miR-181抑制剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能抑制miR

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】miR
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181抑制剂及其用途


[0001]本专利技术涉及能抑制miR
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181的药物，其用于治疗和/或预防线粒体疾病，包括累及眼和/或脑(eye and/or brain involvement)的线粒体病以及与线粒体功能障碍有关的影响眼和/或脑的神经退变性病况。

技术介绍

[0002]线粒体是不同细胞过程中的关键角色，其功能障碍直接或间接导致各种人类疾病的发病，例如直接导致线粒体疾病(MD)发病或间接导致常见神经退行性疾病(包括帕金森氏病(PD)或阿尔茨海默氏病(AD))发病，其中线粒体功能障碍被描述为发病机理中的主要因果要素(参考：PMID：23567191)。
[0003]原发性线粒体疾病(PMD)是一组异质性疾病，由涉及氧化磷酸化(OXPHOS)的线粒体或核编码基因突变引起。PMD的临床表现范围从单个组织/器官病变到多器官综合征，显著累及中枢神经系统(CNS)，其对线粒体功能障碍特别敏感。PMD包括：Leigh综合征，Leber遗传性视神经病变(LHON)，线粒体肌病，脑病，乳酸性酸中毒和中风综合征(MELAS)，Kjer视神经病变，共济失调性神经病变和色素性视网膜炎(NARP)，常染色体显性视神经萎缩，Kearns
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Sayre综合征，肌阵挛性癫痫发作伴破碎红纤维(MERRF)综合征。继发性线粒体疾病(SMD)是由直接影响线粒体功能的核基因突变引起的一组疾病，包括Friedreich共济失调，遗传性痉挛性截瘫，腓骨肌萎缩症。
[0004]尽管每种疾病都很罕见，但总体上，成年MD的总患病率估计为4300分之一左右，代表了遗传性神经疾病中最普遍的群体之一(Gorman等，2015)。
[0005]影响中枢神经系统和/或眼部的神经退行性疾病通常与线粒体功能障碍有关；所述疾病可能是散发性或家族性的：例如，与年龄相关的散发性神经退行性疾病包括帕金森氏病(PD)，阿尔茨海默氏病(AD)，年龄相关性黄斑变性(AMD)，糖尿病性视网膜病变，青光眼。
[0006]家族性神经退行性疾病包括家族性PD，AD，亨廷顿氏病，色素性视网膜炎(RP)，斯塔加特氏病。
[0007]线粒体疾病(PMD和SMD)在生化和遗传上都是异质的，到目前为止，其复杂性阻止了有效治疗方法的开发。对于大多数患者，治疗仅限于预防或治疗并发症，例如糖尿病，心脏损害和癫痫。可用的治疗是支持性的(不能解决主要缺陷)或针对线粒体功能障碍的特定方面。因此，迄今为止尚无有效的疗法，治疗已确立的线粒体疾病患者仍然存在极大挑战(Lightowlers等，2015；Viscomi等，2015)。最近，已测试了线粒体生物发生/动力学或线粒体清除/质量控制的特异性调节作为体外和体内MD模型的可能治疗策略(Cerutti等,2014；Civiletto等,2018；Civiletto等,2015；Johnson等,2013；Viscomi等,2011)。尽管有一些令人鼓舞的数据，但随后的方法产生了不一致的结果，并且在不同的MD模型中均无效[(Lightowlers等,2015；Viscomi等,2015)综述]。因此，需要更有效地调节线粒体途径作为MD的治疗策略。
[0008]对于神经退行性疾病，例如PD或AD，尚未有有效疗法。AD是痴呆的最常见原因，占病例的60
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80％，而工业化国家PD的患病率据估计在60岁以上人群中为1％，这是迄今为止卫生系统的重要负担，因为迄今的治疗选择大部分是针对疾病症状的(Barnes&Yaffe，2011；de Lau&Breteler，2006)。
[0009]微小RNA(miRNA)是基因表达的基础精细调节剂，由于具有同时调节参与疾病发病机理和进展的多种分子途径的能力，代表了具有前景的治疗工具。miRNA的调节已出于治疗目的应用于不同疾病，并已在特定情况下达到临床前和临床阶段(Broderick&Zamore，2011；Christopher等，2016；Janssen等，2013；Ling等，2013)。miRNA在神经元存活中起着关键作用，而且越来越多的证据表明miRNA调控的基因网络的改变会增加神经退行性疾病的风险(Hebert&De Strooper，2009)。miR
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181家族成员由位于三条独立染色体上的三个独立的初级转录本产生。每个转录本产生两条前体序列，总共六条前体序列。每个前体产生两条miRNA链：引导链或5p，以及信使链或3p，共十种成熟miRNA形式：miR
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181a
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5p,miR
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181a
‑1‑
3p,miR
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181a
‑2‑
3p,miR
‑
181b
‑
5p,miR
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181b
‑1‑
3p,miR
‑
181b
‑2‑
3p miR
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181c
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5p,miR
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181c
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3p,miR
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181d
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5p和miR
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181d
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3p。5p成熟序列在哺乳动物组织中显示最大丰度表达水平(Karali等,2016)；且包含相同的5
’“
种子”序列，提示了显著程度的功能性冗余(Henao
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Mejia等,2013；Ji等,2009)。如本文所用，六种成熟5p miRNA定义为：miR
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181a
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1,miR
