一种稳定的NSE质控品及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种稳定的NSE质控品及其制备方法。本发明专利技术提供的NSE质控品由NSE抗原、蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂、镁离子和人血清制得。其能有效的减弱肿瘤标志物NSE在基质液中的下降速度，且产品均一性、储存长期稳定性及复溶后稳定性良好，不受运输、温度等因素影响，复溶后检测过程稳定时间较长，具备检测重复性、准确性高，可适用于不同仪器型号、不同试剂定量检测，不同地域、不同实验室操作人员检测，可适用于不同品牌的定量检测试剂盒，该肿瘤标志物NSE质控品能满足临床对肿瘤标志物NSE的质量控制要求，可以更准确的检测临床样本检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种稳定的NSE质控品及其制备方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种稳定的NSE质控品及其制备方法。
技术介绍
糖分解烯醇酶(2-phospho-D-glyceratehydrolase.EC4.2.4.11，分子量约为80kDa)有多种二聚异构体，由三种亚单位α、β和γ组成。烯醇酶α亚单位见于哺乳动物多种类型组织中，而β亚单位则主要见于心脏和肌肉组织。αγ和γγ酶异构体称为神经元特异烯醇化酶(NSE)或γ－酶，高浓度存在于神经细胞和神经内分泌细胞以及这些细胞所引发的肿瘤细胞中。血清NSE可作为神经内分泌肿瘤的特异性标志，如神经母细胞瘤、甲状腺髓质癌和小细胞肺癌(70％升高)，可用于鉴别诊断、病情监测、疗效评价和复发预报。现有的专利技术中，NSE质控品并非100％人血清，与临床样本存在基质效应；并且复溶稳定性较差。并且受到温度、长途运输等方面的影响，在存储过程中，NSE水平下降明显。给检测造成不便。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种稳定的NSE质控品及其制备方法，该质控品具有良好的均一性，耐长期存储。本专利技术提供的NSE质控品，由NSE抗原、蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂、镁离子和人血清制得，其中：所述蛋白保护剂选自ADP、HPD、HP中至少一种；所述防腐剂选自Proclin300、叠氮化钠、硫柳汞中至少一种；所述抗生素选自硫酸庆大霉素、妥布霉素中至少一种；所述冻干保护剂选自海藻糖、蔗糖、乳糖中至少一种；所述镁离子来自氯化镁、六水氯化镁中至少一种。本专利技术在质控品中，添加蛋白保护剂、防腐剂、抗生素和冻干保护剂，并添加一定量的镁离子，不论是在液态条件下，还是在冻干后，都能更有效提高NSE质控品的稳定性。而添加其他金属离子无法实现这样的效果。本专利技术实施例中，所述NSE质控品由NSE抗原、ADP、Proclin300、硫酸庆大霉素、海藻糖、氯化镁和人血清制得。实验表明，质控品中的添加物在一定的浓度下更够取得更好的稳定效果。一些实施例中，所述NSE质控品中各组分占人血清的质量分数为：一些具体实施例中，所述NSE质控品中各组分占人血清的质量分数为：质控品中，NSE根据需要进行选择。通常，所述的NSE质控品中，所述NSE抗原在人血清中的浓度为0～120ng/mL；一些实施例中，所述NSE质控品中，NSE的浓度分为三个水平，分别为10-30ng/mL、50-80ng/mL、90-120ng/mL。在本专利技术中，所述人血清为健康人的血清。本专利技术使用100％人血清作为NSE质控品的基质液，有效的降低了与临床样本的基质效应，与临床表现更一致。在所述NSE质控品的原料中，所述人血清皆指液态的人血清，其分离自人类的外周血。质控品中各种添加物(例如ADP、海藻糖、氯化镁等)的质量分数皆指相对于液态人血清的质量分数。冻干后粉末中各添加物的质量分数与冻干程度相关，本专利技术中所述质量分数不以冻干粉末中各原料的质量分数计算。本专利技术所述NSE质控品的制备方法包括：在人血清中加入蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂，溶解后加入NSE抗原和镁离子，然后经冻干制得所述NSE质控品。本专利技术实施例中，所述冻干的程序包括：降温过程5min温度降至-5℃，保持45min；降温过程5min温度降至-45℃，保持120min；升温过程50min温度升至-5℃，保持750min，真空度10～14Pa；升温过程50min温度升至10℃，保持60min；升温过程50min温度升至25℃，保持180min，真空度13～17Pa。本专利技术中，所述冻干后NSE质控品于2～8℃保存。本专利技术还提供了一种NSE单项质控品试剂盒，其含有本专利技术所述NSE质控品，或所述方法制得的NSE质控品。