一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用技术

本发明专利技术属于胶原蛋白肽制备术领域，具体涉及一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用。本发明专利技术提供的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法通过采用混合酸溶液浸泡，接着进行超声处理，冷冻，然后经两次酶解、辐照处理后即得。本发明专利技术提供的制备方法制得的鱼骨胶原蛋白肽分子量分布集中在1000Da之内，并且水解度高，抗氧化性能好，能有效增加动物对于胶原蛋白的吸收，提高动物的免疫力和抗病能力。免疫力和抗病能力。

【技术实现步骤摘要】
一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于胶原蛋白肽制备术领域，具体涉及一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]胶原蛋白，也称胶原，是细胞外基质的一种结构蛋白质，英文名“collagen”，由希腊文演化而来，多糖蛋白，呈白色，含有少量的半乳糖和葡萄糖，是细胞外基质(ECM)的主要成分，约占胶原纤维固体物的85％。胶原蛋白是动物体中普遍存在的一种大分子蛋白，主要存在于动物的结缔组织(骨、软骨、皮肤、腱、韧等)中，是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占哺乳动物体内蛋白质的25％～30％，相当于体重的6％。在许多海洋生物，如鱼类的皮，占其蛋白质含量甚至高达80％以上。胶原蛋白体内水解后的一些特殊肽链片段，具有免疫增强剂功效，起到抑制和杀灭病菌和病毒的作用及保健作用。
[0003]蛋白质为动物的主要营养物质，饲料配方中都含有一定比例的蛋白质，这些蛋白质成分在动物体内真正被利用的程度也不同，蛋白质生物价越高，蛋白质利用率也越高。一般来说动物蛋白的生物价要高于植物蛋白，但动物蛋白的价格也高于植物蛋白。我国动物蛋白原料资源非常短缺，大多依赖进口。优质动物源性蛋白的价格不断攀升，已严重影响到我国养殖业的利润水平。胶原蛋白粉可作为一种动物源性蛋白营养添加剂，替代或部分替代鱼粉、豆粕，用于混合、配合饲料的生产。
[0004]然而，采用猪和牛皮、骨明胶为原料提取胶原多肽技术的要求虽然不高，在明胶的生产中对环境的污染也很大，属于二次水解加工产品。由于受疯牛病、口蹄疫的影响。欧美、日本等发达国家已经立法禁止利用牛皮生产胶原蛋白。我国水产品综合利用的潜力巨大，然而鱼加工后下脚料及其他副料并没有充分回收利用。鱼骨主要成分为钙和胶原蛋白，鱼骨蛋白质含量约为15％，生物学效用较高。
[0005]中国专利CN 105087729 B公开了一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，：将金枪鱼鱼骨粉碎后进行预处理，然后加入添加剂制成胶原蛋白，最后酶解而制得。该方法虽然生产周期短，得率高，解决了不能规模化、产业化生产的瓶颈问题，但是专利技术的胶原蛋白产率高，但是其得到的胶原蛋白肽的分子量很难集中在100～1000Da之间，导致胶原蛋白产品分子区段不严格，不集中，大分子蛋白与小分子蛋白共同存在，而导致吸收利用率较低等问题。
[0006]因此，亟需研发出一种可以使制得的产品分子量分布集中的鱼骨胶原蛋白制备方法，应用于饲料添加剂领域，能够为禽畜提供有效的营养物质，提高禽畜免疫力和抗病能力。

