CLU和PRKD3及其下调或抑制剂在三阴性乳腺癌检测分型和治疗及疗效评估中的应用制造技术

本发明专利技术公开了CLU和PRKD3及其下调或抑制剂在三阴性乳腺癌检测分型和治疗及疗效评估中的应用。本发明专利技术提出CLU和/或PRKD3作为TNBC诊断、分型和预后疗效评价的分子标志物，作为TNBC治疗性药物靶点，同时CLU和/或PRKD3的下调剂或抑制剂在制备治疗TNBC的药物，还提出诊断TNBC及其分型和预后疗效评价的组织学和血清学分子标志物组合以及治疗TNBC的药物组合；本发明专利技术首次发现CLU和PRKD3作为TNBC诊断、分型和预后疗效评价分子标志物和治疗药物靶点，CLU沉默剂和PRKDs抑制剂可分别抑制CLU表达和PRKD3的活性，对TNBC肿瘤生长抑制效果显著。

【技术实现步骤摘要】
CLU和PRKD3及其下调或抑制剂在三阴性乳腺癌检测分型和治疗及疗效评估中的应用
本专利技术属于乳腺癌检测、分型、诊断、预后疗效评价和治疗研究领域，具体涉及CLU和PRKD3作为分子标记物和药物靶点在三阴性(TNBC)检测和治疗中的作用，以及CLU和/或PRKD3的下调剂或抑制剂在制备抑制或治疗TNBC的药物中的应用。
技术介绍
在全球女性癌症中，乳腺癌发病人数与死亡人数都位于前两位，并且发病率在逐年上升，是危害女性健康的主要杀手。三阴性乳腺癌(TNBC)临床表现为雌激素受体(ER)，孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)低表达。与ER+和HER2+阳性乳腺癌患者不同，由于缺乏药物识别靶点，TNBC患者目前只能接受手术，化疗和放疗法。在所有乳腺癌亚型中，TNBC生存预后最差。因此，进一步探索TNBC的病理机制以挖掘治疗靶点，对于TNBC临床治疗以及改善TNBC患者生存预后，显得尤为重要与急迫。簇蛋白(CLU)被研究报道是一种应力激活的，不依赖ATP的分子伴侣，其成熟后从细胞中分泌出来。研究表明，CLU在许多癌症的发生发展中起着重要作用，但是其具体作用机制仍不清楚。蛋白激酶D3(PRKD3)属于丝氨酸/苏氨酸激酶的多基因蛋白激酶D家族，已被证实可调节多种癌症进展。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了CLU和/或PRKD3作为TNBC诊断、分型和预后评价的分子标志物中的应用，为TNBC诊断和指导治疗提供新的途径和产品。本专利技术还提供CLU和/或PRKD3的下调剂或抑制剂在制备抑制或治疗TNBC的药物中的应用。技术方案：为实现上述专利技术目的，如本专利技术所述CLU和/或PRKD3作为TNBC诊断、分型和预后评价的分子标志物中的应用。作为优选，CLU和/或PRKD3作为组织学和/或血清学标志物在制备TNBC诊断、分型、疗效和预后评价的指标性试剂或者试剂盒中的应用。作为优先，所述CLU和/或PRKD3作为药物干预靶点或者分子标记物在TNBC诊断、分型和预后评价以及治疗性药物制备中的应用。其中，所述CLU和PRKD3包括检测来自患有乳腺癌的对象的肿瘤/血液样品中CLU和PRKD3表达量，其中出现CLU和PRKD3表达量升高现象的与所述对象患有TNBC相关。其中，所述CLU和PRKD3在乳腺正常组织中表达量明显低于癌组织，在TNBC癌组织中表达量明显高于癌旁组织，TNBC患者血清中CLU明显高于健康人群。本专利技术所述CLU和/或PRKD3作为TNBC关键药物干预靶点的应用。本专利技术所述的CLU和/或PRKD3的下调剂或抑制剂制备抑制或治疗TNBC的药物中的应用。其中，所述下调剂包括CLU的下调剂(沉默剂)和PRKDs抑制剂。作为优选，所述CLU的下调剂(沉默剂)为OGX-011，所述PRKDs抑制剂为CRT0066101。进一步地，所述沉默剂为OGX-011和抑制剂为CRT0066101可单独使用或者联合使用或者与其他治疗TNBC的药物联合使用。本专利技术所述一组应用于TNBC诊断、分型、治疗和疗效评价TNBC的分子标记物和治疗药物组合，其包括CLU和/或PRKD3为分子标记物，CLU和/或PRKD3的下调剂或抑制剂为治疗药物。本专利技术研究发现PRKD3可以调节CLU蛋白水平，但是不影响CLU的mRNA水平。进一步实验发现PRKD3能调节CLU蛋白稳定性，PRKD3可以作为CLU的关键调节因子。细胞和小鼠实验发现PRKD3与CLU促进TNBC肿瘤生长，并且TNBC患者的肿瘤样本中，发现CLU和PRKD3蛋白水平显着正相关。更重要的是，体内外临床实验证据显示CLU沉默剂(OGX-011)和PRKDs抑制剂(CRT0066101)治疗可抑制TNBC肿瘤生长。