一种ω转氨酶及其突变体、重组质粒、基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种ω转氨酶及其突变体、重组质粒、基因工程菌及其应用。该ω转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示，ω转氨酶突变体由ω转氨酶的氨基酸序列突变得到，与SEQ ID No：2具有至少90％的同源性。本发明专利技术从瘤状伯克霍尔德菌中提取了ω转氨酶基因，实现了该ω转氨酶基因的异源表达，所产生的ω转氨酶菌株对一系列芳基烷基类底物展示了优良的催化活性。本发明专利技术还将该ω转氨酶进行突变获得一系列ω转氨酶突变体，通过将该ω转氨酶突变体偶联不同的酶，应用于生物酶法不对称合成(S)‑1‑苯丙胺和其它手性胺类产品的生产中，具有经济环保、手性选择性高的特点，为转氨酶的工业应用提供了一个潜在的选择。

【技术实现步骤摘要】
一种ω转氨酶及其突变体、重组质粒、基因工程菌及其应用
本专利技术涉及生物工程
，更具体地涉及一种ω转氨酶及其突变体、重组质粒、基因工程菌及其应用。
技术介绍
目前，世界上95％的药物都是手性药物，其中70％的手性药物都需要用到手性胺作为手性前体去合成下一步的目标产物。主流的合成手性胺的方法依然是化学法，或者生物化学法相结合。然而，近年来，国家对于化学合成的监管力度愈加严格，相应的，生物制造行业正被大力扶持，这是由于化学法其本身苛刻的合成条件的危险性以及后期排污对于环境造成的严重污染所致的局面。特别是对于手性药物或者手性砌块的合成，大多数情况下，为了提高目标产物的立体选择性，会使用到贵重的循环利用率低的重金属或者过渡态金属，以此来提高所需要的光学纯的手性胺的比率。这种提高立体选择性的方式，无疑对后期的排污工作造成了巨大的经济损失，更重要的是对可持续型平衡型环境的不可逆破坏。因此，建立更加高效的环保的生产手性产品的生态友好型方法，迫在眉睫。生物法由于其温和的反应条件、简单的反应组分、极高的立体选择性和环境友好特性，引起了广泛的关注。相本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种ω转氨酶，其特征在于，所述ω转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种ω转氨酶，其特征在于，所述ω转氨酶的氨基酸序列如SEQIDNo：2所示。


2.一种ω转氨酶突变体，其特征在于，所述ω转氨酶突变体的氨基酸序列由权利要求1所述的ω转氨酶的氨基酸序列发生突变得到，所述ω转氨酶突变体与SEQIDNo：2所示的氨基酸序列具有至少90％的同源性。


3.根据权利要求2所述的ω转氨酶突变体，其特征在于，所述ω转氨酶突变体与SEQIDNo：2所示的氨基酸序列具有至少95％的同源性。


4.根据权利要求3所述的ω转氨酶突变体，其特征在于，发生所述突变的氨基酸位点包括：第78位氨基酸位点，第82位氨基酸位点，第284位氨基酸位点，第440位氨基酸位点中的至少一个。


5.根据权利要求4所述的ω转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体包括：BPTAW82A，BPTAW82A/M78F，BPTAW82A/I284F，BPTAW82A/T440Q，BPTAM78F/W82A/I284F/T440Q中的任意一种。


6.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒由根据权利要求1所述的ω转氨酶的编码序列与表达载体质粒连接构建而成，或者由根据权利要求2～5中任意一项所述的ω转氨酶突变体的编码序列与表达载体质粒连接构建而成。


7.一种ω转氨酶基因工程菌，其特征在于，所述ω转氨酶基因工程菌表达如权利要求1所述的ω转氨酶，或如权利要求2～5中任意一项所述的ω转氨酶突变体。


8.一种如权利要求1所述的ω转氨酶及权利要求2～5所述的ω转氨酶突变体在合成手性胺类产品中的应用。


9.根据权利要求8所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华磊，魏东芝，谢有余，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海;31