一种缬草总生物碱提取物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种缬草总生物碱提取物的制备方法，该方法包括将缬草用水和/或含有0.1

【技术实现步骤摘要】
一种缬草总生物碱提取物及其制备方法


[0001]本专利技术属于制药领域，涉及一种缬草总生物碱提取物及其制备方法。

技术介绍

[0002]缬草(Valeriana offcinalis L.)为败酱科植物，全世界有广泛分布，多为根及根茎入药。缬草具有解痉、止痛与镇静、安神的功效，对跌打损伤、心神不安、心悸失眠、痛经、经闭、风湿痹痛等症都能起到一定的治疗作用。缬草主要含挥发油、环烯醚萜类、倍半萜类、生物碱类、木脂素类、黄酮类活性成分，是优良的天然药物资源。目前针对缬草化学成分和活性的研究报导不多，主要集中在挥发油、环烯醚萜、倍半萜、木脂素类，而对生物碱的研究少之又少。据个别文献报道，缬草生物碱含量在1-5％之间，主要存在与根茎部，其中有缬草碱A、缬草碱B、缬草胺碱、缬草宁碱、猕猴桃碱等多种成分。缬草总生物碱具有抗菌和抗病毒活性，尤其是对革兰氏阳性细菌和轮状病毒具有较好的体外抑制作用。
[0003]目前，针对缬草总生物碱的提取研究尚未见相关文献报导。

