一种蔗糖磷酸化酶的工程改造及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种蔗糖磷酸化酶的工程改造及应用，属于酶工程改造领域。本发明专利技术通过饱和诱变，建立了突变体文库。经单点和复合突变，鉴定出L341V/V346P为阳性突变体。该突变体用于抗坏血酸葡萄糖苷的合成时，产量及转化率都显示出了明显的提升，为工业生产提高抗坏血酸葡萄糖苷转化率和大规模应用奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种蔗糖磷酸化酶的工程改造及应用，属于酶工程改造领域。

技术介绍

1、抗坏血酸(l-aa)作为生活中常见的维生素c为大家所熟知，我们主要通过从外界蔬菜水果、补剂中摄入来补充这种维生素。l-aa作为人体健康所必需的重要营养元素，具有抗氧化、保护神经、提高免疫力、美白等功效。但由于l-aa在氧气、光、热、水分、金属离子等条件下极其不稳定，且l-aa的过度吸收会导致细胞毒性，也导致我们想要长期、稳定地应用l-aa受到了极大限制。为了找寻兼具l-aa性能且稳定的替代物质，人们做出了很多尝试，抗坏血酸葡萄糖苷(aa-2g)正是在这时走入人们的视野。作为l-aa的糖苷化合物，aa-2g也是aa的稳定前药。相较于其他l-aa衍生物，aa-2g具有绝佳的稳定性和可溶解性。合成aa-2g主要通过化学合成和生物转化。早年间人们把合成aa-2g的重心放在化学合成上。化学合成虽省时快速，但由于其步骤繁琐和不可持续性，在近几年已逐渐被生物酶法合成法所取代。酶法合成aa-2g胜在反应条件温和、底物价廉易得，相较于传统的化学方法，酶催化具有更突出的特异性和更高的产率。蔗糖本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列为出发序列，对出发序列进行了如下(a)-(c)任一所示的突变：

2.根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列为出发序列，对出发序列进行了如下(d)-(g)任一所示的突变：

3.根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列为出发序列，将出发序列第341位亮氨酸突变为缬氨酸，并且对出发序列进行了如下(h)或(i)所示的突变：

4.编码权利要求1-3任一所...

【技术特征摘要】

1.一种蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以seq id no.1所示的氨基酸序列为出发序列，对出发序列进行了如下(a)-(c)任一所示的突变：

2.根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以seq idno.1所示的氨基酸序列为出发序列，对出发序列进行了如下(d)-(g)任一所示的突变：

3.根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶以seq idno.1所示的氨基酸序列为出发序列，将出发序列第341位亮氨酸突变为缬氨酸，并且对出发序列进行了如下(h)或(i)所示的突变：

4.编码权利要求1-3任一所述蔗糖磷酸化酶的多核苷酸。

5.携带权利要求4所述多核苷酸的载体。

6.表达权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈献忠，沈雨娟，夏媛媛，杨海泉，沈微，曹钰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：