一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种γ‑谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用，属于基因工程领域；本发明专利技术在天然γ‑谷氨酰胺转肽酶的基础上，通过定点突变生物技术改造γ‑谷氨酰胺转肽酶分子结构，本发明专利技术所提供的突变体T401P、T422S，其转肽酶活较原始菌株分别提高了32.3％、41.8％；比酶活分别提高了近4.5倍、5.1倍，本发明专利技术表明401位点及422位点残基对于GGT催化苦味氨基酸具有重要影响，可用于改善含苦味氨基酸产品的口感与品质，这对于γ‑谷氨酰胺转肽酶在医药和食品行业的应用具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用
本专利技术涉及一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用，属于基因工程领域。
技术介绍
γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT，EC2.3.2.2)负责催化γ-谷氨酰类化合物的γ-谷氨酰分子转移到其他氨基酸、短肽等受体分子上(转肽反应)或水分子上(水解反应)，广泛存在于哺乳动物和细菌中。γ-谷氨酰胺转肽酶可以用于临床诊断、催化合成氨基酸衍生物方面、催化合成药物或药物前体、催化合成茶氨酸、谷胱甘肽等，还可以用于改善某些苦味氨基酸的风味。这对于医学、化工行业以及食品的发展意义重大。氨基酸通过脱水缩合组成多肽，研究表明多肽在食品中具有呈味的作用，但在起呈味的氨基酸中存在着一类苦味氨基酸，其种类主要包括：芳香族氨基酸(V、F、W)，碱性氨基酸(R、K、H)和支链氨基酸(L、V、I)。随着生活水平不断提高，人们对于食物味道的要求也越来越高，所以苦味氨基酸对于食品等行业的发展是极其不利的。一种酶活提高的γ-谷氨酰胺转肽酶突变体及其构建方法(申请号：20171132414本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体，其特征在于，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第401位氨基酸突变得到的；/n或者，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第422位氨基酸突变得到的。/n

【技术特征摘要】
1.一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体，其特征在于，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第401位氨基酸突变得到的；
或者，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第422位氨基酸突变得到的。


2.如权利要求1所述的一种γ-谷氨酰胺转肽酶突变体，其特征在于，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第401位氨基酸由苏氨酸突变为脯氨酸得到的；
或者，所述γ-谷氨酰胺转肽酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的γ-谷氨酰胺转肽酶的第422位氨基酸由苏氨酸突变为丝氨酸得到的。


3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。


4.携带权利要求3所述基因的重组质粒。


5.如权利要求4所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒的载体为pMA...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨套伟，饶志明，刘栓英，徐美娟，张显，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32