技术实现思路

[0004]为了更好地利用缬草生物碱类成分这一宝贵的天然药物资源，申请人使用比较先进和成熟的中药提取纯化技术，并对制备方法和工艺条件进行大量试验摸索，最终得到一种缬草总生物碱提取物的制备方法，使用该方法能够得到含量很高的缬草总生物碱提取物，并且该提取物还具有很高的药效活性。
[0005]上述目的是通过以下技术方案实现的：
[0006]一种缬草总生物碱提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0007](1)将缬草用水和/或含有0.1-0.5％盐酸的乙醇溶液提取，将乙醇提取液调节pH至7.0-8.0，然后浓缩成稠膏；
[0008](2)将上述稠膏用中等极性的有机溶剂萃取，分离萃取液并浓缩、干燥萃取部位；
[0009](3)将上述萃取部位进行大孔吸附树脂纯化，上柱浓度为3-15mg/mL；上柱量为1-5BV；洗脱剂为50-90％乙醇；洗脱剂流速为0.5-2BV/h，药液上柱后先用水洗脱，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得缬草总生物碱提取物。
[0010]优选地，步骤(1)中，将缬草先用水煎煮提取，再用含有0.1-0.5％盐酸的乙醇溶液回流提取，将乙醇提取液调节pH至7.0-8.0，然后与水提取液一起浓缩成稠膏。
[0011]优选地，所述乙醇溶液的浓度是60％。
[0012]优选地，所述乙醇溶液中含有0.3％的盐酸。
[0013]其中，步骤(2)中，所述中等极性的有机溶剂指的是乙酸乙酯、丙酮、正丁醇，优选乙酸乙酯。
[0014]其中，步骤(3)中，所述大孔吸附树脂的类型为XAD-2、AB-8或HP-10，优选XAD-2。
[0015]优选地，步骤(3)中，所述上柱浓度为5mg/mL。
[0016]优选地，步骤(3)中，所述上柱量为3BV。
[0017]优选地，步骤(3)中，所述洗脱剂为70％乙醇。
[0018]优选地，步骤(3)中，所述洗脱剂流速为1.5BV/h。
[0019]根据本专利技术的具体实施例，得到其中一种效果最佳的制备方法，其步骤如下：
[0020](1)将缬草先用10倍重量水煎煮提取1.5小时，过滤，将水提取液浓缩成稠膏，药渣再用10倍重量60％乙醇(含0.3％盐酸)回流提取1.5小时，过滤，将乙醇提取液加氢氧化钠调节pH至7.5后浓缩至无醇味，然后加入到上述稠膏中，继续浓缩成稠膏；
[0021](2)将上述稠膏用乙酸乙酯萃取，分离萃取液并浓缩、干燥萃取部位；
[0022](3)将上述萃取部位进行大孔吸附树脂纯化，选择树脂类型为XAD-2，上柱浓度为5mg/mL；上柱量为3BV；洗脱剂为70％乙醇；洗脱剂流速为1.5BV/h，药液上柱后先用水洗脱，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得缬草总生物碱提取物。
[0023]本专利技术中所涉及的百分比浓度均为体积浓度，如0.3％盐酸指的是每100ml乙醇溶液中含有0.3ml的盐酸；60％乙醇指的是每100ml乙醇水溶液中含有60ml的乙醇。
[0024]使用以上方法所制备得到的缬草总生物碱提取物，该提取物也在本专利技术的保护范围之内。
[0025]本专利技术的有益效果是：
[0026](1)本专利技术能从缬草药材中分离纯化得到高浓度的总生物碱提取物，总生物碱含量最高可达25％左右，同时还能保证较高的产物收率。
[0027](2)本专利技术所制备的缬草总生物碱提取物具有很高的药效活性，尤其是在抑制马拉色菌方面的药效活性很高，在治疗花斑癣、毛囊炎、脂溢性皮炎等与马拉色菌相关疾病方面具有很好的应用前景。
[0028]更为具体的技术方案详见具体实施方式。
具体实施方式
[0029]下面通过具体实施例对本专利技术进行详细说明。需要强调的是，所述的具体实施例仅用以解释本专利技术而不是用于对保护范围进行限定，在以下实施例基础上所作出的任何改进或等同替换都在本专利技术的保护范围内。此外，本专利技术中所涉及的各种实验操作，均为本领域的常规技术，文中没有特别说明的部分，本领域的普通技术人员可以参照本专利技术申请日之前的各种常用工具书、科技文献或相关的说明书、手册等加以实施。
[0030]以下实施例中总生物碱的含量测定使用的是本领域所熟知的紫外分光光度法，用盐酸小檗碱标准品制备标准曲线，检测波长410nm。
[0031]以下实施例中的抑菌试验使用本领域所熟知的牛津杯抑菌圈法：将糠秕马拉色菌活化培养并用液体培养基配制成浓度为106cfu/ml的菌悬液，吸取0.5ml菌悬液于灭菌后的营养琼脂培养基中，放置牛津杯；将各待测物用水稀释到相同的浓度(0.01g/ml)，然后注入牛津杯，注入体积为0.2ml，37℃静置培养24h后测量抑菌圈直径，蒸馏水为空白对照，计算抑菌率。
[0032]实施例1提取工艺研究
[0033](1)取缬草，用10倍重量水煎煮提取2次，每次1.5小时，合并二次提取液，浓缩，干燥。
[0034](2)取缬草，用10倍重量40％乙醇(含0.3％盐酸)回流提取2次，每次1.5小时，合并
二次提取液，加氢氧化钠调节pH至7.5，浓缩，干燥。
[0035](3)取缬草，用10倍重量60％乙醇(含0.3％盐酸)回流提取2次，每次1.5小时，合并二次提取液，加氢氧化钠调节pH至7.5，浓缩，干燥。
[0036](4)取缬草，用10倍重量80％乙醇(含0.3％盐酸)回流提取2次，每次1.5小时，合并二次提取液，加氢氧化钠调节pH至7.5，浓缩，干燥。
[0037]检测干膏中的总生物碱含量，并根据干膏和药材重量计算提取物收率，结果见表1。
[0038]从表1中可以看出，采用水煎煮提取时，提取物收率很高但总生物碱含量偏低；采用乙醇回流提取时，总生物碱含量很高但提取物收率偏低。同时还能看出，从含量和收率综合评价，60％乙醇的提取效果要优于40％和80％乙醇。
[0039]为了在提高总生物碱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种缬草总生物碱提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将缬草用水和/或含有0.1-0.5％盐酸的乙醇溶液提取，将乙醇提取液调节pH至7.0-8.0，然后浓缩成稠膏；(2)将上述稠膏用中等极性的有机溶剂萃取，分离萃取液并浓缩、干燥萃取部位；(3)将上述萃取部位进行大孔吸附树脂纯化，上柱浓度为3-15mg/mL；上柱量为1-5BV；洗脱剂为50-90％乙醇；洗脱剂流速为0.5-2BV/h，药液上柱后先用水洗脱，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即得缬草总生物碱提取物。2.如权利要求1所述缬草总生物碱提取物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，将缬草先用水煎煮提取，再用含有0.1-0.5％盐酸的乙醇溶液回流提取，将乙醇提取液调节pH至7.0-8.0，然后与水提取液一起浓缩成稠膏。3.如权利要求1所述缬草总生物碱提取物的制备方法，其特征在于：所述乙醇溶液的浓度是60％。4.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊义涛，蔡凯，曾庆奇，王红芳，
申请(专利权)人：武汉惠尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：