本发明专利技术公开了一种玉叶解毒颗粒对照提取物及其制备方法和特征图谱，该玉叶解毒颗粒对照提取物为玉叶解毒颗粒的乙酸乙酯萃取部位，含异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C。本发明专利技术还公开了玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法，取玉叶解毒颗粒，加甲醇和冰醋酸的混合溶液，超声，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯溶液，蒸干，即得。本发明专利技术公开了玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱，HPLC特征图谱包括5个特征峰。该玉叶解毒颗粒对照提取物制备方式简单，可以表征玉叶解毒颗粒的整体特征，可以用于对玉叶解毒颗粒进行质量检测，特异性好，效率高。效率高。效率高。
【技术实现步骤摘要】
一种玉叶解毒颗粒对照提取物及其制备方法和特征图谱
[0001]本专利技术涉及中药质量控制
，具体地说，涉及一种玉叶解毒颗粒对照提取物及其制备方法和玉叶解毒颗粒对照提取物的特征图谱及其用途。
技术介绍
[0002]玉叶解毒颗粒收载于《卫生部药品标准》中药方剂第十八册，处方由玉叶金花、山银花、菊花、野菊花、岗梅、山芝麻和积雪草等7种中药成分配伍而成，具有清热解毒，辛凉解表，生津利喉等功效，用于防治外感风热引起的感冒，咳嗽，咽喉炎，尿路感染。在该部颁标准中，仅有鉴别项下对积雪草对照药材和积雪草苷的薄层色谱鉴别，难以全面控制其内在质量，该品种质量标准的质控力度较弱。
[0003]2018年最新修订标准中，新增了处方中的山银花及山芝麻的TLC色谱鉴别方法和测定菊花与野菊花中蒙花苷的HPLC色谱研究方法。即便如此，上述药品标准的质量控制方法仍具有操作繁琐，对照物的性质和作用单一，检测成本高的缺点。
[0004]异绿原酸是玉叶解毒颗粒中的主要物质成分，该成分药用历史悠久，极具临床应用价值，其中异绿原酸A、B和C是二咖啡酰奎宁酸类化合物，是一类由奎宁酸与数目不等的咖啡酸通过酯化反应缩合而成的有机酸类天然成分，具有显著的抗菌和抗病毒作用，由于异绿原酸A、B和C互为同分异构体，虽然其药理活性较好，但制备高纯度单体的难度较大，因此，极大程度降低三种化合物的深入研究和应用，玉叶解毒颗粒现有质量标准也没有对三种物质的检测和控制。
[0005]目前，我国药品质量标准和对照物质都是针对单一物质成分控制，这种以单一化学成分表征重要整体质量的模式无法真正控制和评价中药质量，与中医药整体观亦不相符，如若对同一药品中多个成分或多种原料进行控制需要使用多种对照物质，多次不同的质量控制方法，由此会造成时间上和成本上的浪费，此外还可以采用多指标成分的质量评价模式，但该模式又受到中药化学对照品分离难度大、单体稳定性差和实验成本过高等因素的制约。
[0006]有鉴于上述缺陷，特提出本专利技术。
技术实现思路
[0007]本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种玉叶解毒颗粒对照提取物及其制备方法和特征图谱。该玉叶解毒颗粒对照提取物制备方式简单，特征图谱的特异性好，可以表征玉叶解毒颗粒的整体特征。
[0008]为解决上述技术问题，本专利技术采用技术方案的基本构思是：
[0009]本专利技术的第一目的在于提供一种玉叶解毒颗粒对照提取物，所述对照提取物为玉叶解毒颗粒的乙酸乙酯萃取部位，包括异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C，所述异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的总含量为0.30～0.55mg/g。
[0010]本专利技术的第二目的在于提供一种如上方案所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的制
备方法，制备方法包括：取玉叶解毒颗粒，加入甲醇和冰醋酸的混合溶液溶解，超声，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解后用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯溶液，蒸干，得到玉叶解毒颗粒对照提取物。
[0011]在玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法中乙酸的加入主要是为了保持提取物中酚酸类物质，特别是异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C的稳定性，提高部分化合物的提取率，也可以选用其他酸性物质。申请人在实验中发现，强酸和其他有机酸会对色谱峰有一定的影响，为消除该影响，有利于色谱峰的表现，本申请中优选乙酸。
[0012]进一步的方案，每克玉叶解毒颗粒中加入4～8ml甲醇和冰醋酸的混合溶液。
[0013]进一步的方案，所述的甲醇和冰醋酸的混合溶液中甲醇：冰醋酸的体积比为100～25:1，优选50:1。
[0014]进一步的方案，残渣加水溶解后用乙酸乙酯萃取2次～3次，优选2次。乙酸乙酯的用量按照试验常规用量。
[0015]玉叶解毒颗粒粉末能溶于甲醇，但用甲醇溶解后得到的溶液含有大量的杂质成分，实验发现，用乙酸乙酯对玉叶解毒颗粒甲醇溶液进行萃取，可以减少样品中的杂质，消除其对目标物质成分的色谱峰的影响。因此，在玉叶解毒颗粒对照提取物的制备过程中，先用甲醇溶解，再用乙酸乙酯萃取去除杂质，最后用甲醇定容。实验中还发现，在玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法中，乙酸乙酯起到的是萃取除杂的作用，其用量多少对结果影响不大，本方法不限定其具体用量。
[0016]本专利技术的第三目的在于提供一种如上方案所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱，所述玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱包括5个特征峰，按出峰的时间顺序依次编号，2号峰为异绿原酸B对照峰，特征峰1、3～5号的相对保留时间为：1号峰0.81，2号峰1，3号峰1.08，4号峰1.17，5号峰1.35。