技术实现思路

[0007]为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用。本专利技术提供的制备方法制得的鱼骨胶原蛋白肽分子量分布集中在1000Da
之内，并且水解度高，抗氧化性能好，应用于饲料添加剂中能有效增加动物对于胶原蛋白的吸收，提高动物的免疫力和抗病能力。
[0008]本专利技术的技术方案是：
[0009]一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：
[0010]S1、去除鱼骨表面的碎肉，洗净，然后加入其质量5～8倍的0.1mol/L的NaOH溶液浸泡3～6h，取出后烘干，然后粉碎过40～60目筛，得鱼骨粉；
[0011]S2、向步骤S1中所得的与鱼骨粉中加入其重量6～10倍的混合酸溶液，搅拌均匀，浸泡2～3h，并加热至45～60℃，超声震荡2-5h，10000～16000r/min离心15～20min后取上清液，将上清液干燥后在-4～-10℃下保存10～12h，得沉淀物；
[0012]S3、向步骤S2所得沉淀物中加入8～15倍的水，调节pH至3.5～5.0，加入胃蛋白酶于30～40℃下，酶解反应1～2h后，再加入复合风味蛋白酶，于温度45～50℃酶解1～3h；两次酶解后，升温至80℃进行酶灭活10min，冷却至28℃，得酶解液；
[0013]S4、向步骤S3所得的酶解液中加入保护剂，静置2～4h后置于辐照反应器中，在常温常压下进行辐照处理，然后经过滤，将滤液浓缩、干燥，得鱼骨胶原蛋白肽。
[0014]进一步地，所述步骤S2中的混合酸溶液为0.3～1.0mol/L的柠檬酸溶液和0.2～0.8mol/L的乙酸溶液按质量比1～4:7～10组成。
[0015]更进一步地，所述步骤S2中的混合酸溶液为0.8mol/L的柠檬酸溶液和0.5mol/L的乙酸溶液按质量比3:8组成。
[0016]进一步地，所述步骤S2中的超声功率为50～70kw。
[0017]进一步地，所述步骤S3中加入胃蛋白酶的量为加入沉淀物质量的0.1～0.5％；所述步骤S3加入复合风味蛋白酶量为加入沉淀物质量的0.1～0.3％。
[0018]更进一步地，所述步骤S3中加入胃蛋白酶的量为加入沉淀物质量的0.3％；所述步骤S3加入复合风味蛋白酶量为加入沉淀物质量的0.2％。
[0019]进一步地，所述步骤S3中进行辐照处理时所用辐照源为
60
Co-γ射线，辐照剂量为1.0～6.0kGy，辐照剂量率为0.6kGy/h。
[0020]进一步地，所述保护剂为D-异抗坏血酸钠和鼠尾草酚按重量比7:1～3组成。
[0021]更进一步地，所述保护剂为D-异抗坏血酸钠和鼠尾草酚按重量比7:2组成。
[0022]另外，本专利技术还提供了一种所述的鱼骨胶原蛋白肽在禽畜饲料中的应用。
[0023]本专利技术中，通过向鱼骨中加入混合酸溶液，由柠檬酸和乙酸按照一定比例组成，二者相互协同作用，在脱钙的同时，还能够促进鱼骨胶原蛋白肽的提取，增强鱼骨胶原蛋白肽的水解度；之后再经超声、冷冻处理，可以将鱼骨中的分子结构打开，使功能区的片段和酶作用位点充分暴露出来，增强其分子间的结合力，从而提高其功能特性和水解度，活化了鱼骨粉内的蛋白质、多糖等生物大分子，还可以增强鱼骨胶原蛋白肽的水溶性，有利于后续两次酶解反应的进行。
[0024]进一步地，通过控制加入酶的种类、次数、酶解时间、酶解pH、温度等条件，能够将进一步提高鱼骨胶原蛋白肽的水解度，并且制得的鱼骨胶原蛋白肽粉的分子量主要集中在1000Da之内，分子量为1000Da以下的胶原蛋白肽比例达到了90％以上，均一性好。最后，向本专利技术的制得中加入的由D-异抗坏血酸钠和鼠尾草酚按一定质量比组成的保护剂，可以避免后续辐照过程中对于鱼骨胶原蛋白肽链上的活性基团的破坏，同时还能够有效提高制得
的鱼骨胶原蛋白肽的抗氧化性能，将其应用在饲料产业更有利于动物对于饲料产品的吸收，并且能够提高动物的抗病能力和免疫能力。
[0025]与现有技术相比，本专利技术提供的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法具有以下优势：
[0026](1)本专利技术提供的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，能够开发一种将废弃鱼骨有效的利用起来，提取出其中胶原蛋白肽的方法，不仅解决了鱼骨丢弃的造成的环境问题，更是变废为宝，有利于资源的循环利用。
[0027](2)本专利技术提供的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法所制得的产品的分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、去除鱼骨表面的碎肉，洗净，然后加入其质量5～8倍的0.1mol/L的NaOH溶液浸泡3～6h，取出后烘干，然后粉碎过40～60目筛，得鱼骨粉；S2、向步骤S1中所得的与鱼骨粉中加入其重量6～10倍的混合酸溶液，搅拌均匀，浸泡2～3h，并加热至45～60℃，超声震荡2-5h，10000～16000r/min离心15～20min后取上清液，将上清液干燥后在-4～-10℃下保存10～12h，得沉淀物；S3、向步骤S2所得沉淀物中加入8～15倍的水，调节pH至3.5～5.0，加入胃蛋白酶于30～40℃下，酶解反应1～2h后，再加入复合风味蛋白酶，于温度45～50℃酶解1～3h；两次酶解后，升温至80℃进行酶灭活10min，冷却至28℃，得酶解液；S4、向步骤S3所得的酶解液中加入保护剂，静置2～4h后置于辐照反应器中，在常温常压下进行辐照处理，然后经过滤，将滤液浓缩、干燥，得鱼骨胶原蛋白肽。2.如权利要求1所述的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的混合酸溶液为0.3～1.0mol/L的柠檬酸溶液和0.2～0.8mol/L的乙酸溶液按质量比1～4:7～10组成。3.如权利要求2所述的鱼骨胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：恽辉，余忠丽，崔志英，王俊青，李天碧，
申请(专利权)人：新疆希普生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：