一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抑制bcl‑2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，属于生物技术领域。一种抑制bcl‑2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒是由膜材料包裹一段反义寡聚核酸制成，所述的核酸序列为5’‑TCT CCC AGC GTG CGC CAT‑3’，或5’UCU CCC AGC GTG CGC CAU 3’。并公开了其制备方法。本发明专利技术中的纳米微粒，对肿瘤细胞的生长以及特定的靶基因有很好的阻断效果，特别是针对KB宫颈癌细胞具有很好的阻断效果。

【技术实现步骤摘要】
一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒及其制备方法本申请是申请号CN201610903392.1，申请日：2016年10月17日，专利技术名称为：“一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒及其制备方法”专利申请的分案申请。
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒及其制备方法。
技术介绍
反义寡聚核酸一般由18-22核苷酸组成，通过碱基互补配对的原则选择性与靶信使RNA结合，从而阻断或抑制特定的信使RNA的功能，并调控后续的靶基因的蛋白的表达。Bcl-2是一种抑制细胞凋亡的基因，此种基因可以促进细胞的分裂，扩增，分化并在大多数肿瘤细胞中都有较高的表达，所以肿瘤可通过上调此基因而达到无限制的生长和扩散的目的。G3139是一段由18个核苷酸组成的反义寡聚核酸，核酸序列为5’-TCTCCCAGCGTGCGCCAT-3’，可通过碱基互补配对的原则和编码bcl-2的信使RNA结合，从而较好的抑制bcl-2基因以及下游的蛋白的表达。然而，根据之前文献报道，大多数反义寡聚核酸缺乏适合的递药系统本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，该脂质纳米粒是由膜材料包裹一段反义寡聚核酸制成，所述的核酸序列为5’-TCT CCC AGC GTG CGC CAT-3’，或5’UCU CCC AGC GTG CGC CAU 3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，该脂质纳米粒是由膜材料包裹一段反义寡聚核酸制成，所述的核酸序列为5’-TCTCCCAGCGTGCGCCAT-3’，或5’UCUCCCAGCGTGCGCCAU3’。


2.根据权利要求1所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，所述的膜材料包括阳离子类脂、中性磷脂、胆固醇、吐温、聚乙二醇衍生物，其摩尔比为(25-35):(40-50):(15-25)：(1-5):(1-5)。


3.根据权利要求2所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于：所述的阳离子类脂包括：DOTAP、DOTMA、DDAB、DODMA；
所述的中性磷脂包括：EggPC、DOPC、DSPC、DPPC、DMPC；
所述的吐温包括：吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80；
所述的聚乙二醇衍生物包括：mPEG-DPPE、mPEG-DMPE、mPEG-DSPE、TPGS、mPEG-cholesterol。


4.根据权利要求2或3所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，所述的聚乙二醇衍生物中PEG包括单甲基聚乙二醇，其分子量为550-5000。


5.根据权利要求4所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，所述的聚乙二醇衍生物是亲水的聚乙二醇链或甲基化聚乙二醇链连接到一个可以嵌入磷脂双分子层的疏水结构上所形成的物质；所述的疏水结构为胆固醇，维生素E，二棕榈酸磷脂酰乙醇胺,二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺,二肉豆蔻酰甘油或结构类似物。


6.根据权利要求3所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，所述的吐温为吐温-80。


7.根据权利要求1所述的一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒，其特征在于，对所述的反义寡聚核酸5’UCUCCCAGCGTGCGCCAU3’的修饰为对其两端的前三个核酸进行2’-O-Me修饰，并对全链进行硫代磷酸修饰；或者对反义寡聚核酸5’-TCTCCCAGCGTGCGCCAT-3’的全链进行硫代磷酸修饰。


8.一种抑制bcl-2的反义寡聚核酸的脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，所述的脂质纳米粒的制备方法为乙醇逐级稀释法，具体步骤如下：
(1)将阳离子类脂、中性磷脂、胆固醇、吐温、聚乙二醇衍生物，按照一定的摩尔比溶解于80％的乙醇中，得混...

【专利技术属性】
技术研发人员：程光，陈文忠，秦利利，
申请(专利权)人：南京绿叶制药有限公司，南京爱赛克纳米生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32