D117L、F317L和EP364R共表达重组腺病毒载体、重组腺病毒及构建和应用制造技术

本发明专利技术提供了D117L、F317L和EP364R共表达重组腺病毒载体、重组腺病毒及构建和应用，属于基因工程技术领域，所述基因插入到pShuttle‑CMV真核表达载体上，能够用于构建表达非洲猪瘟病毒D117L、F317L和EP364R蛋白的重组腺病毒，该重组腺病毒能够直接感染真核细胞，从而实现D117L、F317L与EP364R基因在真核细胞中共表达的目的，为进一步研究基于共表达D117L、F317L与EP364R基因重组腺病毒载体疫苗打好基础。

【技术实现步骤摘要】
D117L、F317L和EP364R共表达重组腺病毒载体、重组腺病毒及构建和应用
本专利技术涉及基因工程
，具体涉及D117L、F317L和EP364R共表达重组腺病毒载体、重组腺病毒及构建和应用。
技术介绍
非洲猪瘟(africanswinefever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(AfricanSwinefevervirus，ASFV)引起的猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病，其特征为病程短、病死率高，临床症状和病理变化均类似于急性猪瘟，表现高热、皮肤充血、流产、水肿及脏器出血。p17是ASFV表达的晚期膜蛋白，由ORFD117L基因编码，是位于病毒内膜的跨膜蛋白。p17是病毒前体膜形成二十面体过程中所必需的中间体，而且对于病毒活力至关重要。F317L及EP364R两个基因编码的蛋白在ASFV中含量较高，属于中等偏上。但是目前还没有针对这D117L、F317L和EP364R的重组腺病毒疫苗以及制备该重组腺病毒疫苗的重组腺病毒载体。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供D117L、F317L和EP364R共本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种D117L、F317L和EP364R共表达的基因，所述基因是将EGFP基因、第一连接基因、D117L基因、第二连接基因、F317L基因、第二连接基因和EP364R基因顺次串联得到；所述D117L基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述F317L基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述EP364R基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述第一连接基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示；所述第二连接基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种D117L、F317L和EP364R共表达的基因，所述基因是将EGFP基因、第一连接基因、D117L基因、第二连接基因、F317L基因、第二连接基因和EP364R基因顺次串联得到；所述D117L基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示；所述F317L基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示；所述EP364R基因的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示；所述第一连接基因的核苷酸序列如SEQIDNO：11所示；所述第二连接基因的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示。


2.一种含有权利要求1所述基因的重组载体，所述重组载体以pShuttle-CMV载体为原始载体；所述基因的插入位点为KpnI和HindIII之间。


3.一种重组腺病毒载体，插入有权利要求2所述重组载体，插入位点为PmeI酶切位点序列的第一位点和第二位点之间；所述第一位点的核苷酸序列如SEQIDNO：13所示；所述第二位点的核苷酸序列如SEQIDNO...

【专利技术属性】
技术研发人员：张泉，朱立麒，殷俊，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32