检测CYP2D6基因的试剂、检测方法和试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种CYP2D6基因分型检测试剂盒，该检测试剂盒包括CYP2D6*10的检测引物和探针，以及内参基因ALB的检测引物和探针。本发明专利技术利用CYP2D6和内参(ALB)两个基因的扩增即可区分CYP2D6*10和CYP2D6*5两种型别。为临床用药指导提供了一个简捷判断的新途径。

【技术实现步骤摘要】
检测CYP2D6基因的试剂、检测方法和试剂盒
本专利技术涉及分子生物学和医学领域，具体涉及药物代谢相关基因CYP2D6的多态性检测试剂、试剂盒和检测方法。
技术介绍
据世界卫生组织(WHO)公布，世界各国住院患者发生药物不良反应的比例为10％-20％，其中5％的患者死于严重药物不良反应。因此药物基因组学研究已经成为当前全球热点，个体化用药、个体化治疗更是各种医药生物国际学术会议的讨论重点。细胞色素(CYP)2D6是CYP450家族的重要成员之一，虽然总量只占肝脏酶的2％～9％，但是参与了临床上20％～30％的药物代谢，包括抗高血压药、抗抑郁药、抗心律失常药、抗精神病药、抗肿瘤药等80多种药物。CYP2D6基因存在多种多态性，目前已发现超过100个突变位点。其中最常见的有正常型等位基因CYP2D6*1、中间代谢型等位基因CYP2D6*10和慢代谢型等位基因CYP2D6*5。CYP2D6*10为CYP2D6第1个外显子上的188C突变为T，等位基因频率为51.6％，CYP2D6*5为整个CYP2D6基因缺失，发生频率为3％～7％。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种CYP2D6基因分型检测试剂盒，包括检测CYP2D6*10的引物和探针。/n

【技术特征摘要】
1.一种CYP2D6基因分型检测试剂盒，包括检测CYP2D6*10的引物和探针。


2.根据权利要求1所述检测试剂盒，其特征在于，所述CYP2D6*10引物和探针的序列分别为：
CYP2D6*10上游引物：5’-CCATTTGGTAGTGAGGCAGGT-3’
CYP2D6*10下游引物：5’-ATGCAGCAGGTTGCCCA-3’
CYP2D6*10野生型探针：5’-CACGCTACCCACCAGG-3’
CYP2D6*10突变型探针：5’-ACGCTACTCACCAGG-3’。


3.根据权利要求1至2之一所述的检测试剂盒，其特征在于，还包括检测内参基因ALB引物和探针序列，分别为：
ALB上游引物：5’-TTGTGGGCTGTAATCATCGTCTA-3’
ALB下游引物：5’-GTTCTCTTTCACTGACATCTGCAAA-3’
ALB探针：5’-CCCACACAAATCTCTCCCTGGCATTG-3’。


4.根据权利要求1至3之一所述的检测试剂盒，其特征在于，所述CYP2D6*10野生型探针、CYP2D6*10突变型探针、ALB探针分别用不同的荧光信号基团进行标记。


5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，
CYP2D6*10野生型探针：FAM-CACGCTACCCACCAGG-MGBNFQ
CYP2D6*10突变型探针：VIC-ACGCTACTCACCAGG-MGBNFQ。
ALB探针：CY5-CCCACACAAATCTCTCCCTGGCATTG-BHQ3。


6.一种CYP2D6基因多态性的检测方法。包括以下步骤：
(1)提取样品中的基因组DNA；
(2)步骤1获得的DNA进行荧光定量PCR，PCR反应试剂包括检测CYP2D6*10的引物和探针，以及检测内参基因ALB的引物和探针；
(3)结果判读：若CY5、FAM有信号，则为CYP2D6*1野生型；若CY5、VIC有信号，则为CYP2D6*10纯合突变型；若CY5、FAM、VIC有信号，则为CYP2D6*1/*10杂合突变型；若只有CY5有信号，则为CYP2D6*5型。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘汉仁，丁佳女，
申请(专利权)人：杭州百迈生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33