【技术实现步骤摘要】
一种斑节对虾PmGFPT2基因及其应用
本专利技术属于分子生物学
,具体涉及一种斑节对虾PmGFPT2基因及其应用。
技术介绍
己糖胺通路(HBP)是葡萄糖代谢途径之一,是所有生物普遍存在的代谢途径,葡萄糖进入细胞后,首先转化为6-磷酸葡萄糖(Fru6P),然后谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶(glutamine:fructose-6-phosphateaminotransferase2,GFPT2)将氨和Fru6P合成为6-磷酸葡糖胺(GlcN6P),再经由中间代谢环节,最终产物为二磷酸尿嘧啶N-乙酰氨基葡萄糖(UDP-GlcNAc)。GFPT2是氨基己糖生物合成限速酶,也被称为葡糖胺-6-磷酸合成酶(glucosamine-6-phosphatesynthase),主要参与几丁质的合成和蛋白质的糖基化,UDP-GlcNAc是细菌和真菌细胞壁的主要成分,是蛋白质糖基化的重要底物,也是几丁质的活性前体,几丁质是节肢动物的表皮和中肠围食膜(PM)的主要成分,是形成哺乳动物的糖蛋白、粘多糖基础,在葡萄糖调节中发挥着重要的作用 ...
【技术保护点】
1.一种斑节对虾PmGFPT2基因,其特征是:所述基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示。/n
【技术特征摘要】
1.一种斑节对虾PmGFPT2基因,其特征是:所述基因的碱基序列如SEQIDNO:2所示。
2.权利要求1所述的斑节对虾PmGFPT2基因的编码蛋白,其特征是:所述编码蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。
3.根据权利要求1所述的斑节对虾PmGFPT2基因,其特征是:所述PmGFPT2基因的cDNA全长为3399bp,包括开放阅读框ORF2097bp,5’端非编码区(UTR)65bp,3’端非编码区(UTR)1237bp,PmGFPT2基因的ORF推测包含698个氨基酸,分子量为78.3101KDa,理论等电点为6.31。
4.权利要求1所述斑节对虾PmGFPT2基因的克隆方法,其特征是包括以下步骤:首先提取斑节对虾不同离体组织的总RNA,合成cDNA第一条链,用做RACE模板,并将斑节对虾不同离体组织的总RNA反转录,用作荧光定量PCR样品;然后根据斑节对虾cDNA文库中的EST序列,设计PmGFPT2基因ORF的引物和RACE引物,即得到斑节对虾PmGFPT2基因的全长。
5.根据权利要求4所述斑节对虾PmGFPT2基因的克隆方法,其特征是:所述PmGFPT2基因ORF的引物包括qPCR引物PmGFPT2和内参引物PmEF-1α,其中所述qPCR引物PmGFPT2包括PmGFPT2-qF和PmGFPT2-qR,其碱基序列如SEQIDNO:4和SEQIDNO:5所示,所述内参引物PmEF-1α包括PmEF-1α-qF和PmEF-1α-qR,其碱基序列如SEQIDNO:6和SEQIDNO:7所示;所述RACE引物包括PmGFPT2-5’GSP1、PmGFPT2-5’GSP2、PmGFPT2-3’GSP1和PmGFPT2-3’GSP2,其碱基序列分别如SEQIDNO:8~11所示。
6.权利要求1或3所述的基因或权利要求2所述编码蛋白在提高斑节对虾耐氨氮方面的应用。
7.一种斑节对虾PmGFPT2基因氨氮相关的SNP位点的筛选方法,其特征是包括以下步骤:
(1)样品选择:选择非洲野生群体,泰国野生群体和中国三亚野生群体作为SNP位点筛选样品,选择耐氨氮极端群体以及氨氮敏感群体作为SNP分型样品,并选取标...
【专利技术属性】
技术研发人员:李运东,周发林,江世贵,丁阳阳,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院南海水产研究所,
类型:发明
国别省市:广东;44
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