同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法制造技术

本发明专利技术提供了同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，6种活性成分包括熊果酸、齐墩果酸、苦杏仁苷、梓醇、甘草酸和甘草苷；步骤包括：量取待测川贝清肺糖浆样品，加入醇类水溶液后提取，得到供试品溶液；注入到高效液相色谱仪中，采用HPLC法测试后得到色谱图，其中，流动相A和流动相B分别为乙腈和0.08

【技术实现步骤摘要】
同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法


[0001]本专利技术涉及药物活性成分的检测
，更具体地，涉及同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法。

技术介绍

[0002]咳嗽是一种临床的常见疾病，但却很少能快速治愈。目前，口服化学药物和输液都不能完全快速治愈咳嗽；相比而言，中药制剂副作用小，即便是用药周期稍长(7-10天)也不会有副作用显现，于是中药的优势得到显著体现。
[0003]川贝清肺糖浆来源于医圣张仲景的《伤寒杂病论》中的经典名方，由枇杷叶、苦杏仁、川贝母、甘草、麦冬、地黄、桔梗、薄荷等8味中药组成；其具有清肺润燥和止咳化痰的功效，用于治疗干咳、咽干和咽痛，其效果明显，且安全性好。
[0004]现有川贝清肺糖浆的成品质量标准中没有含量测定方法，对成品质量没有控制指标，而中成药发挥疗效是靠多种活性成分配合，共同作用才能达到预期效果。因此，活性成分的含量测定是中药质量标准中的关键内容之一，对于复方制剂而言，仅针对制剂中的某单一成分或较少的几种成分进行含量测定，是难以客观、全面和灵敏地反应川贝清肺糖浆制剂质量情况的，即难以全面控制中药制剂的质量。
[0005]综上所述，如何准确定量检测川贝清肺糖浆中6种活性成分是本领域技术人员亟需解决的关键技术问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，该方法具有检测速度快、灵敏度高、精确度高和重复性好等优点。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，
[0009]所述6种活性成分分别为：熊果酸、齐墩果酸、苦杏仁苷、梓醇、甘草酸和甘草苷；
[0010]具体包括以下步骤：
[0011]S1、量取待测川贝清肺糖浆样品，加入醇类水溶液后提取，得到供试品溶液；
[0012]S2、注入到高效液相色谱仪中，采用HPLC法测试后得到色谱图；
[0013]S3、以外标法计算得到川贝清肺糖浆中6种活性成分的含量；
[0014]步骤S2中，所述HPLC法采用的流动相A和流动相B分别为乙腈和0.08-0.12％磷酸水溶液。
[0015]本专利技术通过大量的研究得出，采用上述流动相，可以在相对较短的时间内非常有效且准确地测定出川贝清肺糖浆中的熊果酸、齐墩果酸、苦杏仁苷、梓醇、甘草酸和甘草苷，灵敏度高。
[0016]在上述技术方案中，步骤S2中，所述HPLC法采用的梯度洗脱参数为：
[0017][0018]其中，流动相A和流动相B的比例均为体积比。
[0019]进一步地，在上述技术方案中，步骤S2中，还包括，在注入到高效液相色谱仪之前，采用苯甲酰氯衍生化试剂对供试品溶液进行衍生化处理。
[0020]具体地，在上述技术方案中，步骤S2中，所述衍生化处理包括，依次加入三乙胺和苯甲酰氯/乙醚溶液进行衍生化反应。
[0021]具体地，在上述技术方案中，步骤S2中，所述衍生化处理的反应温度和时间分别为20-45℃和15-35min。
[0022]进一步地，在上述技术方案中，步骤S1中，所述醇类水溶液为甲醇水溶液、乙醇水溶液、正丁醇水溶液和异戊醇水溶液中的一种，优选为浓度25-35wt％的乙醇水溶液。
[0023]具体地，在上述技术方案中，步骤S1中，所述提取具体为，将待测川贝清肺糖浆样品溶解于醇类水溶液中，在50-65℃下超声处理。
[0024]在一个优选实施例中，所述提取的具体过程包括，精密量取10ml待测川贝清肺糖浆样品，置于具有密封塞的锥形瓶中，加入50ml 30％乙醇水溶液，密封后精密称重，在55-60℃下超声处理后放置冷却，用30％乙醇水溶液补足减失重量，摇匀后用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液即得供试品溶液。
[0025]进一步地，在上述技术方案中，步骤S1中，所述超声处理的具体工艺条件为：频率40KHz，功率200W，处理时间20-30min。
[0026]详细地，在一个具体实施例中，步骤S2中，所述HPLC法采用的梯度洗脱参数为：
[0027][0028]进一步地，在上述技术方案中，步骤S2中，所述高效液相色谱仪的条件为：
[0029]色谱柱为C18色谱柱；
[0030]和/或，柱温为37-42℃，优选为40℃；
[0031]和/或，流速为0.8-1.2ml/min，优选为1.0ml/min；
