一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高n

【技术实现步骤摘要】
一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法


[0001]本专利技术涉及一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，属于油脂深加工领域。

技术介绍

[0002]n-3型多烯酸(n-3PUFAs)对人体具有重要的生物学意义，特别是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，能够显著地防治心血管疾病，辅助炎症修复，促进婴幼儿感官器官的正常发育，被广泛地应用于保健食品和药品中。
[0003]市面上的n-3PUFAs产品主要有乙酯型、甘油酯型和游离脂肪酸型三种形式，甘油酯型中n-3PUFAs的含量相对较低，在30％左右，不能满足人们的保健及药用需求。乙酯型和游离脂肪酸型中n-3PUFAs含量可以达到90％，但乙酯型鱼油在人体中消化和吸收都较为困难，而游离脂肪酸型稳定性差。因此，浓缩成甘油酯型是最佳的选择。
[0004]酶法是现阶段生物制造的趋势，相比传统化学法，酶法富集n-3PUFAs具有绿色、安全、副产物少等优点。然而现有的酶法反应的时间一般较长，需要10～36h，甚至更久，因此会增加成本。因此，亟需一既种可以缩短酶法反应时间、又符合绿色安全理念的酶法富集n-3PUFAs的方法。

技术实现思路

[0005]鉴于上述和/或现有富集油脂中n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法中存在的耗时长的问题，本专利技术提供了一种提供了一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，通过本专利技术的方法，能够在2h内实现现有酶法6～12h甚至更久的效果，对于酶法富集油脂中n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的工业化提供了重要技术支撑。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，所述方法包括，取油脂、脂肪酶、金属离子和水溶液于反应器中，反应一定的时间后，得混合物，脱除混合物中的游离脂肪酸，即可得到富含n-3多不饱和脂肪酸的甘油酯；
[0007]其中，所述脂肪酶为来源于圆筒状假丝酵母(Candida cylindracea)的AY"Amano"400SD和AY"Amano"30SD、来源于米根霉(Rhizopus oryzea)的DF"Amano"15、来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的Candida antarctica lipase A和来源于曲霉(Aspergillus sp.)的NovozymET2.0中的一种或多种。
[0008]在本专利技术的一种实施方式中，所述金属离子包括钙离子(Ca
2+
)、镁离子(Mg
2+
)、锰离子(Mn
2+
)和铁离子(Fe
3+
)中的一种或者多种。
[0009]在本专利技术的一种实施方式中，所述金属离子的浓度为5-50mmol/L。
[0010]在本专利技术的一种实施方式中，所述水溶液包括纯水溶液、磷酸盐缓冲溶液、柠檬盐缓冲溶液中的一种或者多种；缓冲盐溶液浓度为0.05～0.5mol/L。
[0011]在本专利技术的一种实施方式中，该反应在pH＝5～8的环境下进行反应。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述油脂为含有n-3多不饱和脂肪酸的油脂。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述油脂包括鱼油、藻油、亚麻籽油等。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，所述水溶液和油脂的质量比为0.2～3:1。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述反应时间为1～12h，反应温度为20～50℃。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述反应时间优选1～4h，更优选2h。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，所述脂肪酶的添加量为150～15000U/g油脂。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述脱除混合物中的游离脂肪酸的方法为碱炼脱酸或分子蒸馏，优选碱炼脱酸。
[0019]本专利技术取得的有益效果：
[0020](1)本专利技术提供一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，脂肪酶催化水解法直接将鱼油、藻油等作为原料，反应过程中不添加其他有机溶剂，反应原料为鱼油和缓冲溶液，催化剂为脂肪酶，与传统化学法相比，反应条件温和、副产物少、环保；与酶法酯交换和酯化相比，更加安全和成本更低；与现有的酶法水解相比，本专利技术的反应时间大大缩短、降低成本。
[0021](2)本专利技术选用的金属离子可以促进脂肪酶的水解速率，大幅度缩短反应时间，仅需2h即可达到较好的富集效果，具有较高的工业化生产意义。而且选用的脂肪酶具有n-3PUFAs具有较强的水解“歧视性”，利用此特性可以快速水解饱和和单不饱和脂肪酸使得EPA和DHA在甘油酯中得到富集。
附图说明
[0022]图1为本专利技术实施例1中鱼油反应前后的甘油酯脂肪酸组成分析气相色谱图，其中，a为反应前，b为反应后。
[0023]图2为本专利技术鱼油水解之后得到的油相产物的组成分析液相色谱(示差检测器)图，其中，a为实施例1的水解产物组分分析谱图，b为对比例1中水解产物组分分析谱图。
具体实施方式
[0024](1)n-3PUFAs含量的测定方法
[0025]取50mg样品于10mL刻度管，加入2mL 0.5mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液，65℃皂化30min，冷却后加入2mL25％体积分数的三氟化硼-甲醇溶液，70℃水浴5min；加入2mL正己烷振荡3-4min提取脂肪酸甲酯，加入4mL饱和NaCl溶液，取上层溶液加入无水硫酸钠振荡(10000rpm离心5min)，注射器吸取过膜，利用气相色谱进行检测，其中，气相色谱检测的操作参数为：选用7890气相色谱仪，火焰离子化检测器(FID)；气相色谱柱为60m
×
0.32mm
×
2.5μm；氮气流速设定为1.0mL/min，进样器和检测器的温度设置为250℃。初始柱温保持在80℃下0.5min，然后以40℃/min的速率从80℃增加到165℃。以4℃/min的速率将柱温升高至230℃，并在230℃下保持4min。利用峰面积归一法计算n-3PUFAs含量。
[0026](2)水解产物的分析方法
[0027]取水解后的混合产物20mg，加入1mL流动相(正己烷：异丙醇：甲酸＝15:1:0.003)溶解，过膜，液相色谱检测，液相色谱操作参数为：HPLC，Sepax HP硅胶柱(孔径5μm，4.6mm
×
250mm)示差检测器；以1.0mL/min的速率用己烷、异丙醇和甲酸(15:1:0.003，v/v/v)洗脱。
利用峰面积归一法计算水解下的游离脂肪酸的含量。
[0028]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。
[0029]在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是本专利技术还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，其特征在于，所述方法包括，取油脂、脂肪酶、金属离子和水溶液于反应器中，反应一定的时间后，得混合物，脱除混合物中的游离脂肪酸，即可得到富含n-3多不饱和脂肪酸的甘油酯；其中，所述脂肪酶来源于圆筒状假丝酵母Candida cylindracea的AY"Amano"400SD和AY"Amano"30SD、来源于米根霉Rhizopus oryzea的DF"Amano"15、来源于南极假丝酵母Candida antarctica的Candida antarctica lipase A和来源于曲霉Aspergillus sp.的NovozymET2.0中的一种或多种；所述金属离子包括钙离子、镁离子、二价锰离子和三价铁离子中的一种或者多种。2.如权利要求1所述一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，其特征在于，所述金属离子的浓度为5-50mmol/L。3.如权利要求1或2所述一种提高n-3多不饱和脂肪酸甘油酯富集效率的方法，其特征在于，所述水溶液包括纯水溶液、磷酸盐缓冲溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：王小三，杨壮壮，金文华，程昕祎，江聪，黄健花，常明，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：