一种小鼠DNA的鉴定方法技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，尤其是一种小鼠DNA的鉴定方法，针对现有的小鼠DNA提取过程中，其含有的耗材及多种试剂增加了实验成本和时间成本的问题，现提出如下方案，其包括小鼠DNA的提取方法和鉴定小鼠DNA的检测引物以及小鼠趾甲DNA的提取试剂盒和试剂盒的配制方法，包括如下步骤：取小鼠趾甲放入容器中；向容器中加入50mM NaOH溶液，96℃恒温加热10min；先降温至40℃，再自然冷却至25℃；加入pH为8.0的1M Tris、5mM EDTA溶液，涡旋5s；12000rpm，离心3min，取上清；对小鼠DNA进行PCR反应。本发明专利技术的DNA提取过程耗时15min左右，能快速获取DNA，缩减了提取DNA的流程，节约了试剂成本，显著地提高了效率。提高了效率。提高了效率。

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠DNA的鉴定方法


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，尤其是一种小鼠DNA的鉴定方法。

技术介绍

[0002]在生物学研究中，转基因技术可用于基因过表达、基因表达沉默、在特定的细胞群中表达基因、表达外源性或突变的基因等研究。转基因动物是指通过基因工程的方法人为地将外源基因导人动物的受精卵或早期胚胎细胞，使外源基因与动物本身的基因组进行整合，随细胞的分裂而增殖，并且能稳定地遗传给后代的一类动物。转基因小鼠的建立比其它大型转基因哺乳动物的建立要省时、省力，是研究人类疾病的重要工具，在生命科学领域得到越来越广泛的应用。
[0003]在采用转基因小鼠开展科学研究之前，需要将小鼠进行扩繁，且对其基因型进行鉴定，选取特定基因型的小鼠进行后续的研究。小鼠的基因型鉴定，包括小鼠基因组DNA的提取，DNA目的片段的扩增和DNA电泳。目前常用的提取DNA方法包括高盐提取法和酚/氯仿提取法，这些方法的不足之处是操作步骤比较繁琐，时间偏长，如离心次数多、蛋白酶K消化过夜等；涉及的试剂较多，如蛋白酶K、氯仿、乙醇等。在一些商品化的试剂盒(Promeg本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴定小鼠DNA的检测引物，其特征在于：包括Primer1F/R、Primer2F/R引物中的至少一组：Primer1F：CAGCAGGGTGATTTAAAGGGTTC；Primer1R：GGACGTCGCAGAGTAAAGCCA；Primer2F：GGCTGTGCTTCAGTGTTAGAGAC；Primer2R：CTACAGAGTCATTCCACGGAGC。2.一种小鼠DNA的鉴定方法，其特征在于：包括如下步骤：S1：取小鼠趾甲放入容器中；S2：向容器中加入25～50mM NaOH溶液，96℃恒温加热10min；S3：先降温至40℃，再自然冷却至25℃；S4：加入pH为8.0的1M Tris、2～5mM EDTA溶液，涡旋5s；S5：离心3min，取上清；S6：用如权利要求1所述的引物进行PCR反应。3.根据权利要求2所述的一种小鼠DNA的鉴定方法，其特征在于，所述PCR反应的成分体积为：4.根据权利要求3所述的一种小鼠DNA的鉴定方法，其特征在于，所述PCR反应的条件包括：预变性：94℃，5min、1cycle；PCR反应：94℃变性，30s、56℃退火，30s、72℃延伸...

【专利技术属性】
技术研发人员：史兴娟，张俞，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：