[0032]和/或，检测器为二极管阵列检测器。
[0033]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0034](1)本专利技术所提供的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法通过优化流动相，并在此基础上优化梯度洗脱方式，可使川贝清肺糖浆中的活性成分的色谱峰之间的分离度好，干扰小，峰形好，基线平稳，检测方法灵敏度高；
[0035](2)本专利技术所提供的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法通过采用苯甲酰氯衍生化试剂进行衍生化处理能更有效改善和提高色谱峰峰形及分离度，提高检测灵敏度，而且还可准确有效地定量检测低丰度的活性成分；
[0036](3)本专利技术所提供的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法通过超声提取，分离富集待测活性成分，使得检测结果稳定性大大提高，与中药活性成分的其他检测提取方法相比，该方法操作简便，耗时少；
[0037](4)本专利技术所提供的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法具有检测速度快、灵敏度高、精确度高和重复性好等优点，实际应用效果优异。
附图说明
[0038]图1为本专利技术实施例1的川贝清肺糖浆样品中6种活性成分的HPLC图。
具体实施方式
[0039]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本专利技术。
[0040]以下实施例，仅用于说明本专利技术的内容，但不用来限制本专利技术的范围。
[0041]基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的情况下，所获得的其他所有实施例，都应属于本专利技术的保护范围。
[0042]1、材料
[0043]苦杏仁苷对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110820-201808，纯度：88.2％。
[0044]齐墩果酸对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110709-201808，纯度：91.1％。
[0045]熊果酸对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110742-201823，纯度：99.9％。
[0046]甘草苷对照品：中国食品药品检定研究院，批号：111610-201908，纯度：95.0％。
[0047]甘草酸铵对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110731-202021，纯度：96.2％。
[0048]梓醇对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110808-201711，纯度：99.6％。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，所述6种活性成分分别为：熊果酸、齐墩果酸、苦杏仁苷、梓醇、甘草酸和甘草苷；具体包括以下步骤：S1、量取待测川贝清肺糖浆样品，加入醇类水溶液后提取，得到供试品溶液；S2、注入到高效液相色谱仪中，采用HPLC法测试后得到色谱图；S3、以外标法计算得到川贝清肺糖浆中6种活性成分的含量；步骤S2中，所述HPLC法采用的流动相A和流动相B分别为乙腈和0.08-0.12％磷酸水溶液。2.根据权利要求1所述的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，步骤S2中，所述HPLC法采用的梯度洗脱参数为：3.根据权利要求1或2所述的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，步骤S2中，还包括，在注入到高效液相色谱仪之前，采用苯甲酰氯衍生化试剂对供试品溶液进行衍生化处理。4.根据权利要求3所述的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，所述衍生化处理包括，依次加入三乙胺和苯甲酰氯/乙醚溶液进行衍生化反应。5.根据权利要求3所述的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，所述衍生化处理的反应温度和时间分别为20-45℃和15-35min。6.根据权利要求1所述的同时检测川贝清肺糖浆中6种活性成分的HPLC法，其特征在于，步骤S1中，所述醇类水溶液为甲醇水溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄正军，何德苟，肖作武，王世才，陈昊，
申请(专利权)人：葵花药业集团湖北武当有限公司，
类型：发明
国别省市：