质粒转化农杆菌；将带有转化质粒的农杆菌转化水稻；
(5)水稻突变体筛选与鉴定，并鉴定种子粒型。


5.根据权利要求4所述的基因突变体获得方法，其特征在于：利用从水稻cDNA为模板PCR克隆出该基因的引物序列，所述上游引物序列如序列表SEQIDNO.5所示，所述下游引物序列如序列表SEQIDNO.6所示。
进一步的，在步骤(2)中将OsIPMS1和OsIPMS2基因中20bp的目标片段与CH载体相连，获得CH-Target重组载体。
在步骤(3)中，用EcoRIHF和HindIII分别酶切pCAMBIA1300和CH-target载体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：何永奇，王州飞，赵佳，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44