人EGFR 20ins肺癌类器官及其培养方法、培养基和用途技术

本公开涉及一种人EGFR 20ins肺癌类器官及其培养方法、培养基和用途，该方法包括：将取自患者个体的人EGFR 20ins肺癌组织进行酶解，得到肺癌细胞；采用促克隆培养基和基质胶对肺癌细胞进行克隆培养，得到克隆培养产物；取出克隆培养产物中生长较快、具有人EGFR 20ins的克隆细胞；采用扩增培养基和基质胶对克隆细胞进行第一扩增培养，得到扩增培养产物；其中，扩增培养基中含有NSC228155；将扩增培养产物进行第一分离处理，将得到扩增细胞进行第二扩增培养，得到肺癌类器官。本公开的方法培养成功率高、周期短，培养得到的人EGFR 20ins肺癌类器官的稳定性强。

【技术实现步骤摘要】
人EGFR20ins肺癌类器官及其培养方法、培养基和用途
本公开涉及生物医药
，具体涉及一种人EGFR20ins肺癌类器官及其培养方法、培养基和用途。
技术介绍
EGFR第20号外显子插入突变（EGFR20ins），是EGFR基因突变的一种，约占EGFR突变的4-12%。然而，EGFR20ins结构多变加上检测手段的局限可能导致它们的检出率偏低。除p.A763_Y764insFQEA外，EGFR20ins通常对第一代和第二代EGFRTKIs不敏感。有试验表明EGF816、AP32788、osimertinib、poziotinib等下一代EGFRTKIs对于EGFRexon20ins突变有很大的临床潜力，并且这些药物已经处于临床发展阶段。但目前针对EGFRexon20ins，还没有通过批准的EGFRTKIs。EGFR20ins由于结构多样性（突变亚型多达200余种），不同的插入可能对EGFRTKIs有不同的应答。因此，在体外建立具有EGFR20ins突变的细胞模型，对研究个体化用药和靶向药物开发具有重要意义。研究表明，肿瘤类器官可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于培养人EGFR 20ins肺癌类器官的培养基，其特征在于，所述培养基包括促克隆培养基和扩增培养基；/n所述扩增培养基含有10~55μM的NSC228155；/n所述促克隆培养基含有30~50μM的Y-27632、5~10μg/mL的两性霉素B、50~100μg/mL的链霉素、1~3体积%的B27、3~5mM的Nicotinamide、15~30μM EGF、450~550ng/mL的R-spondin、90~110ng/mL的Noggin、45~55ng/mL的Hydrocortisonum、3~8mM的L-glutamine和2~5μM的Insulin。/n

【技术特征摘要】
1.用于培养人EGFR20ins肺癌类器官的培养基，其特征在于，所述培养基包括促克隆培养基和扩增培养基；
所述扩增培养基含有10~55μM的NSC228155；
所述促克隆培养基含有30~50μM的Y-27632、5~10μg/mL的两性霉素B、50~100μg/mL的链霉素、1~3体积%的B27、3~5mM的Nicotinamide、15~30μMEGF、450~550ng/mL的R-spondin、90~110ng/mL的Noggin、45~55ng/mL的Hydrocortisonum、3~8mM的L-glutamine和2~5μM的Ins...

【专利技术属性】
技术研发人员：李程，肖金平，孙志坚，康平，
申请(专利权)人：北京科途医学科技有限公司，浙江科途医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11