从粪便中提取DNA样本的方法和结直肠癌相关基因的甲基化检测方法技术

本发明专利技术公开了从粪便中提取DNA样本的方法和结直肠癌相关基因的甲基化检测方法，涉及基因检测技术领域。该方法包括：离心粪便稀释液样本，得到第一上清液；粪便稀释液中的粪便取自于需要进行结直肠癌或结直肠癌前病变检测的主体；离心时，单个离心管中的粪便稀释液样本的体积不高于2mL。该提取方法操作简单，粪便用量少，不需要使用大型的离心设备即可提取，提取效果好，所提取的DNA样本用于后续甲基化检测时具有较好的灵敏度和特异性。检测时具有较好的灵敏度和特异性。检测时具有较好的灵敏度和特异性。

【技术实现步骤摘要】
从粪便中提取DNA样本的方法和结直肠癌相关基因的甲基化检测方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求申请日为2019年12月19日，申请号为201911314364.6，专利技术名称为“从粪便中提取DNA样本的方法和结直肠癌相关基因的甲基化检测方法”的中国专利技术专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。


[0003]本专利技术涉及基因检测
，具体而言，涉及从粪便中提取DNA样本的方法和结直肠癌相关基因的甲基化检测方法。

技术介绍

[0004]结直肠癌是我国乃至世界范围内最常见的恶性肿瘤，我国每年新增发病人数约40万，其发病率居所有恶性肿瘤的第三位。早期结直肠癌患者手术5年生存率可高达90％以上，中、晚期患者5年生存率仅10％左右，且大多数结直肠肿瘤生长缓慢、保持沉默或无症状，直到它们达到了一定的大小或发展阶段。因此，结直肠癌是可以通过筛查进行干预的理想靶标。
[0005]肠镜检查是结直肠癌检测和确诊的金标准，但因其需要复杂的肠道准备过程、具有一定的侵入性且需要专业的技术人员，因此在一般本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从粪便中提取DNA样本的方法，所述DNA样本适用于结直肠癌或结直肠癌前病变相关基因的甲基化检测，其特征在于，其包括：预处理步骤：离心粪便稀释液样本，得到第一上清液；所述粪便稀释液样本中的粪便取自于需要结直肠癌检测的主体；离心时，单个离心管中的粪便稀释液样本的体积不高于2mL，优选为0.5
‑
1.8mL，进一步优选为1.8mL。2.根据权利要求1所述的从粪便中提取DNA样本的方法，其特征在于，离心的参数设置如下：转速10000
‑
13000rpm，时间10s
‑
5min。3.根据权利要求1所述的从粪便中提取DNA样本的方法，其特征在于，所述方法还包括：吸附步骤：将吸附剂与所述第一上清液混匀以去除所述上清液中的杂质，得到第一混合液，对所述第一混合液离心，得到第二上清液；优选地，所述吸附剂选自交联聚乙烯吡咯烷酮；优选地，所述交联聚乙烯吡咯烷酮为交联聚乙烯吡咯烷酮粉末或交联聚乙烯吡咯烷酮片剂。4.根据权利要求3所述的从粪便中提取DNA样本的方法，其特征在于，所述吸附剂与所述第一上清液的质量体积比为1:(2
‑
4)，优选为1:4。5.根据权利要求4所述的从粪便中提取DNA样本的方法，其特征在于，所述方法还包括：核酸变性步骤：对第二上清液进行变性处理以使DNA双链结构形成单链结构；优选地，所述变性处理的温度85
‑
95℃，时间为5
‑
15min，进一步优选为10min。6.根据权利要求5所述的从粪便中提取DNA样本的方法，其特征在于，所述方法还包括：捕获步骤：往所述第二上清液中加入捕获剂，得到第二混合液；其中，所述捕获剂含有偶联有探针的磁珠，所述探针与待提取基因序列的某一段互补。7.根据权利要求6所述的从粪便中提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：张良禄，吴志诚，董兰兰，甘甜，陈玉珠，李婷婷，
申请(专利权)人：武汉艾米森生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：