一种抑菌组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑菌组合物及其应用，属于抑菌剂技术领域。本发明专利技术首先提供了一种抑菌防腐组合物，将虫草素与常用防腐剂进行物理混合，组合物中虫草素质量浓度为2‑2000μg/mL，山梨酸钾质量浓度为2‑8000μg/mL，苯甲酸钠质量浓度为2‑8000μg/mL，对羟基苯甲酸酯类质量浓度为2‑4000μg/mL。本发明专利技术还提供了其在抗真菌生物膜中的应用。本发明专利技术能够有效抑制真菌生长，并对生物膜形成而导致的耐药性有所降低。同时，也降低了传统防腐剂的用量。

【技术实现步骤摘要】
一种抑菌组合物及其应用
本专利技术涉及一种抑菌组合物及其应用，属于抑菌剂

技术介绍
食品防腐剂是现代食品加工生产中用于提升食品品质、延长食品保质期的重要方式。按照来历差别，防腐剂可以划分成天然有机或者是化学合成防腐剂。但是长期食用人工合成防腐剂对人体带来的潜在风险不容忽视，随着食品安全意识的提高，人们对绿色、健康食品的追求越来越高。因此，需要天然防腐剂或减少合成防腐剂的用量以保证对人具有高度安全性的抗微生物剂用于防止食品腐败变质。生物膜是指被物体表面吸附的微生物群落通过分泌胞外基质将其嵌入其中的模式，其中，胞外基质有助于保持生物膜结构并维持细胞-细胞，细胞-表面和细胞-环境之间相互作用的稳定，生物膜的形成可能影响某些菌株的耐药性从而导致食源性疾病等，为医疗和食品安全等领域带来很大风险。有研究表明，真菌生物膜的耐药性是游离菌的1000倍。例如，念珠菌形成的生物膜能对抗宿主的防御，并且对临床常用抗真菌药物的敏感性降低。而且，这些药物会伴随着一些呕吐、腹泻、腹痛和食欲不振等问题，并且也会对肝脏、肾脏造成较强的毒性作用。因此，急需可有效针对生物膜形成的方法策略以降低生物膜危害。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种有效的抗真菌的虫草素与常见食品防腐剂的组合物，该组合物为虫草素与防腐剂物理混合，同时能显著破坏生物膜形成能力。本专利技术的第一个目的是提供一种抑菌组合物，所述组合物包含虫草素和食品防腐剂，所述食品防腐剂选自山梨酸及其钾盐、苯甲酸及其钠盐和对羟基苯甲酸酯类中的一种或多种。在本专利技术的一种实施方式中，所述组合物中虫草素质量浓度为2-2000μg/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述组合物中山梨酸钾及其钾盐质量浓度为2-8000μg/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述组合物中苯甲酸钠及其钠盐质量浓度为2-8000μg/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述组合物中对羟基苯甲酸酯类质量浓度为2-4000μg/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述抑菌主要针对条件性致病真菌，包括念珠菌和/或曲霉菌。在本专利技术的一种实施方式中，所述抑菌组合物的剂型可为多种剂型，包括液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。本专利技术的第二个目的是提供一种上述抑菌组合物在抗真菌生物膜、防治果蔬病害、化妆品、饲料中的应用。本专利技术的第三个目的是提供一种抑制真菌生物膜的方法，所述方法是以上述抑菌组合物处理真菌生物膜，以抑制真菌生物膜的活性。本专利技术的第四个目的是提供一种防治果蔬病害的方法，所述方法是在植物种子萌发时期，向果蔬喷洒上述抑菌组合物，以促进植物生长。本专利技术的第五个目的是提供一种化妆品，所述化妆品含有上述抑菌组合物，以达到护理皮肤、维持化妆品质地的效果。本专利技术的第六个目的是提供一种饲料，所述饲料含有上述抑菌组合物，避免饲料的腐败变质。本专利技术的有益效果：本专利技术的虫草素与常见防腐剂的组合物对真菌的具有较强的抗菌活性，当达到相同效果时，与单独作用相比，其虫草素使用量下降了5-20倍，传统防腐剂使用量下降了2.5-20倍。同时，组合物也对真菌生物膜具有显著的抑制作用，其抗生物膜活性远远大于单独使用时，如使用6.25μg/mL虫草素和1000μg/mL山梨酸钾的组合物处理的生物膜活性仅有45.50％，而当单独作用时，生物膜活性分别为87.22％和78.27％。因此，本专利技术不仅仅能够降低传统防腐剂的使用量，而且还能有效抑制生物膜的形成，降低真菌的耐药性。