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181a
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2,miR
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181b
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1,miR
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181b
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2,miR
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181c,和miR
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181d。miR
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181a
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1和miR
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181a
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2的成熟形式，以及miR
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181b
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1和miR
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181b
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2在序列上是相同的；miR
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181c成熟形式与miR
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181a相比有一个核苷酸的不同，而miR
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181d成熟形式与miR
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181b有一个核苷酸的不同。miR
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181a和miR
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181b(miR
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181a/b)在脊椎动物中是高度保守的，且在大脑和视网膜的不同区域中高度表达(Boudreau等,2014；Karali等,2016)，且近来被报道靶向涉及线粒体依赖性细胞死亡(Hut本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】其中：A是与miR
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181a和/或miR
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181c互补的MPS SEQ，优选从核苷酸9到核苷酸12经修饰以产生凸起；B是与miR
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181b和/或miR
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181d互补的MPS SEQ，优选从核苷酸9到核苷酸12经修饰以产生凸起；S是4
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6个核苷酸的间隔子序列，优选为4个核苷酸；S2是4至6个核苷酸的中央间隔子序列，优选为6个核苷酸，优选对应于限制性内切酶位点，优选为XbaI限制性内切酶的位点。n1和n2是独立选自3、6和24的数字，优选地在3、6和12之间，最优选地n是3，n1和n2可以相同或不同。13.根据权利要求11或12所述应用的miR
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181的抑制剂，其中X1,X2,X3,A是3
’
TTGTAAGTn1n2n3n2ACAGCCACTCA 5
’
(SEQ ID NO.113)其中根据IUPAC命名学n1＝
ꢀꢀ
A或C或Gn2＝
ꢀꢀ
A或C或Tn3＝
ꢀꢀ
A或G或T或其中X1,X2,X3,B是3
’
TTGTAAGTn
’
1n
’
1n
’
2n
’
3ACAGCCACCCA 5
’
(SEQ ID NO.114)其中根据IUPAC命名学n
’
1＝
ꢀꢀ
C或G或Tn
’
2＝
ꢀꢀ
A或G或Tn
’
3＝
ꢀꢀ
A或C或T；或其中n1＝3且n2＝3；或其中S由4个核苷酸组成，优选S＝tagc；或其中S2由6个核苷酸组成，优选S2＝Tctaga。14.根据权利要求3
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10任一所述应用的miR
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181的抑制剂，其中所述序列还包含一个或多个锁核酸(LNA)核苷酸和一个或多个非锁核苷酸，其中至少一个非锁核苷酸包含化学修饰，优选锁核酸(LNA)核苷酸具有2'至4'亚甲基桥，优选化学修饰为2'O
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烷基或2'卤素修饰。15.根据前述权利要求中任一项所述应用的miR
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181的抑制剂，其中所述抑制剂由选自以下的序列组成：SEQ ID No.6,SEQ ID No.7,SEQ ID No.8,SEQ ID No.9,SEQ ID No.10,SEQ ID No.11,SEQ ID No.12或SEQ ID No.13。16.根据前述权利要求中任一项所述应用的miR
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181的抑制剂，其中所述miR
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181的抑制剂与至少一种其他试剂一起使用。17.根据权利要求16所述应用的miR
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181的抑制剂，其中所述至少一种其他试剂是如权利要求1至15中任一项所定义的miR
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【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：泰莱托恩基金会，
类型：发明
国别省市：