人类白细胞抗原一步测序分型方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种针对HLA的模棱两可分型引物组，以及包含其的HLA测序分型的特异性引物组合物，以及相应的HLA基因分型方法。本发明专利技术通过增加模棱两可分型引物组，将普通HLA测序分型方法因模棱两可型别需要复查的比例从10‑15％有效的控制到了0.1％以下，节省了宝贵的医疗时间、人力成本和试剂成本。

【技术实现步骤摘要】
人类白细胞抗原一步测序分型方法及其应用
本专利技术具体涉及人类白细胞抗原一步测序分型方法及其应用。
技术介绍
人类白细胞抗原(Humanleukocyteantigen,HLA)的编码基因位于第6号染色体短臂上，是构成移植排斥反应的重要抗原物质，在进行骨髓和器官移植时，供受者之间HLA相容程度越高，排斥反应的发生率越低，移植成功率和移植器官长期存活率越高；反之，则容易发生排斥反应。器官移植成功与否的关键在于控制移植物排斥反应，目前主要通过移植前检测供者和受者的HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DQB1、HLA-DRB1位点匹配情况预测可能的移植排斥反应。随着生命科学的发展，HLA基因在疾病辅助诊断，临床用药，免疫治疗和法医鉴定等领域显示了越来越重要的价值。过去HLA分型鉴定都是以血清学的方式进行，但该方法影响因素较多，会导致假阴性和假阳性结果，使准确性较低，而且获得的是低分结果。为了保证HLA分型结果的准确性和扩展临床应用，能够进行高分辨率分型的HLA核酸分型检测试剂盒(PCR-SBT)应运而生。设计与HLA基因相结合的特异性扩增引物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.针对HLA的模棱两可分型引物组，其特征在于：由序列66-序列78的单链DNA组成。/n

【技术特征摘要】
1.针对HLA的模棱两可分型引物组，其特征在于：由序列66-序列78的单链DNA组成。


2.HLA测序分型的特异性引物组合物，其特征在于：由权利要求1所述的针对HLA的模棱两可分型引物组、测序引物组、扩增引物组组成；所述测序引物组由序列表序列40-序列65的单链DNA组成；所述扩增引物组由序列表序列1-序列39的单链DNA组成。


3.一种HLA测序分型系统，其特征在于：由X1和X2组成；所述X1为权利要求2所述的HLA测序分型的特异性引物组合物，所述X2为X2.1和/或X2.2:
X2.1、进行PCR扩增所需的试剂和/或仪器；
X2.2、进行PCR测序所需的试剂和/或仪器。


4.成套试剂，由权利要求2所述的HLA测序分型的特异性引物组合物与权利要求3所述进行PCR扩增所需的试剂和/或权利要求3所述进行PCR测序所需的试剂组成。


5.一种非诊断目的的HLA基因分型方法，其特征在于：包括以权利要求2所述的扩增引物组扩增样本DNA后，以权利要求2所述的测序引物组和权利要求2所述的HLA的模棱两可分型引物组测序，根据测序结果分型。


6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1、以所述扩增引物组扩增样本DNA:
S1.1、以序列1、序列2扩增样本DNA的HLA-A基因；
S1.2、以序列3、序列4扩增样本DNA的HLA-B基因；
S1.3、以序列5、序列6扩增样本DNA的HLA-C基因；
S1.4、以序列7、序列8、序列9、序列10、序列11、序列12、序列13、序列14扩增样本DNA的HLA-DQB1基因的第二外显子；
S1.5、以序列15、序列16、序列17扩增样本DNA的HLA-DQB1基因的第三外显子；
S1.6、以序列18、序列19、序列20、序列21、序列22、序列23、序列2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志富，郭同垒，刘常峥，赵敏，方圆，刘明坤，叶锋，
申请(专利权)人：北京思尔成生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11