[0017]优选的，5个特征峰的归属为：其中1号峰来自菊花、野菊花，2号峰来自玉叶金花、菊花、岗梅、野菊花和山银花，3号峰来自玉叶金花、菊花、积雪草、岗梅、野菊花和山银花，4号峰来自菊花、野菊花，5号峰来自玉叶金花、菊花、积雪草、岗梅、野菊花和山银花。
[0018]通过对HPLC特征图谱的特征峰进行归属后发现，5个特征峰基本涵盖了玉叶解毒颗粒处方的全部药材，除了山芝麻，这说明该方法制备得到的玉叶解毒颗粒提取物能够有效反馈玉叶解毒颗粒的处方信息。另外，通过使用对照品，确定2号峰是异绿原酸B，3号峰是异绿原酸A，5号峰是异绿原酸C，结合特征峰的归属情况可以确定，异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C是来自于玉叶金花、菊花、积雪草、岗梅、野菊花、山银花，是上述物质和玉叶解毒颗粒的主要有效成分。
[0019]本专利技术的第四目的在于提供一种如上方案所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱的构建方法，包括：将获得的玉叶解毒颗粒对照提取物和参照物溶液进行高效液相色谱测定及分析获得HPLC特征图谱；所述高效液相色谱分析包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B，流动相按体积比为10-26:90-74的A相和B相进行梯度洗脱；柱温为40℃；流速为1ml/min；检测波长为325nm；理论塔板数按异绿原酸B峰计算应不低于30000。
[0020]参照物溶液的制备包括：
[0021]异绿原酸A：取对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.7mg的溶液即得。
[0022]异绿原酸B：取对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液即得。
[0023]异绿原酸C：取对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液即得。
[0024]混合对照品：异绿原酸A取2ml，异绿原酸B、异绿原酸C各取1ml，混合加甲醇定容至5ml，即得。
[0025]进一步的方案，梯度洗脱的时间及流动相比例为：从0～15min，流动相A的体积百分含量由10％提高到17％，流动相B的体积百分含量由90％降低到83％，从15～30min，流动相A的体积百分含量为17％，流动相B的体积百分含量为83％，从30～55min，流动相A的体积百分含量由17％提高到20％，流动相B的体积百分含量由83％降低到80％本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种玉叶解毒颗粒对照提取物，其特征在于，所述对照提取物为玉叶解毒颗粒的乙酸乙酯萃取部位，包括异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C，所述异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的总含量为0.30～0.55mg/g。2.一种如权利要求1所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法，其特征在于，取玉叶解毒颗粒，加入甲醇和冰醋酸的混合溶液溶解，超声，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解后用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯溶液，蒸干，得到玉叶解毒颗粒对照提取物。3.根据权利要求2所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法，其特征在于，每克玉叶解毒颗粒中加入4～8ml甲醇和冰醋酸的混合溶液。4.根据权利要求2或3所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法，其特征在于，所述的甲醇和冰醋酸的混合溶液中甲醇：冰醋酸的体积比为100～25:1，优选50:1。5.根据权利要求2-4任一所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的制备方法，其特征在于，残渣加水溶解后用乙酸乙酯萃取2次～3次，优选2次。6.一种如权利要求1所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱，其特征在于，玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱包括5个特征峰，按出峰的时间顺序依次编号，2号峰为异绿原酸B对照峰，特征峰1、3～5号的相对保留时间为：1号峰0.81，2号峰1，3号峰1.08，4号峰1.17，5号峰1.35；优选的，5个特征峰的归属为：其中1号峰来自菊花、野菊花，2号峰来自玉叶金花、菊花、岗梅、野菊花和山银花，3号峰来自玉叶金花、菊花、积雪草、岗梅、野菊花和山银花，4号峰来自菊花、野菊花，5号峰来自玉叶金花、菊花、积雪草、岗梅、野菊花和山银花。7.一种如权利要求6所述的玉叶解毒颗粒对照提取物的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，将获得的玉叶解毒颗粒对照提取物和参照物溶液进行高效液相色谱测定及分析获得HPLC特征图谱；所述高效液相色谱...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹节明，石媛慧，
申请(专利权)人：桂林三金药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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