通过尿液生物标志物的方式体外诊断前列腺癌的方法技术

本发明专利技术涉及通过尿液生物标志物的方式体外/离体诊断前列腺癌和/或其侵袭性的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过尿液生物标志物的方式体外诊断前列腺癌的方法相关申请交叉引用本专利申请要求于2018年7月17日提交的、申请号为102018000007264的意大利专利申请的优先权，其全部公开内容通过引用并入本文。
本专利技术涉及通过尿液生物标志物的方式体外/离体诊断前列腺癌和/或其侵袭性的方法。
技术介绍
前列腺癌(Prostatecancer,PCa)是全世界男性最常见的病症和癌症相关死亡的第二大原因。当前，前列腺癌的诊断仅在对通过活检获取的各种前列腺组织样本上的肿瘤进行组织学评估之后才做出。在评估前列腺特异性抗原(prostatespecificantigen,PSA)的循环水平以及直肠指检(digitalrectalexamination,DRE)后，进行前列腺活检。PSA和DRE是初步检查，目的是识别最有可能患有前列腺肿瘤的患者。在存在异常的情况下，进行前列腺穿刺活检以确认或否定临床证据。但是，这些测试的准确性有限，导致大量的过度诊断，进而导致过度治疗。实际上，平均而言，每四名由于可疑PSA水平而进行前列腺穿刺活检的男性中，只有一个人在进行活检后受到前列腺癌的影响。此外，许多被诊断出的前列腺癌病程很慢，并且可能患者整个一生都不会显示出症状。由于无法将过度诊断的肿瘤与其他肿瘤区分开，因此为大多数对筛查呈阳性的患者提供手术治疗，其通常伴有对生活质量有重大影响的不良反应(例如勃起功能障碍、尿失禁、感染)。除了给患者带来不便外，还应考虑如此高比例的不必要测试对卫生系统资源的经济影响。评估是否对资源进行了充分利用(物有所值)的其中一种方法是表达与经济方面有关的临床益处。PSA筛查的现有两项经济研究一致认为该操作不具成本效益。简而言之，这意味着，一旦进行了PSA测试(由于活检、治疗、可能的损坏)，整个人群的从经济角度定量的与所实施流程相关的成本超过了收益。鉴于上述情况，很明显，迫切需要识别用于诊断前列腺癌的特定生物标志物，以查明处于患前列腺癌危险中的男性并预测肿瘤的自然进展。最近的一些研究表明，男性不育可能是患侵袭性前列腺癌的风险信号。特别是，已经发现诊断为不育的患者发生侵袭性前列腺肿瘤的可能性是可育男性人群的三倍(WalshTJ等人,Cancer.2010May1；116(9):2140-7)。前列腺是主要功能为产生精液的腺体，精液含有对精子的存活、运动和质量至关重要的元素。已经发现，慢性炎症疾病会导致射精液体部分的物理-化学特性发生变化(粘度和流化的改变、pH值的改变、白色液滴(whiteglobule)的存在、PSA、PAP、锌、果糖和柠檬酸水平的改变)而影响生育能力。在肿瘤转化过程中，细胞可能发生深刻的表型和功能变化。由于大多数前列腺肿瘤被归类为腺癌，即涉及腺体部分的肿瘤，因此前列腺内的恶性转化可能会损害腺体的分泌功能，包括前列腺分泌物的组成，这是合理的。从一些研究中已经发现，晚期前列腺肿瘤可能会失去PSA的表达(AiharaM等人,JUrol.1994；151:1558-1564；WeirEG等人,JUrol.2000；163:1739-1742；AugustinH等人,JCancerResClinOncol.2003；129:662-668)。使用组织微阵列技术进行的更详细的研究已经证实，组织中PSA的表达既可以用作前列腺癌的诊断参数，也可以用作预后参数(ErbersdoblerA等人,Urology.2009Nov；74(5):1169-73)。由于尿路与前列腺紧密接触，因此前列腺组织产生的因子可以转移并因此在尿液中检测到，尿液代表了用于前列腺癌的诊断和预后的生物标志物。在此基础上，尿液PSA的测量应提供有关前列腺生理和病理状况的有用信息，因为PSA是围绕前列腺腺泡和前列腺小管的上皮细胞的正常产物(IraniJ等人,EurUrol1996；29:407-12)。EP2515115描述了使用尿液PSA作为前列腺肿瘤标志物。然而，在EP2515115中，在收集尿液之前不进行前列腺按摩不能获得一致的前列腺分泌物。对于健康受试者，识别的平均值约为50ng/ml，对于受肿瘤影响的受试者，平均值约为5ng/ml。在2007年发表的一篇论文中，观察到前列腺肿瘤患者、器官良性增生患者和健康受试者的尿液PSA和血浆PSA之间的比例不同(BolducS等人,CanUrolAssocJ.2007Nov；1(4):377-81)。最近，已经发现循环的PSA以游离形式和与蛋白酶抑制剂家族的不同分子复合的形式存在。PSA常常与α-1-抗胰凝乳蛋白酶(alpha1-antichymotripsin,ACT)复合，并且据观察，前列腺肿瘤患者与ACT结合的PSA百分比要高于健康捐赠者，而健康捐赠者的游离PSA百分比更高(ChristenssonA等人,JUrol.1993；150:100–5)。