一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用技术

本发明专利技术涉及嗜酸乳杆菌的技术领域，特别是涉及一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用，其流程简单，获得的冻干粉活菌数量大，菌体收率高；包括以下步骤：S1、嗜酸乳杆菌菌种划线培养；S2、挑选优势菌种培养；S3、再次挑选优势菌种继续培养；S4、发酵罐发酵培养：挑取步骤S3中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至富硒培养基中，温度35

【技术实现步骤摘要】
一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用


[0001]本专利技术涉及嗜酸乳杆菌的
，特别是涉及一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用。

技术介绍

[0002]嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus简称A菌)属乳杆菌科中的乳杆菌属，为革兰氏阳性菌，形态呈细长杆状，无鞭毛，不运动，厌氧或者兼性厌氧；它能利用葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖进行同型发酵，发酵产生DL型乳酸。
[0003]嗜酸乳杆菌在人体整个胃肠道中，"从上而下"调节微生态环境。"下"是指在大肠中，它们也可以释放有益双歧杆菌等其他益生菌生长的物质，增加大肠内益生菌的数量、增强它们的生命力。
[0004]基于嗜酸乳杆菌对人体具有很好的营养保健作用，越来越多的企业以嗜酸乳杆菌冻干粉为食品添加剂制备生物制品和健康食品，那么单位产品活菌数就直接影响产品的功效。因此，在冻干粉生产制备过程中提高活菌数就尤为重要。
[0005]硒具有抗氧化、提高机体免疫力等诸多益生功效，某些益生菌可以将无机硒转化为有机硒，因益生菌可以方便的在食品中进行添加，服用少量的富硒益生菌，即可为人体补充足量的硒元素，且吸收效果好，毒性低，同时兼具有有机硒和益生的双重功效。

技术实现思路

[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用，其流程简单，获得的冻干粉活菌数量大，菌体收率高。
[0007]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，包括以下步骤：
[0008]S1、嗜酸乳杆菌菌种划线培养：嗜酸乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；
[0009]S2、挑选优势菌种培养：挑取平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；
[0010]S3、再次挑选优势菌种继续培养：挑取步骤S2中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；
[0011]S4、发酵罐发酵培养：挑取步骤S3中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至富硒培养基中，温度35-38℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
[0012]S5、培养液离心浓缩，收集菌泥；
[0013]S6、将离心后的菌泥进行冷冻干燥，加入保护剂，充分混合均匀，进行真空冷冻干燥，冻干至水分含量极低时取出；
[0014]S7、粉碎、过筛后包装。
[0015]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，所述步骤S1、S2、S3中改良MC培养基组成为大豆蛋白胨5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、乳糖20.0g/L、碳酸钙
10.0g/L、琼脂15.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，余量为无菌水，pH为5.0-7.0，使用稀盐酸或者氢氧化钠调节pH。
[0016]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，所述步骤S4中富硒培养基组成为：所述步骤S4中富硒培养基组成为大豆粉5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、猪肾粉20.0g/L、蚕豆粉10.0g/L、碳酸钙10.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，余量为无菌水，pH为5.0-7.0，使用稀盐酸或者氢氧化钠调节pH。
[0017]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，所述步骤S1、S2、S3中在培养过程中，在开始培养10h后加入硒酸钠，使硒浓度达到100μg/ml。
[0018]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，所述步骤S6中保护剂组成为：脱脂奶粉70g/L、蔗糖10g/L、水苏糖20g/L、低聚果糖10g/L、低聚半乳糖10g/L、、抗坏血酸钠5g/L、余量为无菌水。
[0019]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，所述步骤S4中接种量为6％。
[0020]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的应用，一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法制备的高活性嗜酸乳杆菌在制备用于治疗肠道菌群失调引起的病症药物中的应用。
[0021]与现有技术相比本专利技术的有益效果为：第一、通过三次培养，选取了活力较为旺盛强大的菌种，并且通过添加无机硒进行培养，使嗜酸乳杆菌将无机硒转化为自身体内的有机硒，增强了自身活力，提高自身免疫力，使得活性更高；第二、通过在富硒培养基中培养，进一步增加嗜酸乳杆菌体内的硒含量，提高使用者的免疫力，增强抗疾病能力；第三、通过添加水苏糖、低聚果糖以及低聚半乳糖，这些糖是指由2-10个相同的或不同的单糖单位，通过糖苷键聚合的直链成分或分支的一类低度聚合糖的总称，人体内没有代谢在这些糖的酶，使这些糖和嗜酸乳杆菌直接进入到肠道被益生菌所利用，成为益生菌的增殖因子，促进体内有益菌群的发展。
具体实施方式
[0022]下面结合实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。
[0023]实施例1：
[0024]本专利技术的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，包括以下步骤：
[0025]S1、嗜酸乳杆菌菌种划线培养：嗜酸乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在改良MC培养基(大豆蛋白胨5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、乳糖20.0g/L、碳酸钙10.0g/L、琼脂15.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，余量为无菌水)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养56小时，在开始培养10h后加入硒酸钠，使硒浓度达到100μg/ml；
[0026]S2、挑选优势菌种培养：挑取平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基(大豆蛋白胨5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、乳糖20.0g/L、碳酸钙10.0g/L、琼脂15.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，余量为无菌水)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养70小时，在开始培养10h后加入硒酸钠，使硒浓度达到100μg/ml；
[0027]S3、再次挑选优势菌种继续培养：挑取步骤S2中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基(大豆蛋白胨5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、乳糖20.0g/L、碳酸钙10.0g/L、琼脂15.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，余量为无菌水)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养62小时，在开始培养10h后加入硒酸钠，使硒浓度达到100μg/ml；
[0028]S4、发酵罐发酵培养：挑取步骤S3中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至富硒培养基(大豆本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、嗜酸乳杆菌菌种划线培养：嗜酸乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；S2、挑选优势菌种培养：挑取平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；S3、再次挑选优势菌种继续培养：挑取步骤S2中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至改良MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；S4、发酵罐发酵培养：挑取步骤S3中平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至富硒培养基中，温度35-38℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；S5、培养液离心浓缩，收集菌泥；S6、将离心后的菌泥进行冷冻干燥，加入保护剂，充分混合均匀，进行真空冷冻干燥，冻干至水分含量极低时取出；S7、粉碎、过筛后包装。2.如权利要求1所述的一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法，其特征在于，所述步骤S1、S2、S3中改良MC培养基组成为大豆蛋白胨5.0g/L、牛肉浸粉3.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、乳糖20.0g/L、碳酸钙10.0g/L、琼脂15.0g/L、胡萝卜浸出物10.0g/L、维生素10.0g/L以及酪蛋白水解物5g/L，...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩峰，郭仁妹，李仁靓，
申请(专利权)人：苏州微克生活科技有限公司，
类型：发明
国别省市：