髓系细胞触发受体2作为新型冠状病毒肺炎诊断或治疗靶点的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了髓系细胞触发受体2作为新型冠状病毒肺炎诊断或治疗靶点的应用，研究发现TREM‑2在新型冠状病毒肺炎病人外周血CD4+和CD8+T细胞中高表达，并且与疾病严重程度呈正相关。表明TREM‑2可以作为新型冠状病毒肺炎诊断和预后的标志物，本发明专利技术还发现TREM‑2‑Fc融合蛋白(作用效果是阻断TREM‑2信号)明显降低细胞因子IFN‑g、TNF、IL‑2和GranzymeB的水平，TREM‑2表达与《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》提出的老龄、淋巴细胞计数减少、C反应蛋白和D‑二聚体升高的重症指标有显著相关性。提示干预TREM‑2的表达可以缓解甚至有望治疗新型冠状病毒肺炎。

【技术实现步骤摘要】
髓系细胞触发受体2作为新型冠状病毒肺炎诊断或治疗靶点的应用
本专利技术涉及生物
，更具体的，涉及髓系细胞触发受体2作为新型冠状病毒肺炎诊断或治疗靶点的应用。
技术介绍
新型冠状病毒肺炎是一种急性感染性肺炎，其病原体是一种先前未在人类中发现的新型冠状病毒，即严重急性呼吸道综合征2型冠状病毒(SARS-CoV-2)。根据现有病例资料，新型冠状病毒肺炎以发热、干咳、乏力等为主要表现，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等上呼吸道和消化道症状。部分患者起病症状轻微，可无发热，多在1周后恢复。多数患者预后良好，少数患者病情危重，甚至死亡。重症病例多在1周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。因此，早期诊断、及早干预以及开发新型治疗策略是防控新型冠状病毒肺炎的关键手段。目前临床确诊检测方法是实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性；或病毒基因测序，与已知的新型冠状病毒高度同源。《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》罗列了重型、危重型临床预警指标，包括：1、外周血淋巴细胞进行性下降；2、外周血炎症因子如IL-6、C-反应蛋白进行性上升；3、乳酸进行性升高；4、肺内病变在短期内迅速进展。然而，以上指标没有特异性，且预测准确率不高，迫切需要新的诊断指标。目前临床新型冠状病毒肺炎没有特效药，一般采用广谱的抗病毒治疗，包括利巴韦林、干扰素、洛匹那韦、利托那韦、阿比多尔和磷酸氯喹。尽管以上药物对大部分病人有一定效果，但对重症病人的治疗依然效果差，疾病死亡率居高不下。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术中缺乏新型冠状病毒肺炎的有效诊断和治疗手段，提供用于检测髓系细胞触发受体2的表达水平的试剂在制备新型冠状病毒肺炎诊断或治疗试剂中的应用。本专利技术的首要目的是提供用于检测髓系细胞触发受体2的表达水平的试剂在制备新型冠状病毒肺炎的诊断和/或预后试剂中的应用。本专利技术的第二个目的提供一种用于减轻新型冠状病毒肺炎引起的炎症反应的药物。本专利技术的第三个目的是提供特异性抑制髓系细胞触发受体2表达的物质在制备减轻新型冠状病毒肺炎引起的炎症反应的药物的中的应用。本专利技术的目的通过以下技术方案实现：用于检测髓系细胞触发受体2的表达水平的试剂在制备新型冠状病毒肺炎的诊断和/或预后试剂中的应用。优选的，所述试剂为能够与髓系细胞触发受体2特异性结合的抗体。髓系细胞触发受体(Triggeringreceptorexpressedonmyeloidcells，TREM)2是主要表达于中性粒细胞和单核细胞表面的免疫球蛋白超家族成员，由胞外免疫球蛋白样区域、跨膜区域和胞内区域组成。专利技术人研究发现，采用流式细胞术检测，TREM-2在新型冠状病毒肺炎患者外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的表达明显高于健康对照，且TREM-2在重症患者的表达明显高于非重症患者。进一步采用流式细胞术检测TREM-2在新型冠状病毒肺炎患者发病前期(pre-ICU)、危重症期(ICU)和恢复期(post-ICU)的趋势是先升高后降低，提示TREM-2与重症病情发生密切相关，因此，TREM-2可以作为新型冠状病毒肺炎诊断和预后的标志物。优选的，所述抗体可以偶联或者带有检测标记，更优选的，所述抗体为髓系细胞触发受体2的单克隆抗体或者多克隆抗体。优选的，所述髓系细胞触发受体2来自CD4+T细胞、CD8+T细胞。CD4+和CD8+T细胞中的TREM-2的表达丰度在新型冠状病毒肺炎患者远高于健康人，且与病情加重相关。因此，检测CD4+和CD8+T细胞中TREM-2的表达准确率好，灵敏度高。因此可以通过检测外周血中的TREM-2的含量，来诊断新型冠状病毒肺炎，并且预测患者病情进展是否转变为重症。具体的，当作为诊断试剂时，诊断过程包括：利用与TREM-2特异性结合的抗体检测受试者的血液样品(或者活检组织样品)中的TREM-2的表达水平，并将其与参考水平进行比较，当TREM-2的表达水平显著上调，诊断结果为阳性；当TREM-2的表达水平没有显著变化，诊断结果为阴性，其中参考水平为健康人群外周血样品中所述TREM-2的表达水平。具体的，当作为预后试剂时，预后过程包括：利用与TREM-2特异性结合的抗体检测受试者不同病程时期的血液样品(或者活检组织样品)中的TREM-2的表达水平，并将其与参考水平进行比较，绘制不同病程时期TREM-2的表达水平曲线，从而确定患者的预后情况。其中参考水平为健康人群外周血样品中所述TREM-2的表达水平。本专利技术还提供一种用于减轻新型冠状病毒肺炎引起的炎症反应的药物，所述药物包括特异性抑制髓系细胞触发受体2表达的物质。免疫共沉淀实验证实TREM-2与SARS-CoV-2病毒膜蛋白(Mprotein)结合，与核蛋白(Nprotein)N蛋白、血管紧张素转化酶2(ACE2)不结合。采用SARS-CoV-2Mprotein刺激条件下，TREM-2促进CD4+和CD8+T细胞分泌细胞因子包括干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-2(IL-2)和颗粒酶B(GranzymeB)。进一步采用TREM-2-Fc(TREM-2胞外段连接免疫球蛋白恒定区)融合蛋白处理，减少了CD4+和CD8+T细胞分泌以上4个细胞因子的水平。从细胞水平上来看，阻断TREM-2受体信号抑制CD4+和CD8+T细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-2(IL-2)和颗粒酶B(GranzymeB)；另外，《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》提出，老龄、淋巴细胞(lymphocyte)计数减少、C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)和D-二聚体(D-dimer)升高是新型冠状病毒肺炎重症的指标，本专利技术还研究了TREM-2表达与年龄(Age)、CRP和D-dimer分别呈正相关，相关系数(r)分别是0.385、0.5368、0.323，且统计学P值均小于0.01，即两指标比较具有显著性差异。TREM-2表达与lymphocyte数量呈负相关，相关系数(r)为-0.4084，且P值小于0.001，即具有显著性差异。以上结果证实，TREM-2与新型冠状病毒肺炎的临床重症指标具有相关性，因此通过干预体内靶向髓系细胞触发受体2的表达，能够减轻新型冠状病毒肺炎患者的炎症反应，从而可用于治疗新型冠状病毒肺炎。优选的，所述药物包括靶向髓系细胞触发受体2的融合蛋白、特异性抗体、siRNA、反义RNA。本专利技术还提供特异性抑制髓系细胞触发受体2表达的物质在制备减轻新型冠状病毒肺炎引起的炎症反应的药物中的应用。优选的，所述药物包括靶向髓系细胞触发受体2的融合蛋白、特异性抗体、siRNA、反义RNA。更优选地，所述药物为TREM-2-Fc融合蛋白。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术通过研究发现TREM-2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测髓系细胞触发受体2的表达水平的试剂在制备新型冠状病毒肺炎的诊断和/或预后试剂中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.用于检测髓系细胞触发受体2的表达水平的试剂在制备新型冠状病毒肺炎的诊断和/或预后试剂中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂为能够与髓系细胞触发受体2特异性结合的抗体。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗体带有偶联或检测标记。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为髓系细胞触发受体2的单克隆抗体或者多克隆抗体。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述髓系细胞触发受体2来自CD4+T细胞、CD8+T细胞。


6.一种用于减轻新型冠状病毒肺...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄曦，吴永坚，王漫妮，尹欢，
申请(专利权)人：中山大学附属第五医院，
类型：发明
国别省市：广东;44