附图说明图1为实施例1中抑菌组合物对白色念珠菌抗生物膜作用效果。图2为实施例2中抑菌组合物对黑曲霉菌抗生物膜作用效果。图3为实施例3中抑菌组合物对白色念珠菌抗生物膜作用效果。图4为实施例4中抑菌组合物对黑曲霉菌抗生物膜作用效果。图5为实施例5中抑菌组合物对白色念珠菌抗生物膜作用效果。图6为实施例6中抑菌组合物对黑曲霉菌抗生物膜作用效果。具体实施方式以下对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本专利技术，不用于限制本专利技术。1、生物材料：念珠菌生物膜培养：所用的白色念珠菌(白假丝酵母，Candidaalbicans)来自北纳创联生物技术公司，编号为BNCC186382。白色念珠菌在PDB液体培养基中活化后，使用RPMI-1640培养基进行稀释，取100μL的菌液(1×106cells)加入到96孔板中35℃静态培养24h形成成熟生物膜。黑曲霉菌生物膜的培养：黑曲霉菌(AspergillusnigervanTieghem)来自广东微生物研究所保藏中心，GIM编号为3.422。黑曲霉在固体SDA培养基上35℃培养48h并收集孢子，用RPMI-1640培养基重悬孢子，调节孢子液浓度为1×106孢子/mL。将100μL孢子悬液接种于96孔板中35℃静态培养24h以形成成熟生物膜。2、最小抑菌浓度(MIC)测定：根据临床和实验室标准协会(CLSI)标准，采用标准肉汤稀释法对用于本研究的虫草素、山梨酸钾以及虫草素与山梨酸钾混合物等对其MIC进行分析。3、生物膜活性测试：在培养前分别加入不同比例的虫草素与一种或多种防腐剂组合物，以未加混合物处理的为对照组，并采用XTT法检测生物膜活性。4、协同作用评价方法：以FICI法测定联合用药效果，即利用LA理论评价药物联合应用的相互作用。表述如下：∑FIC＝FICA+FICB＝CA/MICA+CB/MICB，MICA和MICB分别是A、B单用药时最小抑菌浓度，CA和CB分别是两药联合用药时达到等效位点的浓度。FICI>4时为拮抗作用，FICI在0.5与4之间为相加或无关作用，FICI≤0.5为协同作用。其中，根据临床和实验室标准协会(CLSI)标准，采用标准肉汤稀释法对用于本研究的虫草素、山梨酸钾以及虫草素与山梨酸钾混合物等对其MIC进行分析。实施例1：一种抑菌组合物一种抑菌组合物，所述组合物包含6.25μg/mL虫草素和1000μg/mL山梨酸钾。实施例2：一种抑菌组合物一种抑菌组合物，所述组合物包含12.5μg/mL虫草素和375μg/mL山梨酸钾。以单独虫草素和单独山梨酸钾作为对照组，将虫草素和山梨酸钾单独加入到含有真菌及新鲜培养基的96孔板中，培养24h，观察真菌的生长情况，其MIC结果见表1。虫草素与山梨酸钾复配后对真菌抗真菌活性具有协同作用，而且虫草素与山梨酸钾使用量减少明显。以单独虫草素和山梨酸钾作为对照组，检测其对白色念珠菌和黑曲霉菌生物膜作用，结果见表2和图1、2。从表2和图1、2中看出，虫草素与山梨酸钾组合物对生物膜的形成有抑制作用；且与虫草素或者山梨酸钾单独使用相比，组合物的抑制作用增强非常明显。表1虫草素与山梨酸钾对念珠菌、曲霉菌的联合作用表2虫草素与山梨酸钾对生物膜活性的影响<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑菌组合物，其特征在于，所述组合物包含虫草素和食品防腐剂，所述食品防腐剂选自山梨酸及其钾盐、苯甲酸及其钠盐和对羟基苯甲酸酯类中的一种或多种。/n

【技术特征摘要】
1.一种抑菌组合物，其特征在于，所述组合物包含虫草素和食品防腐剂，所述食品防腐剂选自山梨酸及其钾盐、苯甲酸及其钠盐和对羟基苯甲酸酯类中的一种或多种。


2.根据权利要求1所述的抑菌组合物，其特征在于，所述组合物中虫草素质量浓度为2-2000μg/mL；和/或，山梨酸钾及其钾盐质量浓度为2-8000μg/mL；和/或，苯甲酸钠及其钠盐质量浓度为2-8000μg/mL；和/或，对羟基苯甲酸酯类质量浓度为2-4000μg/mL。


3.根据权利要求1或2所述的抑菌组合物，其特征在于，所述抑菌主要针对条件性致病真菌，包括念珠菌和/或曲霉菌。


4.根据权利要求1-3任一项所述的抑菌组合物，其特征在于，所述抑菌组合物的剂型可为多种剂型，包括液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄在祥，王雨，王洪新，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32