TNBC患者血清中分泌的CLU(sCLU)与正常组相比有明显的升高，OGX-011和/或CRT0066101处理导致TNBC小鼠血清中的sCLU降低，并显著抑制了TNBC肿瘤的生长。基于以上研究结论，在TNBC治疗中，将CLU和PRKD3作为药物靶点是可行的，并且针对CLU和PRKD3联合用药效果是明显的。本专利技术中通过敲除TNBC细胞中的PRKD3会抑制细胞生长，并且可以通过PRKD3-KOTNBC细胞中CLU或PRKD3的过表达恢复细胞生长。使用TNBC癌细胞系的异种移植鼠模型中进一步证实了以上发现。与体外细胞实验一致，在小鼠中，与亲代细胞形成的肿瘤相比，PRKD3-KOTNBC细胞形成的肿瘤显示出明显减小的肿瘤体积和重量，并且在PRKD3-KOTNBC细胞中过表达CLU或PRKD3可以恢复TNBC肿瘤的生长。以上数据表明，TNBC肿瘤生长需要PRKD3稳定的CLU。本专利技术的另一方面还提出了PRKD3与CLU临床相关性。本专利技术通过免疫组化显示临床TNBC肿瘤组织中的CLU和PRKD3蛋白表达水平呈正相关。对TNBC肿瘤组织中CLU和PRKD3蛋白表达水平进行定量和分析，显示与癌旁组织相比，TNBC癌组织中的CLU和PRKD3蛋白水平均显着升高，并且呈显着正相关。以上数据表明，TNBC中CLU和PRKD3显示出临床正相关性。本专利技术的还提出靶向PRKD3与CLU显示有效的临床治疗效果。通过使用CLU沉默剂(OGX-011)和PRKDs抑制剂(CRT0066101)靶向CLU及其调节子PRKD3检测对TNBC治疗效果。在TNBC癌细胞系异种移植小鼠模型中使用OGX-011(OGX)和CRT0066101(CRT)处理，能显著抑制TNBC肿瘤生长。进一步使用TNBC患者衍生的TNBC肿瘤鼠模型，单独或组合使用OGX和CRT处理均可显着抑制TNBC肿瘤的生长。以上数据表明，通过靶向CLU和PRKD3对TNBC治疗有显著效果。本专利技术提出了Clusterin(CLU)和蛋白激酶D3(PRKD3)作为三阴性乳腺癌(TNBC)诊疗标志物中的应用，作为治疗靶点靶向药物OGX-011和CRT0066101单独和联合药物用于治疗TNBC药物中的应用。体内外实验显示，在敲除PRKD3细胞中过表达CLU和PRKD3显著恢复乳腺肿瘤的增殖，同时在小鼠体内，TNBC患者异种移植瘤模型中，CLU沉默剂(OGX-11)和PRKDs抑制剂(CRT0066101)单用和联合应用能在体内外显著抑制TNBC肿瘤的生长，肿瘤缓解率最高可达到95％以上。临床肿瘤样本研究发现PRKD3和CLU可以作为三阴性乳腺癌的进一步分型指标，TNBC病人血清学数据表明血液中CLU可以用于检测三阴性乳腺癌并用于评价本专利技术相关药物治疗的疗效。以上实验结果说明CLU和PRKD3作为分子标志物可作为TNBC的诊断、分型和疗效评价指标；作为药靶，OGX-011和CRT0066101分别靶向CLU和PRKD3的药物，单独和联合可以有效治疗三阴性乳腺癌。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：本专利技术首次发现CLU和PRKD3作为TNBC诊断、分型、预后评价分子标志物和治疗靶点，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.CLU和/或PRKD3作为三阴性乳腺癌TNBC诊断、分型、疗效和预后评价的分子标志物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.CLU和/或PRKD3作为三阴性乳腺癌TNBC诊断、分型、疗效和预后评价的分子标志物中的应用。


2.CLU和/或PRKD3作为组织学和/或血清学标志物在制备TNBC诊断、分型、疗效和预后评价的指标性试剂或者试剂盒中的应用。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述CLU和PRKD3包括检测来自患有乳腺癌的对象的肿瘤/血液样品中CLU和PRKD3表达量。


4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述CLU和PRKD3在乳腺正常组织中表达量明显低于癌组织，在TNBC癌组织中表达量明显高于癌旁组织，TNBC患者血清中CLU明显高于健康人群。


5.CLU和/或PRKD3作为TNBC关键药物干预靶点的应用。


6.CLU和...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈礼明，刘岩，张俊，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32