各种研究表明，与良性增生相比，前列腺肿瘤中ACT作为mRNA和蛋白在组织水平上的表达更高，证明了复合PSA的含量更高(ZhuL等人,Prostate.2013Jan；73(2):219-26)。WO0002052描述了使用复合的和游离的、切割的和未切割的PSA作为血浆/血清中的生物标志物，以区分健康受试者和患有前列腺癌的受试者。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种通过尿液中存在的新生物标志物的方式体外/离体诊断前列腺癌的方法，该方法可快速、廉价地提供可靠和准确的结果。根据本专利技术，所述目的通过根据权利要求1和4的方法来实现。根据本专利技术，还提供了一种用于上述方法的试剂盒。附图说明为了更好地理解本专利技术，现在还参考附图进行描述，这些附图说明了以下内容：-图1示出了受前列腺癌影响的个体和健康个体中尿液生物标志物锌(Zn)、总PSA(utPSA)、游离PSA(ufPSA)、精胺、精胺氧化酶(spermineoxidase,SMOX)的绝对值图；-图2示出了在受前列腺癌影响的个体和健康个体中，相对于肌酸酐归一化的尿液生物标志物Zn、utPSA、ufPSA、精胺(Spm)、精胺氧化酶(SMOX)的值的图；-图3示出了Zn、精胺(Spm)、utPSA，ufPSA、精胺氧化酶(SMOX)的接受者操作特征(receiveroperatingcharacteristic,ROC)曲线；-图4a示出了Zn-Spm、Zn-utPSA、Zn-ufPSA、ufPSA-Spm、utPSA-ufPSA、utPSA-Spm组合的ROC曲线；-图4b示出了Zn-Spm-utPSA、Zn-Spm-ufPSA、Zn-utPSA-ufPSA、Spm-utPSA-ufPSA、Spm-utPSA-ufPSA-Zn组合的ROC曲线；-图4c示出了Zn-Spm-SMOX、Zn-utPSA-SMOX、Zn-ufPSA-SMOX、ufPSA-Spm-SMOX、utPSA-Spm-SMOX、Zn-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于体外/离体诊断个体中的前列腺癌和/或其侵袭性的方法，包括以下步骤：/na)提供所述个体的尿液样本；/nb)对所述尿液样本中的锌进行定量；/nc)将锌的定量值与参考值进行比较。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180717 IT 1020180000072641.一种用于体外/离体诊断个体中的前列腺癌和/或其侵袭性的方法，包括以下步骤：
a)提供所述个体的尿液样本；
b)对所述尿液样本中的锌进行定量；
c)将锌的定量值与参考值进行比较。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤b)中对总PSA(前列腺特异性抗原)(utPSA)和/或游离PSA(前列腺特异性抗原)(ufPSA)进行定量，并且在步骤c)中将总PSA(utPSA)的定量值与参考值进行比较，和/或将游离PSA(ufPSA)的定量值与参考值进行比较。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在步骤b)中还对精胺进行定量，并且在步骤c)中将精胺的定量值与参考值进行比较。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中在步骤b)中还对精胺氧化酶(SMOX)进行定量，并且在步骤c)中将精胺氧化酶的定量值与参考值进行比较。


5.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤b)中对总PSA(前列腺特异性抗原)(utPSA)、锌和精胺氧化酶(SMOX)进行定量，并且在步骤c)中将总PSA(前列腺特异性抗原)、锌和精胺氧化酶(SMOX)的定量值与参考值进行比较。


6.一种用于体外/离体诊断个体中的前列腺癌和/或其侵袭性的方法，包括以下步骤：
a’)提供所述个体的尿液样本；
b’)对所述尿液样本中的锌进行定量；
c’)在所述尿液样本中对分子式为C4H7N3O(肌酸酐)的分子进行定量；
d’)用分子式为C4H7N3O(肌酸酐)的分子的定量值归一化锌的定量值；
e’)将锌的归一化值与参考值进行比较。


7.根据权利要求6所述的方法，其中，在步骤b’)中对总PSA(前列腺特异性抗原)(utPSA)和/或游离PSA(前列腺特异性抗原)(ufPSA)进行定量，在步骤d’)中用分子式为C4H7N3O(肌酸酐)的分子的定量值归一化总PSA(utPSA)的定量值和/或用分子式为C4H7...

【专利技术属性】
技术研发人员：塞尔吉奥·欧其宾迪，
申请(专利权)人：NIB生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT