一种使目的基因沉默的CasRx制剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种使目的基因沉默的CasRx制剂和应用，属于基因工程技术领域，所述CasRx制剂包括CasRx mRNA和sgRNA；所述CasRx mRNA编码CasRx蛋白，所述CasRx蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述sgRNA依据目的基因设置。本发明专利技术将CasRx mRNA和针对靶基因的sgRNA直接导入靶细胞，弥补了基于CasRx的高效定向基因沉默系统在mRNA制剂领域的空白，同时解决了AAV病毒搭载的CasRx系统的上述缺陷，本发明专利技术提供的CasRx制剂简单、快速、高特异性，能够快速高效高特异性的对靶标基因进行表达量敲低和RNA干扰。和RNA干扰。和RNA干扰。

【技术实现步骤摘要】
一种使目的基因沉默的CasRx制剂及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，尤其涉及一种使目的基因沉默的CasRx制剂及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，CRISPR/Cas9技术因其强大且便捷的DNA编辑能力而受到广泛关注。2016年，张锋实验室发现了一种新的Cas蛋白Cas13a，可以靶向RNA进行切割。之后人们又陆续发现了靶向RNA 的Cas13b、Cas13c。由于Cas13家族蛋白靶向RNA的特点，理论上在一些特定疾病的检测和治疗上具有独特优势，因而成为近年来的研究热点。2018年，加州大学伯克利分校Patrick Hsu实验室发现了Cas13d家族。他们发现与RNA干扰技术相比，Cas13d介导的基因沉默具有更高的特异性(与数百个shRNA脱靶相比，Cas13d没有脱靶)和敲除效率(shRNA达到65％，Cas13d达到96％)。而与Cas9介导的基因敲除技术相比，Cas13d介导的基因沉默不会改变基因组DNA，因此这种基因沉默是可逆的，从而对一些后天性疾病(如因不良生活习惯导致的高血脂等后天代谢性疾病)的治疗更有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种使目的基因沉默的CasRx制剂，其特征在于，包括CasRx mRNA和sgRNA；所述CasRx mRNA编码CasRx蛋白，所述CasRx蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述sgRNA依据目的基因设置；所述CasRx mRNA与sgRNA的质量比为5～100:1。2.根据权利要求1所述的CasRx制剂，其特征在于，所述CasRx mRNA还包括编码核定位信号肽的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的CasRx制剂，其特征在于，所述编码核定位信号肽的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。4.根据权利要求1所述的CasRx制剂，其特征在于，所述CasRx mRNA来自于SEQ ID No.3～18...

【专利技术属性】
技术研发人员：张苗苗，洪丹，胡迅，
申请(专利权)人：深圳市瑞吉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：