用于新型冠状病毒检测的DNA聚合酶混合物制造技术

技术编号:27925492 阅读:38 留言:0更新日期:2021-04-02 14:03
本发明专利技术提供了一种用于新型冠状病毒检测的DNA聚合酶混合物,具体地本发明专利技术通过将野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶突变体17混合,获得了显著更高的PCR扩增效率,野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶突变体17混合使用表现出了显著的协同效果。

【技术实现步骤摘要】
用于新型冠状病毒检测的DNA聚合酶混合物
本专利技术属于生物
,具体地说,本专利技术涉及一种用于新型冠状病毒检测的DNA聚合酶混合物。
技术介绍
Taq酶是一种来源于耐热性细菌Thermusaquaticus的耐热性DNA聚合酶,分子量94KDa,在镁离子存在的条件下,其最适反应温度为75-80℃,在95℃下的活性半衰期为40分钟,具有5’-3’核酸外切酶活性。由于其具有耐高温的特性,因此广泛用于聚合酶链式反应(PCR),是核酸扩增、检测等反应的首选用酶。商品化Taq酶使用大肠杆菌原核表达系统进行克隆及表达。现代分子生物检测技术对PCR反应的灵敏度、精确度、耐用性要求越来越高,野生型Taq酶无法完全满足实际应用的需求。为使其更加适应特定技术的使用,对Taq酶序列的突变改造进行了很多的尝试,如:添加DNA结合结构域使其具有更强的延伸活性(WangY(2004).AnovelstrategytoengineerDNApolymerasesforenhancedprocessivityandimprovedperformance本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种DNA聚合酶混合物,其特征在于,所述DNA聚合酶混合物包括野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶;其中,所述野生型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.:2所示;/n所述突变型DNA聚合酶为突变体17:在SEQ ID NO.:2所示的野生型DNA聚合酶基础上进行突变,并且所述突变体17具有如下突变位点:E734F、Y672P。/n

【技术特征摘要】
1.一种DNA聚合酶混合物,其特征在于,所述DNA聚合酶混合物包括野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶;其中,所述野生型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQIDNO.:2所示;
所述突变型DNA聚合酶为突变体17:在SEQIDNO.:2所示的野生型DNA聚合酶基础上进行突变,并且所述突变体17具有如下突变位点:E734F、Y672P。


2.如权利要求1所述的DNA聚合酶混合物,其特征在于,所述突变体17的突变位点为:E734F、Y672P。


3.如权利要求1所述的DNA聚合酶混合物,其特征在于,所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为1~9:9:1。


4.如权利要求4所述的DNA聚合酶混合物,其特征在于,所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为2~8:8:2。


5.如权利要求5所述的DNA聚合酶混合物,其特征在于,...

【专利技术属性】
技术研发人员:蒋析文刘霭珊郑桑桑
申请(专利权)人:中山大学达安基因股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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