本专利技术提供的NSE质控品由NSE抗原、蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂、镁离子和人血清制得。其能有效的减弱肿瘤标志物NSE在基质液中的下降速度，且产品均一性、储存长期稳定性及复溶后稳定性良好，不受运输、温度等因素影响，复溶后检测过程稳定时间较长，具备检测重复性、准确性高，可适用于不同仪器型号、不同试剂定量检测，不同地域、不同实验室操作人员检测，可适用于不同品牌的定量检测试剂盒，该肿瘤标志物NSE质控品能满足临床对肿瘤标志物NSE的质量控制要求，可以更准确的检测临床样本检测结果的准确性。具体实施方式本专利技术提供了一种稳定的NSE质控品及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。其中，人血清采购自Scantibodies厂家。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：实施例1与其他离子相比，镁离子对NSE液态稳定性的影响在健康人的血清中，加入ADP至质量分数为0.3％，加入Proclin300至质量分数为0.2％，加入硫酸庆大霉素至质量分数为0.1％，加入海藻糖至质量分数为3％，充分搅拌混匀，直至基质液澄清，放置于2～8℃，加入NSE抗原(来自郑州伊美诺生物技术有限公司)，根据加入NSE抗原的量，将溶液分为三个水平，其中NSE抗原的浓度分别为20ng/mL、60ng/mL、120ng/mL。每个水平含有抗原的溶液都分为四组，共计12组，分别加入钠离子(至质量分数为0.2％)、镁离子(至质量分数为0.2％)、铁离子(至质量分数为0.2％)和铜离子(至质量分数为0.2％)，配制成12种NSE质控品。每种质控品设2个重复，液态4℃保存1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d，连续监测浓度值变化，具体监测数据如表1。表1：由表1数据可看出，添加镁离子后NSE液态稳定性显著优于添加钠离子、铁离子或铜离子的NSE质控品。实施例2验证镁离子对于NES质控品(液态)稳定性的影响。在健康人的血清中，加入ADP至质量分数为0.3％，加入Proclin300至质量分数为0.2％，加入硫酸庆大霉素至质量分数为0.1％，加入海藻糖至质量分数为3％，充分搅拌混匀，直至基质液澄清，放置于2～8℃，加入NSE抗原(来自郑州伊美诺生物技术有限公司)，根据加入NSE抗原的量，将溶液分为三个水平，其中NSE抗原的浓度分别为20ng/mL、55ng/mL、100ng/mL。每个水平含有抗原的溶液都分为2组(加镁离子或不加)，共计6组，配制成12种NSE质控品。每种质控品设2个重复，液态4℃保存1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d，连续监测浓度值变化，具体监测数据如表2。表本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种NSE质控品，其由NSE抗原、蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂、镁离子和人血清制得，其中：/n所述蛋白保护剂选自ADP、HPD、HP中至少一种；/n所述防腐剂选自Proclin300、叠氮化钠、硫柳汞中至少一种；/n所述抗生素选自硫酸庆大霉素、妥布霉素中至少一种；/n所述冻干保护剂选自海藻糖、蔗糖、乳糖中至少一种；/n所述镁离子来自氯化镁、六水氯化镁中至少一种。/n

【技术特征摘要】
1.一种NSE质控品，其由NSE抗原、蛋白保护剂、防腐剂、抗生素、冻干保护剂、镁离子和人血清制得，其中：
所述蛋白保护剂选自ADP、HPD、HP中至少一种；
所述防腐剂选自Proclin300、叠氮化钠、硫柳汞中至少一种；
所述抗生素选自硫酸庆大霉素、妥布霉素中至少一种；
所述冻干保护剂选自海藻糖、蔗糖、乳糖中至少一种；
所述镁离子来自氯化镁、六水氯化镁中至少一种。


2.根据权利要求1所述的NSE质控品，其特征在于，其由NSE抗原、ADP、Proclin300、硫酸庆大霉素、海藻糖、氯化镁和人血清制得。


3.根据权利要求1所述的NSE质控品，其特征在于，其中各组分占人血清的质量分数为：





4.根据权利要求4所述的NSE质控品，其特征在于，其中各组分占人血清的质量分数为：





5.根据权利要求1～4任一项所述的NSE质控品，其特征在于，
所述NSE抗原在人血清中的浓度为0～120ng/mL；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亚洲，张亚彤，赵晓转，杨建乐，王新明，刘功成，
申请(专利权)人：郑州标源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41